均质/加热条件下组分缺失型原料豆乳理化特性研究

为探究脂氧酶缺失型大豆品种东富3、7S球蛋白缺失型大豆品种东富2为原料生产的豆乳理化性质，以普通大豆品种黑农64为对照，分别探究均质（80MPa）、加热工艺（95℃、25min）对3种原料豆乳理化性质的影响。结果显示未均质加热前，东富3生豆乳的蛋白溶解度、游离巯基含量在3种豆乳中最高，平均粒径、浊度、粘度、离心沉淀率最低;东富2生豆乳的蛋白溶解度、游离巯基含量显著低于正常品种黑农64生豆乳（p＜0.05），平均粒径、浊度、粘度、离心沉淀率显著大于黑农64生豆乳（p＜0.05），即生豆乳中东富3物理稳定性最高，东富2物理稳定性最低。均质后，所有豆乳的蛋白溶解度、游离巯基含量均增加，平均粒径、浊度、粘度均降低。东富2和黑农64豆乳均质后离心沉淀率显著下降（p＜0.05），而东富3豆乳离心沉淀率与均质前无显著差异（p＞0.05），但物理稳定性仍然最高，东富2均质豆乳物理稳定性仍最低。加热后3种豆乳的蛋白溶解度、平均粒径、粘度均增加，而游离巯基含量、离心沉淀率均下降，较与均质，加热对豆乳物理稳定性提升效果更显著（p＜0.05）。加热后东富3豆乳平均粒径和离心沉淀率仍然最低，尽管受热后东富2豆乳粒径增加幅度大于其他2个品种，但较高的粘度使其离心沉淀率下降程度最大，物理稳定性优于加热后的黑农64豆乳。豆乳微观结构图显示均质、加热前后3种豆乳油滴尺寸变化与粒径结果一致。     

黄瓜脂氧合酶基因CsLOX2的克隆及表达分析

【目的】以华北型黄瓜种质26号为材料克隆黄瓜脂氧合酶基因CsLOX2的cDNA全长并分析其序列特征,在此基础上研究该基因在果实发育进程中的表达模式、酶活性变化及相应的C6醛类物质含量,为研究脂氧合酶基因在黄瓜果实醛类香气物质形成中的作用机制奠定基础。【方法】以华北型黄瓜种质26号为材料,通过RT-PCR和RACE技术克隆黄瓜的脂氧合酶基因CsLOX2的cDNA全长并分析其生物信息学特征,对CsLOX2在果实发育进程中的表达模式进行Real-time PCR检测,通过气质联用（GC-MS）技术测定相应的C6醛类香气物质的含量并利用分光光度法测定LOX酶活性。【结果】华北型黄瓜种质26号的CsLOX2基因cDNA全长2 878 bp,ORF区为2 640 bp,编码879个氨基酸,推导的蛋白质分子量为99.39 kD,等电点为6.28。通过氨基酸序列比对发现,该基因编码的氨基酸序列具有脂氧合酶家族的3个重要特征区域及植物LOX中皆具有的6个高度保守的组氨酸,该序列与其它物种的脂氧合酶氨基酸序列具有较高的同源性。根据其N端序列特征推测CsLOX2属于I类LOX,具有13-LOX活性。Real time-PCR分析结果表明,该基因在花后3 d表达量最高,此后下降,至花后15 d最低;脂氧合酶的活性自开花当天逐渐上升,至花后12 d达到最高,此后下降;C6醛类香气含量在果实发育始期较高,随果实发育进程逐渐下降,至花后12 d最低。【结论】利用RACE技术克隆了华北型黄瓜种质26号脂氧合酶基因CsLOX2的cDNA全长,序列分析表明该基因具有植物LOXs的特征结构域。CsLOX2基因表达高峰先于脂氧合酶活性高峰的出现,C6醛类香气含量在果实发育始期较高,随果实发育进程逐渐下降。该研究结果将为进一步探讨脂氧合酶基因在黄瓜果实醛类香气物质形成中的作用机制奠定基础。     

