蓝莓皮渣花色苷提取及抗氧化活性的研究

【目的】探讨蓝莓皮渣综合利用的基础因子。【方法】以花色苷含量为试验指标,考察了乙醇体积分数、料液比、p H值、提取温度及提取时间等因素对提取效果的影响。在单因素试验的基础上,利用响应面分析法优化提取工艺条件,得到适宜的工艺条件。通过测定蓝莓皮渣花色苷的总抗氧化能力、清除DPPH·和OH·能力,评价其抗氧化活性。【结果】研究结果表明,提取时液料比、提取时间、提取温度、p H、乙醇体积分数对提取量影响较大,通过响应面分析法优化了提取工艺,其适宜的提取工艺条件为:乙醇体积分数60%、V(液,m L)、m(料,g)比20∶1、提取时间1.5 h、p H 2.0、提取温度35℃,在该工艺条件下,蓝莓渣花色苷的提取量为16.197 mg·g-1;蓝莓皮渣花色苷具有一定抗氧化能力,在实验范围内,DPPH·和OH·的抑制率均随质量浓度的升高而增加,清除DPPH·和OH·的IC50分别为241.88和1 238.15μg·m L-1。【结论】优化了蓝莓皮渣花色苷提取的工艺条件,且蓝莓皮渣花色苷具有一定的抗氧化活性。蓝莓皮渣花色苷的提取及抗氧化活性分析为其综合利用奠定了基础。     

中国药用植物仙茅开发利用综述

对仙茅的药理作用、临床应用、仙茅中酚苷类成分鉴定、栽培,仙茅的种质资源及分类研究进展进行综述,旨在为仙茅的合理开发利用及后续研究提供参考。     

甜味剂莱鲍迪苷A的致突变作用试验

为了评价甜菊糖苷中的主要成分之一莱鲍迪苷A的致突变作用,在2 500~4μg/皿范围内,对莱鲍迪苷A(含量≥97%)进行了Ames试验,灭菌水作为阴性对照;以5.0 g/kg体重、2.5 g/kg体重和1.25 g/kg体重剂量进行了小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠精子畸形试验,以40 mg/kg环磷酰胺为阳性对照,生理盐水为阴性对照。结果 Ames试验中,莱鲍迪苷A对TA97、TA98、TA100和TA102菌株的回变菌落数均小于阴性对照组的两倍,且未见剂量-反应关系,Ames试验阴性;小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠精子畸形试验均为阴性。表明莱鲍迪苷A在试验剂量下无致突变作用。     

茎瘤芥营养生长后期瘤茎鲜重和总芥子油苷变化规律研究

以茎瘤芥主栽品种"涪杂2号"和"永安小叶"为试材,分析了茎瘤芥营养生长后期瘤茎鲜重和总芥子油苷含量变化。结果表明:瘤茎鲜重与总芥子油苷含量变化与气温有关,茎瘤芥品种间的总芥子油苷含量受采收日期影响显著,各器官间也存在显著差异。试验表明,在重庆沿江茎瘤芥产区,以2月中旬气温回升时采收最为适宜,瘤茎能够达到较高的总芥子油苷含量并实现丰产。     

大豆苷和染料木苷对山羊乳腺上皮细胞增殖的影响

The experiment was aimed to study the effects of different concentrations of daidzin and genistin on proliferation of goat mammary gland epithelial cells, the test was adopted the method of MTT. The results revealed that the ng level of concentration had more effects on cells than the μg level of concentration. And when cells were treated with the two materials for 48 h, the effects were greater than for 24 and 72 h. The highest poteney was detected in daidzin (10 ng/mL) and genistin (10 and 100 ng/mL) compared with the control group.     

葡萄酒中白藜芦醇含量的测定研究

采用高效液相色谱法分别测定了毛葡萄-1、毛葡萄-2、北国蓝、北国红、法国蓝5个葡萄品种(系)酿制酒中的白藜芦醇及其醇苷的含量。结果表明,葡萄酒中白藜芦醇主要以醇苷的形式存在。可能因气候原因,2017年的葡萄酒白藜芦醇总含量均高于2018年;适时晚采的酒样白藜芦醇总含量高,北国蓝葡萄酒的白藜芦醇总含量达到10.92mg/L。     

