Annexin A2基因敲除MDCK细胞系的构建

应用Crispr/Cas9基因编辑技术敲除MDCK细胞中的Annexin A2基因,并验证其是否为ε毒素在MDCK细胞表面的受体。根据Crispr/Cas9靶点设计原则设计靶点,构建PALentiCRISPR v2重组质粒。借助Crispr/Cas9技术,将构建好的质粒转染至MDCK细胞中,用嘌呤霉素筛选敲除Annexin A2蛋白的MDCK细胞株,并通过测序和Western blot验证敲除效果。通过细胞毒性试验验证MDCK细胞膜表面的Annexin A2蛋白是否为ε毒素的受体蛋白。测序结果和Western blot结果表明,通过Crispr/Cas9技术成功敲除了MDCK细胞的Annexin A2基因,但细胞毒性试验结果表明,敲除Annexin A2基因并不能减弱ε毒素对MDCK细胞的毒性。结果表明,Annexin A2蛋白不是ε毒素在MDCK细胞表面的受体,研究结果为今后MDCK细胞其他蛋白的敲除提供了试验方法,构建的Annexin A2基因敲除的MDCK细胞也为Annexin A2蛋白引起的其他疾病的研究奠定了基础。     

Screening of Probiotics Inhibiting E. coli K88 in vitro

The probiotics tested in the experiment were isolated from the intestinal of weaning piglets.The isolated probiotics and E.coli K88 were inoculated into the culture of intestinal porcine epithelial cell-1 (IPEC-1).The activity of lactate dehydrogenase (LDH) in the supernatant was measured after incubating for 2.5 h.At the same time, the probiotics and E.coli K88 were co-cultured in vitro, the number of E.coli K88 was counted and the probiotics which could be resistant to the E.coli K88 were selected 2.5 h later.The results showed that the Lactobacillus casei and Bacillus coagulans could significantly reduce LDH activity (P<0.05), decrease the damage of E.coli K88; Bacillus coagulans could inhibit the growth of E.coli K88.At the same time, Bacillus coagulans could resist high temperature, acid and bile salt.The results showed that Bacillus coagulans strains had great potential as the application of probiotics strains.The methods could be used as a model of screen probiotics which could inhibit the growth of E.coli K88 in vitro.     

猪呼吸系统疾病综合症(PRDC)(续上期)

近年来PRDC一直困扰着养殖业，所以对PRDC的研究分析始终未停止。其中发现，猪断奶后多系统衰竭综合症是由猪圆环病毒2型(Porcine—circovirus type2，PCV-21感染所致的一种新的病毒性疾病。它是首先由Tischer于1982年在多株PKl5猪肾细胞系的污染物中分离获得的。1991年，在加拿大西部发生该病，并命名为“猪断奶后全身消耗性疾病”。     

中华人民共和国农业部批准4种新兽药

2006年4月4日农业部发布第634号公告，根据《兽药管理条例》和《兽药注册办法》的规定，经审查，批准天津实验动物中心等4家单位申报注册的猪囊尾蚴细胞灭活疫苗（CC-97细胞系）等4种产品为新兽药，核发《新兽药注册证书》，并发布制造及检验试行规程、质量标准、标签和说明书。试行规程和质量标准自发布之日起执行。     

促卵泡素受体表达与调节研究进展

促卵泡素(FSH)的生理作用是通过其受体(FSHR)介导的,作者对FSHR在睾丸和卵巢上的表达和调节以及在细胞系中表达的研究进展进行综述,以加深FSH对动物生殖机能调控的理解,促进FSHR在生殖生物学和生殖生理学上的研究.     

鸡溶菌酶基因3＇端MAR在同源细胞系对基因表达调控的研究

用带有鸡溶菌酶基因增强子（Ｅ）和启动子（Ｐ）的编码细菌氯霉素乙酰基转移酶（ＣＡＴ）的融合基因（ＥＰＣ），在其上游区、下游区或在上游和下游区同时插入鸡溶菌酶基因３＇端核基质附着区（ＭＡＲ）的不同表达载体ＭＥＰＣ、ＥＰＣＭ和ＭＥＰＣＭ，稳定转染鸡ＨＤ１１Ｐｒｏｍａｃｒｏｐｈａｇｅ同源细胞系，筛选不同表达载体稳定整合后的细胞株，检测ＣＡＴ表达水平，确定其表达基因拷贝数，从而分析鸡溶菌酶基因３＇端ＭＡＲ对基因表达的影响。稳定整合表达和瞬时表达实验结果表明，鸡溶菌酶基因３＇端ＭＡＲ在同源细胞系对基因表达没有激活作用，与该基因５＇端ＭＡＲ在同源或异源细胞系中能激活基因表达形成鲜明对照，说明５＇瑞ＭＡＲ和３＇端ＭＡＲ在调节鸡溶菌酶基因表达上存在一种协调关系。     

适应于牛胚肾细胞系增殖的新城疫病毒La Sota株的特性

新城疫病毒（ＮＤＶ）弱毒Ｌａ Ｓｏｔａ株适应于牛胚肾ＢＳ／ＢＥＫ细胞系中增殖，并产生与鸡胚中相似的感染滴度。连续在细胞系中传代后，在ＣＰＥ和蚀斑的大小、形态等生物学特性方面没有变化。相比之下，Ｌａ Ｓｏｔａ株对１日龄鸡脑内致病力指数细胞毒则低于鸡胚毒。但细胞培养适应毒的免疫原性在血清学反应和抵抗强度ＮＤＶ攻击方面并未显示出有何变化。换言之，在细胞系中增殖的Ｌａ Ｓｏｔａ株保持了它的生物学和免疫学特     

水貂阿留申病的诊治

水貂阿留申病是由细小病毒科,细小病毒属的阿留申病毒引起的一种慢性、进行性传染病,蓝色和黄色彩貂发病率最高,标准黑貂和其他深色貂也时有发生.该病的特征为淋巴细胞系统性增生、浆细胞普遍性增生、肾小球肾盂肾炎、持续性病毒血症、动脉炎及肝炎.     

乳腺分泌物中体细胞的研究进展

不同物种的乳腺分泌物中含有的细胞成分被称为体细胞,其中包括淋巴细胞、白细胞、巨噬细胞和上皮细胞。物种、乳腺感染情况、不同生理阶段和饲养管理条件等因素均会影响乳中的体细胞数量和细胞类型。近年来,乳中体细胞得到了人们的关注和深入研究,显示出广阔的应用前景。人们利用从初乳和常乳中得到的乳腺上皮细胞已经成功进行了乳腺细胞的原代培养和建立了乳腺细胞系,为乳生成、被动免疫转移和乳腺癌的研究提供了良好平台。体细胞中提取的RNA代表了乳腺组织的基因表达,因此为研究乳腺组织的基因表达提供了方便、良好的来源。