不同序列的CpG-ODN对猪体外免疫细胞免疫刺激作用的研究

为了筛选出对猪体有免疫刺激活性的CpG寡聚脱氧核苷酸（CpG-ODN），人工设计合成了9种未甲基化CpCr-ODN不同序列，分别作用于健康猪外周血淋巴细胞和脾脏免疫细胞，进行体外转化试验。用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测外周血淋巴细胞转化效果和脾细胞的增殖能力和代谢能力，通过测得的OD490值，计算出淋巴细胞增殖指数（SI），筛选CpG-ODN的免疫刺激作用。结果显示：9种不同序列的CpG-ODN对猪外周血淋巴细胞和脾脏免疫细胞均具有不同程度的刺激作用，其中CpG-ODN7对淋巴细胞增殖能力的增强效果最为明显（sI=3．5），CpG-ODN6对猪脾脏免疫细胞的刺激指数最大（SI=2．7）。为研制猪DNA疫苗有效的CpG-ODN免疫佐剂奠定了基础。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌微量凝集试验方法的建立及初步应用

为建立一种快速检测动物源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的方法,本研究以MRSA耐药性决定蛋白PBP2a的抗血清为检测抗体,通过对抗原浓度及反应温度等进行优化,确定最佳的反应条件后,建立了快速检测MRSA的微量凝集试验方法,并进行了敏感性、特异性、重复性试验以及药敏纸片法比较试验。其中,微量凝集试验最低检出MRSA的浓度为40亿/mL,该方法对MRSA的凝集反应具有良好的特异性,试验结果具有较好的重复性。采用该检测方法对分离自鸡、猪、家兔及小鼠的75株金黄色葡萄球菌进行检测,检出MRSA株占57.3%,经过与药敏纸片法检测进行比较,符合率为92%。该方法快速、准确、简单易行,适于临床或基层应用。     

山东省PRRS血清学调查及PRRSV分离株ORF3-7基因的克隆及序列分析

摘要：应用荧光抗体技术对山东省猪场PRRS的流行情况进行了血清学调查并分离到一株PRRSV。用5对引物分别扩增了PRRSV山东分离株ORF3-ORF7，将其克隆入PMD18-TVector并进行了序列测定。结果表明，山东分离株与美洲疫苗株ATCCVR-23320RF3-ORF7各读码框核苷酸同源性分别为98％、99％、99％、100％，氨基酸同源性分别为97％、98％、98％、98％、100％。     

猪繁殖与呼吸综合征病理组织学观察

采集患有猪繁殖与呼吸综合征的病死猪肺脏、肝脏、脾脏和淋巴结,经固定、脱水、透明、浸蜡、切片、HE染色,在光学显微镜下观察以上各脏器的病理变化。结果表明,各脏器主要病理变化是出血和淤血;肺脏的细支气管萎缩,肺泡壁上皮巨噬细胞增生;肝脏有颗粒变性,脾脏白髓周围有"红晕";淋巴结淋巴中心细胞坏死。     

不同CpG-DNA序列对鸡ND HI影响的研究

将16种人工合成的CpG-DNA与新城疫Ⅳ弱毒苗(La Sota株)合用,免疫14日龄雏鸡,于免疫前及免疫后7、14、21天测鸡HI抗体效价,筛选出4种CpG-DNA短序并进行SPF鸡重复试验,结果表明:筛选的4种CpG短序(1.AACGTr AACGTr;2.AACGTC AACGTC;3.AGCGTC AGCGTC;4.AGCGCT AGCGCT)可显著提高鸡体的体液免疫水平.     

国产重组猪生长激素对猪增重和胴体品质的影响

选择日龄、体重相近,体重60 kg 的北京黑猪纯系36头,分为3组,每组12头(公母各半),每天分别注射国产重组猪生长激素(rpST)0 mg/头(对照组)、2 mg/头和3 mg/头。共注射28 d.实验猪饲喂含粗蛋白16%的全价配合饲料.测定表明:每日注射3 mg 组比对照组增重速度提高24.46%(增长4.72kg)(P<0.05),饲料增重比由3.92降至3.03(P<0.05)使饲料转化率提高22.70%;注射2 mg 组比对照组增重速度提高21.42%(增长4.15kg)(P<0.05),饲料增重比由3.92降至3.13(P<0.05)使饲料转化率提高20.15%。屠宰分析表明:注射3 mg 组和2 mg 组分别比对照组多产瘦肉3.76 kg和3.06 kg,分别提高11.96%和9.73%;脂肪率分别下降12.42%和3.45%.结果证明,国产重组猪生长激素对提高猪增重和胴体品质有明显效果.     

猪圆环病毒2型特异性荧光定量PCR检测方法的建立与应用

研究旨在建立基于SYBR Green I荧光定量PCR检测PCV 2的技术方法.根据GenBank中的猪圆环病毒2型(PCV 2)的基因序列(HQ148879),设计一对特异性引物,利用普通PCR技术扩增出PCV 2的ORF2基因702bp片段,并克隆到pVAX1载体,以纯化的质粒作为PCR检测的标准模板,以10倍梯度...     

CpG-ODN对猪外周血淋巴细胞和脾脏免疫细胞免疫刺激作用的初步研究

为了筛选出对猪体有免疫刺激活性的CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN),设计了9种未甲基化CpG-ODN不同序列,通过人工合成,分别作用于猪外周血淋巴细胞和脾细胞,进行健康猪外周血淋巴细胞和脾脏免疫细胞体外转化试验。用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测外周血淋巴细胞转化效果和脾细胞的增殖能力和代谢能力,通过测得的OD490值,计算出淋巴细胞增殖指数(SI),筛选CpG-ODN的免疫刺激作用。结果显示:9种不同序列的CpG-ODN对猪外周血淋巴细胞和脾脏免疫细胞均具有不同程度的刺激效果,其中CpG-ODN6、CpG-ODN7刺激强度极显著。为研制DNA疫苗有效的CpG-ODN免疫佐剂奠定基础。     

黄河流域麦茬番茄间作玉米栽培技术

麦茬番茄间作玉米栽培是麦收前套种玉米、麦收后定植番茄，利用玉米为番茄遮荫降温，使番茄安全越夏，同时番茄又能改善玉米的通风条件，具有良好的生态效应。１９９９～２０００年在济源市承留镇栽培示范，６６７ｍ２番茄产量４２１５ｋｇ，番茄８月初～１０月上旬上市供应，正是缺菜季节，每ｋｇ平均价格０．６元，可收２４００元，玉米产量１００～１５０ｋｇ，收入１５０元，产值可达２５５０元，除去投资５００元，６６７ｍ２效益可达２０００元以上。被农民认为是一条投资少、见效快的致富途径。１栽培模式１０月中旬前后播种小麦，按…