热休克蛋白对胚胎早期发育的影响

热休克现象是1962年R itossa首先在果蝇幼虫动物试验中发现的。试验发现,果蝇唾液腺染色体在过热环境中会发生形态改变。此现象与细胞中一类特殊蛋白质———热休克蛋白(Heat shock protein,HSP)的合成有关,因其最先在热休克现象中发现而得以命名。热休克蛋白除了因热休克刺激产生以外,还有很多因素(如缺氧、低温、氧化反应、化学物质、各种重金属、放射线、某些线粒体呼吸链抑制剂及某些药物等)都可以诱导产生,因此热休克蛋白又称为应激蛋白质(stress protein)。HSP70和HSP90是分子质量分别在70,90 ku左右的热休克蛋白,是热休克蛋白家…     

CLC对冻融牛精子体外获能及抗氧化、抗凋亡能力的影响

本研究目的是评价CLC对牛冻融精子获能、抗氧化及抗凋亡能力的影响。试验分对照组和CLC处理组(0.5、1.0、1.5及2.0 mg/mL),检测冻融牛精子体外获能后的酪氨酸磷酸化水平以及冻融牛精子抗氧化基因和细胞凋亡基因的表达。结果:1)在0.5 mg/mL CLC处理组冷冻效果最好,与对照组和1.0 mg/mL CLC处理组相比无显著差异;2)冻融牛精子获能处理后,在1.0 mg/mL CLC处理组精子蛋白酪氨酸磷酸化水平最高,与对照组相比无显著差异;3)在0.5 mg/mL CLC处理组冻融牛精子抗氧化基因CAT、GPX和SOD的表达量与对照组相比显著升高(P<0.05);4)在0.5和1.0 mg/mL CLC处理组凋亡基因Caspase-3、Caspase-8和BAX的表达量与对照组相比显著降低(P<0.05)。结论:添加CLC可以改进冻融牛精子获能和抗氧化、抗凋亡能力。     

不同抗生素替代品组合对断奶仔猪生长性能、腹泻及抗氧化能力的影响

为研究不同替代品组合替代饲用抗生素的可行性,选取240头、（28±3）日龄的"杜×长×大"断奶仔猪,随机分为5组：对照组（基础日粮）、抗生素组（基础日粮＋75 mg/kg金霉素＋40 mg/kg杆菌肽锌＋100 mg/kg喹乙醇）、处理1组（基础日粮＋2 000 mg/kg发酵中草药）、处理2组（基础日粮＋500 mg/kg丁酸梭菌＋1 000 mg/kg三丁酸甘油酯）及处理3组（基础日粮＋450 mg/kg博落回散＋800 mg/kg无水甜菜碱）。每组设5个重复,每重复12头。试验期32 d。在试验第14、32天时,每重复随机选取1头仔猪,前腔静脉采血,分离血浆,测定其生长性能、腹泻指数及血液抗氧化指标。试验结果表明：①1~14 d时,相比对照组,处理3组可显著提高平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）（P < 0.05）,显著降低料重比（F/G）（P < 0.05）。15~32 d时,处理3组的料重比比对照组和抗生素组极显著降低（P < 0.01）。1~32 d时,与抗生素组相比,处理3组料重比显著降低（P < 0.05）。②1~14 d时,与对照组相比,处理3组腹泻指数极显著降低（P < 0.01）。在15~32和1~32 d时,处理2组、3组的腹泻指数均极显著低于对照组（P < 0.01）;处理3组与抗生素组腹泻指数差异不显著（P > 0.05）,但均比对照组有一定程度降低（P > 0.05）。③与对照组和抗生素组相比,处理3组14 d时的血浆总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性、谷胱甘肽（GSH）含量显著或极显著增加（P < 0.05;P < 0.01）,丙二醛（MDA）、过氧化氢（H₂O₂）含量极显著或显著降低（P < 0.01;P < 0.05）;32 d时GSH含量极显著增加（P < 0.01）,MDA含量极显著或显著降低（P < 0.01;P < 0.05）。比较各试验处理,日粮中添加博落回散（450 mg/kg）＋无水甜菜碱（800 mg/kg）能降低断奶仔猪的料重比,提高抗氧化性能,减少腹泻,效果优于其他组合,可作为抗生素替代品在仔猪饲料中使用。     