红叶山茶(Camellia japonica)叶片色素含量与叶色参数的相关性分析

以3个红叶山茶品种‘红叶黑魔法’、‘黑魔法’和‘黑蛋石’为试验材料,分别测定叶片不同发育阶段叶绿素、类胡萝卜素、总花青苷含量及叶色参数L~*、a~*、b~*值,并通过相关性分析探讨叶色参数与叶片色素含量变化之间的关系。结果表明,首先,3个不同发育阶段叶片中叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素含量呈上升趋势,不同品种同一发育阶段的色素含量相近。‘红叶黑魔法’和‘黑蛋石’叶片总花青苷含量在新叶展开10 d左右达到最大值,此后极显著下降,而‘黑魔法’叶片的花青苷含量则变化不大。其次,从色素比值来看,在新叶展开10 d时,花青苷的所占比值最大,‘红叶黑魔法’和‘黑蛋石’的花青苷比值分别达到87.88%和79.08%,极显著地高于叶绿素所占比值。到50 d时,花青苷比值下降至31.74%和23.68%,且3个品种花青苷含量相近,而叶绿素和类胡萝卜素比例则显著增加,这一结果较好地解释了这3个品种叶片的呈色变化,说明花青苷含量及其各种色素含量的比例变化是导致红叶山茶叶色变化的主要原因。最后,3个品种的a*值均与花青苷含量呈显著正相关,而与叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素呈负相关,a~*值可作为描述红叶山茶品种叶色变化的代表性参数。     

一个潜在催化莱鲍迪D苷合成的新型糖基转移酶

尿苷二磷酸糖基转移酶(uridine diphosphate glycosyltransferases,UGTs)催化糖基转移反应,与植物次生代谢密切相关。本研究根据甜叶菊(Stevia rebaudiana)转录组数据库,克隆到一个催化莱鲍迪D苷(rebaudioside D,RD)合成的新型糖基转移酶候选基因,对其开展生物信息学分析。结果表明,该基因开放阅读框长1380 bp,编码459个氨基酸,等电点(pI)预测为5.54,理论分子量约49.66 kD,系统发育分析表明该基因与向日葵中的UGT89A2同源,故将其命名为SrUGT89A2。构建pET28a-SrUGT89A2原核表达载体,并在大肠杆菌(BL21(DE3))中诱导表达得到重组蛋白,HPLC检测表明粗酶液能催化甜叶菊提取液形成一个新的色谱峰,该峰保留时间与莱鲍迪D苷一致。经进一步纯化UGT89A2蛋白,添加不同甜菊糖苷标准品为催化底物,但未鉴定出该蛋白催化的具体糖苷。该潜在催化甜菊糖RD苷合成的新型糖基转移酶基因SrUGT89A2的发现,为RD苷的生物合成和甜菊糖苷的生物途径研究提供新的理论依据。     

全细胞催化剂pelB⁃Xln⁃DT构建及其在水解三七皂苷R1中的应用

设计带有EcoRV和XhoI酶切位点的上下游引物PCR扩增嗜热菌Dictyoglomus thermophilum DSM 3960的GH39家族的β-木糖苷酶Xln-DT编码基因,利用基因拼接技术将其重组至p ET-20b质粒中pelB信号肽基因的下游,重组质粒转化大肠杆菌表达宿主Escherichia coli BL21,构建分泌融合表达型基因工程菌pelB-Xln-DT。经异苯基-β-D-硫代半乳糖苷诱导,pelB-Xln-DT酶活为2.1 U/m L。粗酶液pelB-Xln-DT的最适温度为85℃,较原酶提高了10℃,最适p H为5.5,比原酶降低了0.5; pelB-Xln-DT在85℃下的热稳定性比原酶有了一定提高,保温1 h后酶活基本不变,保温2 h其剩余酶活为82.0%,而Xln-DT在85℃下保温1 h后其剩余酶活为70.4%;在p H 4.0～7.0的范围内,pelB-Xln-DT具有良好的p H稳定性。引入pelB信号肽后不但能够提高蛋白的可溶性表达,还能提高酶蛋白的热稳定性。以pelB-Xln-DT作为全细胞催化剂转化三七皂苷R1生成人参皂苷Rg1,研究了转化温度、转化时间、三七皂苷R1添加量、重复次数等因素对转化效率的影响。结果表明,全细胞催化剂用量1.0 U/m L,在温度37℃下,3 g/L的三七皂苷R1反应3 h后的摩尔转化率达到91.6%,重复利用10次后,转化率仍能达到46.7%,显示出pelB-Xln-DT良好的重复催化性能。