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61.
哺乳动物体细胞克隆研究进展 总被引:3,自引:0,他引:3
哺乳动物体细胞克隆技术是近年来才发展起来的技术,但体细胞克隆绵羊-多利的诞生却引起了世界轰动,充分显示了其重在的科学研究价值和潜在的应用价值。本文对哺乳动物体细胞克隆技术研究现状,理论基础研究,应用等方面作一综述。 相似文献
62.
对含伪狂犬病病毒Ea株BamH17片段的质粒pUC6.6进行亚克隆,构建了仅含Us9基因约0.6kb片段的重组质粒pSKMN0.6。双脱氧末端终止法进行双链测序,结果表明:Us9存在2种可能的同C-末端的编码形式,分别编码106或98个氨基酸残基,Us9基因与其下游的Us2(28K)基因之间存在约200bp的非转录区,将Ea株Us9基因序列同国外Rice株进行没源比较,发现二者在组成和结构上存在多处保守序列,尤其是潜在的酪氨酸磷酸化位点,C-端疏水性氨基酸以及由连续6个带正电荷的精氨酸残基组成的核定位信号序列,但在N-糖基化位点以及丝氨酸含量上存在较大差异。 相似文献
63.
异三元G蛋白是真核细胞感知外界信号后将信号传递到胞内的重要分子,参与生物体广泛的信号转导。为了研究家蚕体内G蛋白的生理功能及其作用机制,运用生物信息学方法预测了家蚕G蛋白γ1亚基(Gγ1)的序列,设计引物验证预测序列后,克隆了家蚕Gγ1的序列,再通过酶切克隆至表达载体pET-41b(+)后,导入E.coliBL21宿主菌中,经异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组谷胱甘肽硫转移酶(glutathione s-transferase,GST)融合蛋白,并亲和层析纯化表达产物。家蚕Gγ1重组GST融合蛋白经SDS-PAGE电泳和Western blot分析,在分子质量约36 kD处出现特异性蛋白条带,重组蛋白经GST亲和层析柱纯化后,得到了高纯度的融合蛋白,说明已经成功克隆到家蚕Gγ1基因,并在E.coliBL21中高效表达。 相似文献
64.
In this paper we discuss the use of genetic engineering in livestock production. We examine the main two different aspects of genetic engineering: cloning and transgenesis. After commenting what has been expected from both techniques in livestock production in the last 25 years, the practical difficulties for implementing cloning and transgenesis are examined. Apart from technical difficulties, problems derived from the detection of genetically superior animals and evaluation of the clones and the transgenic animals make these techniques less interesting than they appear to be. Most of the observed variability of the economically interesting traits is not genetic, genetic evaluation needs a large number of animals and cloning success will represent a serious loss of genetic variability and the loss of the flexibility needed for markets in constant evolution. There is a risk in transgenic animals of production of new intermediate biochemical products that may be toxic, allergenic or carcinogenic. The benefits produced by transgenic animals hitherto hardly justify this risk. The expectations that genetic engineering produced 25 years ago should be re-examined, considering the risks and the high investment required. 相似文献
65.
牡丹ACC氧化酶基因的克隆与反义载体的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
根据报道的牡丹ACC氧化酶基因(DQ337251)cDNA序列,设计一对特异引物,以牡丹品种"洛阳红"基因组DNA为模板,用PCR扩增方法克隆出牡丹ACC氧化酶基因的部分片段,并将其连接到pMD18-T载体上进行测序.结果表明,克隆的序列全长为467 bp,其中包括一个长度为157 bp的序列,推测它可能是一个内含子,其它序列与已报道序列同源性为98.2%;用SacⅠ和XbaⅠ对重组质粒和载体pBI 121酶切、连接,构建牡丹ACC氧化酶基因的反义表达载体. 相似文献
66.
