高致病性禽流感病毒人工感染小鼠组织病理学观察

应用经SPF鸡胚增殖的虎源高致病性禽流感病毒A/Tiger/Harbin/01/2003（H5N1）株（其对MDCK细胞的TCID50为10^-7.36/0.05mL）,经滴鼻途径人工感染小鼠,无菌采取感染致死的小鼠和对照组小鼠的肺、脑等脏器进行了组织病理学、免疫组化以及透射电镜观察。结果显示：感染致死小鼠以肺脏损害最为明显。光镜观察,肺泡腔不同程度缩小,胞腔内有少量蛋白样浆液渗出,肺泡间隔不同程度增宽,肺内小血管及肺泡间隔的毛细血管扩张、淤血,支气管充血。免疫组化染色发现,在支气管上皮细胞、一些肺泡上皮细胞和浸润的单核细胞胞浆内见到该病毒抗原的阳性染色颗粒。电镜观察,小鼠肺泡扁平上皮细胞表面和肺泡腔中见到短杆型和圆型的流感病毒样粒子。     

犬瘟热新型疫苗研究进展

犬疸热(CD)是由犬瘟热病毒(CDV)感染引起的犬及其他肉食动物的一种急性或亚急性、高度接触性传染病.近年来虽广泛应用弱毒疫苗预防CD,但世界各地仍有犬及野生动物感染CDV并造成CD流行的报道.随着分子生物学技术的深入发展,国内外学者应用基因工程技术对犬瘟热预防进行了深入研究,并取得了丰富的研究成果.笔者对近几年来犬瘟...     

小反刍兽疫病毒N基因的原核表达

目的是表达出小反刍兽疫病毒的核蛋白,并鉴定其活性.根据GenBank发表的小反刍兽疫病毒(PPRV)Nigeria 75/1株N基因序列,对其进行基因优化并合成.设计引物,利用PCR的方法扩增PPRV-N基因,将该基因片段定向克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,构建原核表达栽体pET-28a-N.阳性质粒转化原核...     

裂谷热研究进展

裂谷热是一种烈性毒性人畜共患病,被OIE列为必须报告的疫病.幼年动物感染后,病死率高达100%.人感染此病后,病死率约为1%.2010年3月,南非再度发生疫情,导致186人感染,18人死亡;并调查出154例动物感染,146例死亡,感染动物病死率高达95%.该病的流行不但对人类健康和养殖业构成威胁,其病毒还可能被用于生物...     

虎巴氏杆菌病病例

多杀性巴氏杆菌（Pasteurllosis multocida）可感染多种畜禽、皮毛动物、野生动物和野禽，引起发病和死亡，对畜牧业生产、皮毛动物养殖和野生动物保护危害严重。在我国，黑熊、小熊猫、豺、狼、麝鼠、鹿、斑马、水貂、蓝狐和孔雀均有发病死亡的报道，国内外未见有虎发生巴氏杆菌病的报道。2004年7月至8月问，我国某动物园养殖的3只东北虎发生急性死亡，经临床观察、病理剖检、细菌分离、动物实验和生化试验，确诊为多杀性巴氏杆菌感染。     

埃博拉病毒抗体间接血凝检测方法的建立

以纯化后的埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)糖蛋白(GP)作为抗原,致敏醛化的绵羊红细胞,进行最佳反应条件优化,建立间接血凝抗体检测方法。以EBOV高免马血清、纯化的IgG和精制免疫球蛋白F(ab’)_2为待检样品进行检测,并将检测结果与假病毒中和试验检测结果相比较。结果显示,该方法可特异性检测EBOV抗体,与马尔堡病毒、裂谷热病毒等的阳性血清均不发生反应;与假病毒中和试验测得的抗体效价增长规律相一致。结果表明,本试验成功建立了EBOV抗体间接血凝检测方法,该方法安全、简便、快捷,为EBOV疫苗免疫后的效果评价提供了又一新的检测方法。     

H5亚型虎源流感病毒血凝素单抗制备及胶体金试纸条的研制

以H5N1亚型虎源流感病毒免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,用间接ELISA试验检测细胞培养上清,获得2株阳性杂交瘤细胞克隆株,命名为3A13和1B8.分别制备腹水后进行纯化,获得了抗H5亚型虎源流感病毒血凝素的单克隆抗体,用制备的单克隆抗体结合胶体金免疫层析技术,制备了H5亚型虎源流感病毒免疫胶体金快速诊断试纸条.该试纸条对H5N1虎源流感病毒鸡胚培养毒、H5亚型禽流感病毒标准抗原,以及24份虎疑似感染H5N1亚型虎源流感病毒感染病料和小鼠模型病料等检测结果为阳性,同时对H7和H9亚型禽流感病毒标准抗原及传染性支气管炎、新城疫抗原等检测结果为阴性;与HA-HI和RT-PCR的平行对比试验表明,试纸条检测敏感度与血凝试验和血凝抑制试验的敏感性相符.本试验所研制的免疫胶体金诊断试纸条可用于H5亚型虎源流感病毒的特异诊断和流行病学调查,为开发成品化检测试纸条奠定基础.     

强化野鸟携带H7N9禽流感病毒研究保障公共卫生安全

禽流感的流行与其宿主的地理分布、迁徙季节性及种类具有很大关系。禽流感病毒对宿主之外的物种适应或者本身基因片段之间重配就可能产生新的毒株,虽然发生的几率很小。但如果变成现实就会带来致命的后果,比如新型H7N9流感疫情的暴发。所以说,对野鸟携带禽流感的调查非常重要,对了解禽流感病毒的进化及生态性都有举足轻重的作用,如禽流感的不同谱系、候鸟迁徙及地理分布对禽流感进化的影响。     

表达犬瘟热病毒核蛋白的重组犬2型腺病毒构建与包装

为构建表达犬瘟热病毒核蛋白的重组犬2型腺病毒,用MluⅠ和SphⅠ双酶切真核表达载体pVAXLPN,获得CDVN基因表达盒,将CDVN基因表达盒克隆入预先用SspⅠ酶切后的线性化质粒pVAXAE3中,构建含CDVN基因表达盒的转移质粒pVAX△E3LPN。用NruⅠ和SalⅠ双酶切转移质粒pVAX△E2LPN。回收E3区部分缺失的含CDVN基因表达盒的目的片段,定向克隆入同样酶切处理含CAV-2全基因组的质粒载体ppoly2-CAV-2中,构建E3区部分缺失的包含CDV N基因表达盒的重组质粒pCAV-2-CDVLPN。重组质粒pCAV-2-CDVLPN经AscⅠ酶切获得线性化基因组CAV-2-CDVLPN。此基因组与NruⅠ和Sal Ⅰ分别酶切CAV-2 SY基因组获得的片段混合,利用脂质体介导共转染MDCK细胞,重复转染3次后。出现典型CAV-2病变,经电镜观察和酶切鉴定,证明表达犬瘟热核蛋白的重组犬2型腺病毒包装成功。     

寨卡病毒致病机理和疫苗研究进展

寨卡病毒病是一种由寨卡病毒感染引起的重要的人兽共患病,可引起胎儿小头畸形。2015年寨卡病毒病在巴西和美国等国家大规模暴发流行,此次暴发流行被世界卫生组织定为世界公众健康紧急事件,目前在中国已有输入性病例的报道。尽管全球目前尚无批准的疫苗和治疗制剂上市,但许多研究机构相继开展了寨卡病毒疫苗和致病机理等研究,为有效防控寨卡病毒,加快对寨卡病毒新型疫苗的研究,现对近年来寨卡病毒致病机理和疫苗的研究进展进行综述。