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应用Crispr/Cas9基因编辑技术敲除MDCK细胞中的Annexin A2基因,并验证其是否为ε毒素在MDCK细胞表面的受体。根据Crispr/Cas9靶点设计原则设计靶点,构建PALentiCRISPR v2重组质粒。借助Crispr/Cas9技术,将构建好的质粒转染至MDCK细胞中,用嘌呤霉素筛选敲除Annexin A2蛋白的MDCK细胞株,并通过测序和Western blot验证敲除效果。通过细胞毒性试验验证MDCK细胞膜表面的Annexin A2蛋白是否为ε毒素的受体蛋白。测序结果和Western blot结果表明,通过Crispr/Cas9技术成功敲除了MDCK细胞的Annexin A2基因,但细胞毒性试验结果表明,敲除Annexin A2基因并不能减弱ε毒素对MDCK细胞的毒性。结果表明,Annexin A2蛋白不是ε毒素在MDCK细胞表面的受体,研究结果为今后MDCK细胞其他蛋白的敲除提供了试验方法,构建的Annexin A2基因敲除的MDCK细胞也为Annexin A2蛋白引起的其他疾病的研究奠定了基础。 相似文献
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红提葡萄产量高,品质上乘;穗大、粒大、色艳、含糖量高、硬度大;耐贮,耐运,效益高,深受广大果农和消费者的欢迎。但是红提葡萄存在着抗旱性、抗病性和抗寒性都不强的弱点,直接影响着提质和增效。为促进红提葡萄产业平稳健康和持续发展,笔者经过多年实践和摸索,总结出了解决该问题的技术措施。 相似文献
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猪饲料中高铜、高锌的危害 总被引:4,自引:0,他引:4
随着世界经济的多元化与全球化发展,给我国农牧业带来了巨大冲击,特别是我国加入WTO后,农畜产品屡次由于质量、卫生问题而遭受到出口贸易的种种阻塞;同时,随着人们对自身健康意识的加强及对生活质量要求的提高,食品安全与环境保护已成为全社会关注焦点之一。因此畜产品药物残留及其所带 相似文献
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苹果圆斑根腐病是一种毁园性病害,近年来在陕西省礼泉县苹果园发生较重。经县、镇(乡)园艺部门和农技站等单位联合作战,目前已取得了明显防效。现将该病的发生情况和我们总结出的综合防治方法简介如下,仅供果农朋友参考。一、发病症状发病初期,树上表现有两种类型:一种是青枯型。整个树冠或数个大枝的叶片,由叶片边缘向内很快失 相似文献
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0.3%苦·小檗碱·黄酮水剂防治番茄病毒病田间药效试验 总被引:1,自引:1,他引:0
以番茄为试材,以20%盐酸吗啉胍铜可湿性粉剂250倍液和0.26%苦参碱水剂500倍液为对照,研究了100、200、300倍液不同浓度0.3%苦.小檗碱.黄酮水剂对番茄病毒病的防治效果。结果表明:0.3%苦.小檗碱.黄酮水剂300倍液、200倍液、100倍液防治番茄病毒病时,防效分别为66.26%、75.50%、79.97%;对照组药剂20%盐酸吗啉胍铜可湿性粉剂250倍液和0.26%苦参碱水剂500倍液防效分别为67.03%和65.79%;供试药剂防效明显高于对照药剂。 相似文献