桃脂氧合酶基因(LOX)家族cDNA全长克隆与序列分析

根据脂氧合酶保守序列设计的简并引物,从瑞蟠5号桃(Prunus persica cv ‘Rui pan 5')果肉总RNA中扩增出795 bp的脂氧合酶(lipoxygenase,LOX)基因的保守序列,并结合GenBank中公开的LOX基因的EST序列经Blast比对分析、序列组装之后设计基因特异引物(GSP).利用RACE技术共获得3条不同的桃LOX基因cDNA全长序列,分别命名为PpLox1～3(GenBank登录号:EU883638、FJ029110和FJ032015).序列分析结果表明,这3个桃LOX基因家族成员与其它植物的LOX基因尽管在核酸水平上的差异比较大.但在蛋白水平上却有较高的同源性.通过对桃LOX基因蛋白序列和其它植物LOX进行系统进化树分析,发现PpLox1属于13-LOX,PpLox2-3属于9-LOX.     

大豆种子脂肪氧化酶的缺失对其农艺性状的影响

为探明大豆种子脂肪氧化酶的缺失是否会对大豆的农艺性状造成影响,对从中国南方10省（市）征集的174份大豆种质资源中筛选出的种子脂肪氧化酶缺失体与非缺失体材料和从国外引种的缺失体近等位基因系农艺性状间的差异进行了研究,结果表明,大豆种子脂肪氧化酶的缺失对开花期、生育期、株高、节数、分枝数、单株荚数、单株粒数、单株产量、百粒重、害虫危害种子程度、脂肪和蛋白质含量等主要农艺性状都没有明显影响,对大豆资源的统计分析结果表明,大豆种子脂肪氧化酶的缺失频率与生态类型无关,与籽粒颜色、形状和脐色有关。     

脂氧合酶在香蕉果实成熟过程中的作用

[目的]探讨脂氧合酶(LOX)在香蕉果实成熟过程中的作用.[方法]选取1 000 μ L·L-1丙烯处理采后不同时间(采后10 h和48 h)的香蕉果实,并分析果皮中MaLOX、MaACS和MaACO等基因表达,LOX活性变化,乙烯释放及其与果实成熟的关系.[结果]采后48 h的香蕉果实,经丙烯处理后果皮中LOX活性及...     

昆虫取食和挥发物诱导的杨树叶片中LOX和PAL活性变化

为了探索昆虫取食诱导的木本植物体内所产生的防御反应,以合作杨（Populus simonii×P.pyramidalis,‘Opera8277’）扦插苗为实验材料,经杨扇舟蛾（Clostera anachoreta）幼虫取食后,检测叶片中茉莉酸（jasmonate,JA）途径中的关键酶——脂氧合酶（lipoxygenase,LOX）及苯基丙酸类合成途径中的限速酶——苯丙氨酸解氨酶（phenylalanine ammonia lyase,PAL）的活性变化。结果显示,LOX和PAL的活性不仅在虫咬叶片中出现增加,在虫咬叶片上部的系统叶片中也有显著升高,表明茉莉酸途径和苯基丙酸类合成途径被激活,而且防御反应被系统性诱导。并且,与虫咬植株邻近的健康杨树叶片中LOX和PAL的增加表明,杨树间存在由昆虫取食诱导挥发物介导的信息传递。熏蒸实验也证明,茉莉酸甲酯（methyl jasmonate,MeJA）能够作为气体信号诱导合作杨植株产生防御反应。     

Response dynamics of three defense related enzymes in cotton leaves to the interactive stress of Helicoverpa armigera (Hübner) herbivory and omethoate application

