病毒遗传学分析及在疾病防制上的应用

在人与动物发展的历史上，有很多种疾病至尽无法消灭，如肝炎、病毒性腹泻、流感、爱滋病等，其原因不是没有什么好的药物或疫苗，而是因为这些病毒变化的很快。由于遗传的选择性结果，病毒在不断的变化。病毒的遗传变化主要通过两个基本机制：突变和重组。突变产生在病毒基因组发生错误的时候，可使病毒产生微小的变化；而基因重组则是由于共感染使得病毒交换遗传信息的结果，从而创造了一个新病毒，使病毒产生很大的改变。１病毒的突变 病毒遣传物质的改变导致病毒蛋白功能的变化，从而产生新的病毒血清型或改变毒力的病毒。１．１突变的…     

猪繁殖与呼吸综合征病毒的分子生物学

猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的猪的一种传染病,目前在世界各地均有发生和流行,是危害养猪业最为严重的疾病之一。PRRSV也是造成2006年以来我国猪高热病的主要病原。本文对猪繁殖与呼吸综合征病毒的病毒形态和理化特性、基因组结构、病毒蛋白及功能,基因组的变异,分子生物学诊断等五个方面的研究进展作了综述。     

猪圆环病毒多重PCR诊断方法的建立

猪圆环病毒(PCV)是迄今发现的最小的动物病毒。主要引发猪断乳后多系统衰竭综合征(PMWS),该病主要特征是猪进行性消瘦、多系统病理损伤,严重影响断乳猪生长发育。对PCV和PMWS的一系列研究表明,PCV在猪体内长期演变过程中,产生了有致病性的变异株,称为PCV2;相应地将没有致病性的持续污染PK15细胞的毒株称为PCV1。PCV1是无致病性的,广泛存在于猪群中,而PCV2是致病性的,     

猪脑心肌炎病毒非结构蛋白3C的原核表达及生物信息学分析

为获得猪脑心肌炎病毒（EMCV）3C蛋白并进一步了解其结构,本研究以EMCV HB10株的RNA为模板,通过RT-PCR扩增3C基因,将其克隆至pMD18-T载体,经PCR、双酶切和测序鉴定,挑选测序正确的质粒经双酶切获得目的片段并将其克隆至pET32a载体以构建重组原核表达质粒。将重组质粒转化至大肠杆菌TranSetta（DE3）感受态细胞,经IPTG诱导后,SDS-PAGE检测目的蛋白表达情况,Western blotting检测纯化后3C蛋白及其对EMCV的反应原性。结果显示,成功克隆3C基因,长度为615 bp,编码205个氨基酸。SDS-PAGE结果显示,3C蛋白主要以包涵体形式表达,His-3C蛋白大小约为40 ku。Western blotting分析可知,纯化后His-3C蛋白条带单一,同时3C蛋白与EMCV细胞毒有良好的反应原性。经生物分析软件预测可知,EMCV 3C蛋白为非分泌蛋白,无跨膜区,有多个磷酸化位点,参与蛋白的水解过程。3C蛋白酶作为EMCV基因组编码蛋白中唯一的蛋白酶,在病毒复制的过程中具有不可或缺的作用。本研究成功构建了EMCV 3C蛋白原核表达载体并对其结构进行了预测,为进一步研究3C蛋白的作用及催化机理奠定基础。     

猪流行性腹泻病毒环介导等温扩增检测方法的建立及应用

试验旨在建立一种快速检测猪流行性腹泻病毒（PEDV）的环介导等温扩增方法（LAMP）,为诊断PEDV提供简便、敏感、准确可靠的工具。参考GenBank中PEDV基因序列（登录号：KT799997）,针对PEDVN基因设计了6条引物,对所建立的LAMP反应体系、反应温度进行优化,建立可特异性扩增PEDV的LAMP方法。结果显示,本试验成功建立了PEDV LAMP检测方法,在60℃恒温下反应60 min,能特异性地检测PEDV,检测限量为91拷贝/μL,比常规PCR方法的敏感性高100倍。对比75份临床样本的LAMP和常规RT-PCR法检测结果,显示两种方法符合率为97.3%。综上所述,本试验建立的LAMP方法具有特异性强、敏感性高,操作简单,设备要求低的特点,适用于PEDV临床样本的快速检测。     

畜禽免疫的研究进展及其疫苗发展策略

疫苗免疫接种是控制畜禽传染病的重要手段之一,通过使用疫苗产生的保护性免疫应答可以使被免疫动物免受病原体的攻击.但一些畜禽主要病原体,如猪瘟病毒、新城疫病毒的疫苗免疫常常失败.有些疫苗能够提供短期保护,却不能使机体产生免疫记忆;有些疫苗能够使机体产生免疫记忆,却不能使机体产生针对抗原的有效免疫保护;强烈的免疫反应并不一定确保能够形成有效的保护性免疫,如呼吸道感染常导致保护性免疫失效;许多疾病以综合征的形式危害动物,如猪呼吸与繁殖综合征等.     

猪细小病毒BQ株灭活疫苗免疫剂量及免疫持续期的初步研究

为确定猪细小病毒(PPV)BQ株灭活疫苗(PPV-BQ)的免疫剂量及免疫持续期,本研究与市场上销售的2种PPV灭活疫苗A和B进行了比较。试验分6组,每组免疫3头PPV抗体阴性猪,1组～3组分别免疫BQ株灭活疫苗1mL、2mL、4mL,4组～5组按照说明书免疫A、B两种PPV灭活疫苗,6组为阴性对照组(免疫油佐剂)。两周后进行二免,定期检测血清抗体水平。结果表明,注射疫苗组均产生了PPV抗体,都能持续到免疫后24周。免疫不同剂量PPV-BQ各组间抗体水平差异不显著(p0.05),PPV-BQ与PPV-A抗体水平差异不显著(p0.05),与PPV-B抗体水平差异极显著(p0.01),显著优于PPV-B。PPV-BQ1mL免疫剂量即可达到或超过同类产品的免疫效果,是较为理想的PPV灭活疫苗。     

中国禽流感病毒毒株信息管理系统设计及实现

为满足国家禽流感参考实验室对中国禽流感毒株信息计算机化管理的需要，通过系统的需求分析，建立了毒株信息数据标准和数据结构模型，在此基础上设计出系统结构，开发出中国禽流感病毒毒株信息管理系统。系统的主要功能包括：信息录入、信息维护、信息查询及统计分析、报表系统以及系统安全等。该系统的开发和应用，实现了参考实验对信息计算机化管理的要求，为中国禽流感毒株信息的管理和利用提供了有效工具。     

鹅源H5N1亚型禽流感病毒新疆分离株A/Goose/XJYL/10/2003HA基因的克隆和序列测定与分析

根据已发表的H5N1亚型禽流感病毒的HA基因全序列,设计了1对引物,对禽流感病毒新疆株A/Goose/XJYL/10/2003(H5N1)提取RNA,经RT-PCR扩增后将其克隆到pMD18-T载体上,获得长为1758bp的HA全基因序列。序列测定后,分析结果表明,本试验株与广东、香港和东南亚等不同地区的H5N1禽流感病毒HA的核甘酸序列的同源率很高,其氨基酸切割位点附近具有高致病性禽流感病毒的特征。系统进化树分析表明,新疆株为独立分支,属于欧亚种系。