松辽黑猪前体脂肪细胞分离及诱导分化

为建立松辽黑猪前体脂肪细胞分化体系,了解其增殖规律及相关的脂肪标志基因在细胞分化过程中的相对表达。选用7日龄松辽黑猪,用Ⅰ型胶原酶消化脂肪组织得到前体脂肪细胞,传代后进行形态学观察并绘制生长曲线,利用传统"鸡尾酒"法进行诱导分化,油红O对分化后的细胞进行染色,判断分化效果,提取总RNA,对成脂标志基因进行相对表达量分析。结果表明:分离获得的松辽黑猪原代前体脂肪细胞可贴壁生长,形似成纤维细胞,细胞生长曲线符合细胞生长规律,近似"S"形;诱导分化后的细胞具有成熟脂肪细胞的典型特征,细胞内聚集大量脂滴;诱导后第10天,细胞内甘油三酯含量极显著提高;成脂标志基因PPARγ、C/EBPα在分化后的细胞中相对表达量极显著升高(P0.01),而FoxO1在分化前相对表达量最高,第5天表达量与第0天相比极显著下降(P0.01),但第10天的表达量极显著高于第5天(P0.01),且第10天表达量与第0天无显著差异(P0.05)。试验建立了松辽黑猪前体脂肪细胞的分离体系,为进一步研究松辽黑猪脂肪沉积与代谢机制以及改善肉质提供了依据。     

snRNA在哺乳动物中基因表达研究进展

小核RNA(snRNA)是真核生物转录后加工过程中RNA剪接体的主要成分,参与mRNA前体的加工过程。通过调控哺乳动物基因表达的能力为基因治疗癌症和神经退行性等疾病提供了新的理论依据。本文就snRNAs的分类、功能、基因表达染色质结构以及转录后修饰进行简要概述,为哺乳动物后续的相关研究提供参考。     

猪精子获能期间蛋白质磷酸化时间依赖性的上调

通过获能猪精子酪氨酸磷酸化蛋白分离和表达,来确定精子获能的最佳状态.将猪精子悬浮于改良的Tris缓冲液(mTBM)获能培养基中,在体积分数为5% CO2孵箱37 ℃培养,以考马斯亮蓝染液染色的方法来评价精子获能状态, 经过SDS-PAGE分离后,进行Western免疫印迹分析,检测获能猪精子间酪氨酸磷酸化蛋白的分布.有27,47 ku的2种蛋白发生酪氨酸磷酸化,其中27 ku的蛋白酪氨酸磷酸化水平自精子体外培养后呈递增趋势,而 47 ku的蛋白酪氨酸磷酸化水平在精子培养1.5 h时最高,后呈递减趋势,1.5 h时获能状态最佳.     

生猪常见传染病检疫与处理

近些年来随着我国生猪养殖优惠政策的不断出台,养猪业早已成为养殖产业的一个重要生力军。然而伴随着生猪养殖规模的不断扩大,猪疫病尤其是传染性疫病日益增多,不但在猪群中广为扩散,还可以通过屠宰、加工、烹调等食用环节传染给人类,危害人类的身体健康。因此,加强动物检疫站卫生检疫工作,及时找出并处理病源,早已成为动物检疫站的重要工作之一。本文就检疫站对生猪常见的传染病检疫及处理方法,进行探讨,仅供参考。     