In order to explore the response dynamics of the activities of defense related enzymes in cotton leaves towards the interactive stress of Helicoverpa armigera herbivory and omethoate application, the activities of phenylalanine ammonia-lyase (PAL), lipoxygenase (LOX), and polyphenol oxidase (PPO) were examined from 6 to 126 h after cotton leaves were treated 12 h of H. armigera herbivory, and then sprayed with 800 mg L–1 omethoate. The results showed that the changes in the activities of PAL, LOX and PPO that occured under the interactive stress of H. armigera herbivory and omethoate application reflected the interactive effects of the two stresses on cotton defense. The similarity between the response dynamics of PAL, LOX, and PPO activities in cotton leaves under the interactive stress and that under H. armigera herbivory treatment alone showed that the induction of H. armigera herbivory on the activities of PAL, LOX and PPO in cotton leaves played a leading role in the interactive effects, and the effect of omethoate application played only a minor role. A joint factor analysis was performed according to a method which has been used to analyze the joint toxicity of pesticides; this analysis sought to clarify if there was a synergistic, antagonistic, or additive effect on PAL, LOX, and PPO activity in cotton leaves resulting from the interactive H. armigera herbivory and omethoate treatment. In the interactive effect on the response of PAL activity in cotton leaves, antagonistic effects of the omethoate application towards H. armigera herbivory were observed at 6 and 12 h. Synergistic effects were then observed at 18 and 30 h. Antagonistic effects were observed from 54 to 78 h and synergistic effects were finally observed at 126 h. The correlation between H. armigera herbivory and omethoate application in the interactive effect on cotton defense responses of LOX activity also fluctuated from synergism to antagonism during the time course. In the interactive effect on PPO activity, only antagonism was observed between H. armigera herbivory and omethoate application. In the interactive stress of H. armigera herbivory and omethoate application on cotton defense responses, omethoate affected the defense responses of cotton to H. armigera herbivory by producing antagonistic and synergistic effects. These results will be useful to understand the relationship between host plant and herbivorous pest.     

高等植物脂氧合酶研究进展

脂氧合酶是植物十八碳酸代谢途径的关键酶,在不同高等植物中脂氧合酶生理特性略有不同。该酶作用的产物对植物的生长发育及其对环境胁迫的反应具有重要的影响,一直是人们研究的热点。因此,文章就高等植物脂氧合酶酶学特性、生理学功能及分子生物学方面的研究进展进行了综述。     

水稻种子成熟和萌发过程中脂氧合酶同工酶活性及其表达水平

水稻种子中有3种脂氧合酶（LOX）同工酶,分别为LOX-1、LOX-2、LOX-3。以本实验室筛选到的LOX-3缺失突变体北陆PL2和正常的水稻品种Koshihikari为材料,研究种子成熟及萌发过程中LOX活性的变化规律。结果显示,2个水稻品种在种子成熟中LOX活性变化规律不一致,Koshihikari开花后10～25d活性升高,以后趋于下降,而北陆PL2花后种子LOX活性基本没有变化;在种子萌发过程中两品种LOX活性变化规律基本一致,萌发初期活性迅速升高,浸水萌发后2d达到峰值,以后开始下降。同工酶分析、半定量RT-PCR结果都显示,在水稻成熟过程中,种子中LOX-3活性和表达水平都显著高于其他两种酶（LOX-1和LOX-2）;在种子萌发过程中,LOX-2活性和表达水平占优势,而LOX-1在种子成熟和萌发过程中都显示较低的活性和表达水平。这表明,水稻种子LOX-3可能与水稻的贮藏特性有关,LOX-2在水稻萌发过程中起主要作用,可能与水稻萌发期间储藏脂质的利用有关或者具有萌发信号的作用,而LOX-1的功能还有待进一步研究。     

苯并噻二唑诱发水稻对稻瘟病抗性中防卫相关酶活性的变化

分析了苯并噻二唑（BTH）诱导水稻对稻瘟病抗性中苯丙氨酸解氨酶（PAL）、肉桂醇脱氢酶（CAD）、过氧化物酶（POD）、脂氧合酶（LOX）、β-1,3-葡聚糖酶和几丁酶等活性的变化。结果表明BTH诱导处理亲和性水稻品种第3叶后提高了处理叶及其上位第4叶中CAD、LOX和β-1,3-葡聚糖酶等的活性;经BTH处理的幼苗接种稻瘟菌后,处理叶和其上位叶中CAD、POD、LOX和β-1,3-葡聚糖酶等活性快速增加,且增长幅度均显著大于对照。几丁酶活性在受稻瘟菌侵染后升高,但BTH诱导处理并不能促进其增加;PAL活性在BTH处理及稻瘟菌接种后均无明显变化。这些结果说明,BTH处理能诱导CAD、POD、LOX和β-1,3-葡聚糖酶等活性的增加,而且这些酶活性的升高可能与BTH诱发系统获得抗性的表现有关。