半胱氨酸对猪卵母细胞体外成熟、体外受精及GSH水平的影响

体外受精技术也称胚胎生产技术（invitro production,IVP）,包括卵母细胞的体外成熟、精子的获能、卵子的体外受精和受精卵的体外培养等几个连续的过程。半胱氨酸是GSH的前体物质,在牛体外胚胎生产过程中疏基复合物能增加细胞内GSH的合成,在受精和胚胎的开始阶段保持高浓度GSH可以增加发育率。试验的目的是评价半胱氨酸对猪卵母细胞的成熟率、受精率及成熟培养时期卵母细胞内GSH水平的影响,现报道如下。     

精子获能的分子机制及研究进展

哺乳动物的精子在刚射入雌性生殖道时,或从附睾取出后,并不具备受精能力,必须在雌性生殖道内经过一段时间,发生生理及形态学的变化才能获得受精能力,这一过程被称为精子获能[1]。精子获能是精     

延边黄牛体细胞克隆激活条件的研究

从激活前恢复时间、激活方式、激活培养时间等3个方面研究延边黄牛体细胞克隆的适宜激活条件.结果表明:延边黄牛体细胞克隆激活的理想条件为激活前恢复培养25~30 min,采用离子霉素(Ionomycin,Ion) 6-Dimethyaminopurin(6-DMAP)激活方式,激活培养4 h.     

非特异性免疫促进和远红外线放射剂对大白鼠体生长和睾丸发育的影响

本次研究的目的是评价Barodon(非特异性免疫促进和远红外线放射剂)对大白鼠体生长和睾丸发育的影响。试验分1个对照组和4个Barodon处理组(0.10%、0.15%、0.30%和1.0%)。在0.3%Barodon处理组,18、26和34周龄时体重显著提高。在0.15%Barodon处理组18周龄时睾丸重达到最高且显著(P<0.05)高于其他组,在0.30%Barodon处理组26周龄时睾丸重达到最高且显著(P<0.05)高于其他组。在0.30%Barodon处理组,18周龄时曲精细管的直径显著增加。在0.15%和0.30%Barodon处理组6周龄时精细胞比例高于对照组。在5个处理组18周龄时血清中睾酮含量显著上升。这些结果表明:0.15%￣0.30%Barodon处理有诱导大白鼠体生长和早熟的倾向。     

制剂学技术提高植酸酶热稳定性的研究进展

植酸酶作为一种生物型饲料添加剂对提高饲料中磷的利用率、动物的生产性能及减轻动物高磷排泄物对环境的污染具有重要意义,因此,植酸酶的研究有重要的科学和实用价值。但由于其热稳定性差,推广和应用受到了限制。     

温度和保存时间对猪精子顶体酶活性的影响

为了探讨温度和液相保存时间对猪精子顶体酶活性的影响,采用紫外分光光度计检测猪精子顶体酶活性。结果显示:(1)鲜精、冷休克和热休克每106精子顶体酶活性分别为5.38、5.20和5.16 mIU,差异不显著(P>0.05)。(2)鲜精在4、17、25、30、37和39℃时每106精子顶体酶活性分别为4.29、5.01、5.03、5.17、4.78和4.61 mIU,随着温度的升高精子顶体酶活性逐渐提高,当温度达到30℃时达到最高,且4℃和30℃时差异显著(P<0.05)。(3)液相精液在4℃保存超过1 d时精子顶体蛋白酶活性显著下降(P<0.05);在17、25和39℃保存超过2 d时顶体酶活性显著下降(P<0.05),且在17℃保存效果较好。结论是猪精子顶体蛋白酶活性受温度的影响,在17℃的条件下3 d内保存的猪精子顶体酶活性最佳。     

获能和冻融猪精子间细胞肌动蛋白表达的差异

【目的】分析获能与冻融猪精子细胞肌动蛋白表达的差异。【方法】提取获能和冻融的猪精子蛋白,经过SDS-PAGE分离后,进行Western-blot免疫印迹分析,检测获能与冻融猪精子间细胞肌动蛋白的区别。【结果】新鲜和冻融猪精子细胞肌动蛋白单体的分子质量均约为43ku,但获能猪精子细胞肌动蛋白单体的分子质量约为43和86ku。【结论】冻融的猪精子细胞肌动蛋白单体分子质量约为43ku,但数量有所下降;获能后的猪精子出现了一种新型肌动蛋白亚单位,其分子质量约为86ku。     

抗冻剂、CB和离心极化对猪GV期卵母细胞冷冻效率的影响

【目的】评价2种冷冻保护剂(EDS和EPS)、细胞松弛素B(CB)和离心极化处理对猪GV期卵母细胞冷冻效果的影响。【方法】分别应用EDS和EPS 2种冷冻保护剂、CB(设5.0,7.5和10.0μg/mL 3个水平)和离心极化处理,对猪卵母细胞进行玻璃化冷冻保存,解冻后用台盼蓝染色法和Hochest33342染色法分析猪卵母细胞存活率及随后的成熟率。【结果】EPS组和EDS组冻融后的猪卵母细胞存活率和成熟率均无显著差异。以EPS作冷冻保护剂时,冻融后裸卵组的存活率显著高于COCs组(P<0.05)。7.5μg/mL CB处理组的裸卵存活率显著高于对照组(P<0.05);7.5μg/mL CB+离心极化处理组裸卵存活率与成熟率均显著高于CB单处理组和对照组(P<0.05)。【结论】同等条件下,猪GV期裸卵的冷冻效果好于COCs;CB或CB+离心极化均能改善GV期猪卵母细胞冷冻效果。     

LDL对玻璃化冷冻解冻培养MⅡ期猪卵母细胞线粒体膜电位和透明带泛素化水平的影响

本试验旨在探究添加低密度脂蛋白（low density lipoprotein,LDL）对玻璃化冷冻解冻后MⅡ期猪卵母细胞发育率、线粒体膜电位及透明带泛素化水平的影响。采用线粒体膜电位特异性探针JC-1检测各处理组线粒体膜电位,并采用SDS-PAGE及Western blotting方法分析不同处理组MⅡ期猪卵母细胞透明带蛋白泛素化水平。结果显示,玻璃化冷冻法处理中,10 mg/mL LDL处理组MⅡ期卵母细胞正常率和成熟率（71.92%和69.86%）显著高于对照组（58.26%和54.55%）（P<0.05）,最接近未冷冻组。10 mg/mL LDL处理组MⅡ期卵母细胞线粒体膜电位显著高于对照组、1和20 mg/mL LDL组（P<0.05）。免疫印迹结果显示,未冷冻组和LDL处理组MⅡ期卵母细胞ZP1、ZP2及ZP3蛋白分别在61、80、106 ku发生不同程度的泛素化标记;10 mg/mL LDL处理组ZPs（ZP1、ZP2、ZP3）蛋白泛素化水平显著高于1和20 mg/mL LDL组（P<0.05）,但显著低于非冷冻组（P<0.05）。结果表明LDL可改善玻璃化冷冻解冻培养后MⅡ期猪卵母细胞成熟率、线粒体膜电位及透明带泛素化水平。