抑制UCHL1对猪卵母细胞体外成熟、透明带泛素化及多精入卵的影响

试验旨在研究抑制泛素羧基末端水解酶-1（UCHL1）对猪卵母细胞体外成熟、透明带泛素化及多精入卵的影响。利用DAPI染色、Hoechst染色及SDS-PAGE等方法检测猪卵母细胞体外成熟率、透明带泛素化水平及多精入卵等情况。结果表明,添加不同浓度UCHL1抑制剂（10、20、25、30 μmol/L,二甲基亚砜（DMSO）及对照组）体外培养猪卵母细胞46 h后,对照组成熟率为86.22%,而30 μmol/L UCHL1抑制剂组的成熟率为15.30%,且各处理组间成熟率差异显著（P<0.05）;经Western blotting检测,各处理组的透明带在约61、80、106 ku处均发生不同程度的泛素标记,通过灰度值分析差异显著（P<0.05）;进行体外受精试验后,发现对照组透明带精子黏附数最多,精子入卵数较少,添加30 μmol/L UCHL1抑制剂组的透明带精子黏附数最少,几乎没有精子入卵。结果显示,UCHL1抑制剂对猪卵母细胞的体外成熟有一定影响,随着UCHL1抑制剂浓度的增加,透明带发生泛素化的程度逐渐降低,且UCHL1可调节透明带精子黏附及多精入卵。     

稀释液中添加N-乙酰半胱氨酸对猪精液冷冻保存效果的影响

本文以手握法采集的猪精液为试验材料,以解冻后精子的活率、顶体完整率、低渗膨胀率、运动学参数(VAP、LIN、ALH、BCF)和膜脂质过氧化反应为评定标准,旨在探讨N-乙酰半胱氨酸对猪精液冷冻保存效果的影响。结果表明,在冷冻稀释液中添加1mmol/L的N-乙酰半胱氨酸可以显著地提高解冻后精子的活率和顶体完整率,降低精子的低渗膨胀百分率。在运动学参数方面,只有VAP显著升高,而对其它运动学参数没有影响。在冷冻稀释液中添加N-乙酰半胱氨酸对膜脂质过氧化反应没有影响。     

海藻糖替代部分甘油对延边黄牛冻融精子质量的影响

[目的] 探讨是否可以通过补充海藻糖来降低冷冻保护剂中甘油的浓度,从而提高冻融精子的质量。[方法] 分别用6%甘油（Ⅰ组）及3%甘油+0、50、100和150 mmol/L海藻糖（Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组）处理精子,用精子-微生物动（静）态图像检测分析系统（CASA）检测冻融精子的活力、质膜完整性和顶体完整性及动力学相关参数,筛选出最佳海藻糖处理浓度用于后续试验。通过Western blotting方法检测精子蛋白酪氨酸磷酸化水平评价精子获能状态,Hoechst 33342/PI/JC-1联合染色法检测精子的活率及线粒体膜电位,色霉素A₃（CMA₃）染色法检测精子DNA的完整性,部花青540（M540）和Yo-Pro-1染色检测精子膜脂质紊乱水平。[结果] 与Ⅰ组相比,Ⅱ组精子的活力、质膜完整性、顶体完整性以及曲线速度（VCL）和直线率（STR）均显著下降（P<0.05）,Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组组精子的活力、VCL、直线速度（VSL）、平均路径速度（VAP）、直线性运动（LIN）和STR均显著升高（P<0.05）。因此,后续试验选用100 mmol/L海藻糖处理精子。与新鲜精子相比,冻融精子获能后其蛋白酪氨酸磷酸化的条带显著减少（P<0.05）,冻融精子的活率和线粒体膜电位均显著降低（P<0.05）;冻融活精子和死精子的高度膜脂质紊乱水平均显著升高（P<0.05）,100 mmol/L海藻糖可显著降低高度膜脂质紊乱水平（P<0.05）;冻融精子的鱼精蛋白缺失率显著增加（P<0.05）,且Ⅱ组和100 mmol/L海藻糖组精子的鱼精蛋白缺失率显著低于Ⅰ组（P<0.05）。[结论] 海藻糖可作为一种新型冷冻保护剂降低甘油毒性,用100 mmol/L海藻糖替代部分甘油可显著改善延边黄牛冻融精子的质量。