本文从分化抑制物、培养基的选择内细胞团的分离,胚胎干细胞的分离及鉴定方法等方面系统地综述了猪胚胎干细胞分离克隆的研究进展;并对其未来的应用前景进行展望。 相似文献
67.
猪瘟病毒石门株基因组cDNA片断的扩增与克隆测序 总被引:4,自引:0,他引:4
以猪瘟病毒(HCV)中国石门株强毒的血毒、细胞毒及C系兔化弱毒的细胞毒中提取的总RNA为模板,应用逆转录─聚合酶链式反应(RT一PCR),在合成的两对HCV特异引物引导下,扩增出与预计大小一致的441和300bp两个核酸片断。寡核苷酸探针杂交证实确为HCVP_80和gp44/48蛋白编码区特异性的cDNA片断。扩增片断克隆入pUC_19和pBSK(+)中,并对HCV石门株P_80区cDNA片断进行测序分析,其与国外Alfort、Brescia株同源性分别为90.6%和94.6%。氨基酸水平上同源性高达98.4%。为抗猪瘟病毒P_80区核酶的设计和应用提供了依据。 相似文献
68.
J. Todorov T. Todorova U. Zimmermann W.M. Arnold C. Leiding R. Hahn J. Hahn 《Reproduction in domestic animals》1992,27(5):307-309
Am 27.8.1992 wurde beim Besamungsverein Neustadt (BVN) in Neustadt a.d. Aisch ein geklontes Fleckviehkalb geboren. Die Identität der Abstammung konnte eindeutig gesichert werden. Der erfolgreiche Kerntransfer in einem Versuchsprogramm soll belegen, daβ sich nach der Fusion einer Blastomere aus einem Spenderembryo mit einer in vitro gereiften und enukleierten Empfängeroozyte ein Embryo entwickeln kann, der nach Transfer auf ein Empfängertier zur Geburt eines gesunden Kalbes führt.
Contents: A cloned calf was born in Neustadt ad. Aisch
A cloned "Fleckvieh" calf was born at the Al-Association Neustadt (BVN) in Neustadt a.d. Aisch on August, 27, 1992. The identity of the parentage could be verified undoubtedly. The successful nuclear transfer in an experimental program showed that the fusion of a blastomere from a donor embryo with an in vitro matured and enucleated recipient oocyte led to the development of an embryo, and after transfer to a synchronous recipient to the birth of a healthy calf. 相似文献
Contents: A cloned calf was born in Neustadt ad. Aisch
A cloned "Fleckvieh" calf was born at the Al-Association Neustadt (BVN) in Neustadt a.d. Aisch on August, 27, 1992. The identity of the parentage could be verified undoubtedly. The successful nuclear transfer in an experimental program showed that the fusion of a blastomere from a donor embryo with an in vitro matured and enucleated recipient oocyte led to the development of an embryo, and after transfer to a synchronous recipient to the birth of a healthy calf. 相似文献
69.
番茄环斑病毒(ToRSV)是一种高风险的检疫性有害生物,可侵染桃、李、葡萄、苹果、樱桃等多种植物。2000—2001年,我国从法国进口的葡萄插条上检出过此病毒。以ToRSV悬钩子分离物(Rasp-2)总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增病毒复制酶基因(RdRp)的cDNA片断并将其克隆到pMD18-T载体上。序列测定结果表明,Rasp-2RdRp基因由2133个核苷酸组成,编码711个氨基酸;Rasp-2半胱氨酸蛋白酶和RdRp之间的蛋白酶切割位点为Q/V。Rasp-2与其他分离物及株系RdRp基因的核苷酸序列同源性为79%~84%,氨基酸序列同源性为89%~94%。聚类分析结果显示,葡萄黄脉株系(GYV)与其他分离物及株系关系最远,Rasp-2与其他分离物及株系亲缘关系较近。证实Rasp-2与另外2个悬钩子分离物Rasp和Rasp-1的核苷酸序列存在明显变异。 相似文献
70.