猪导入人类促衰变因子(hDAF)的整合与表达

将人类促衰变因子 ( human decay accelerating factor,h DAF)基因显微注入 51 7枚猪的受精卵 ,移植到2 6头受体母猪的输卵管内。 2 1头怀孕 ,产仔 93头。产仔后 ,取仔猪的耳或尾组织 ,提取总 DNA。以 5′-TGGCGAGAAGGACTCAGTGATCT-3′和 5′-TGAACTGTTGGTGGGACCTTGGA-3′为引物 ,进行 PCR扩增 ,有 1 8头显示阳性。转基因效率为 3 .5%( 1 8/ 51 7)。对存活的 1 4头转基因猪用免疫荧光法进行检测 ,并采用 MPIAS-50 0多媒体彩色病理图文分析系统进行图像分析 ,其中有 7头的动脉肌肉层中显现有荧光 ,其平均灰度在 1 2 7.3～ 1 70 .6之间     

显微注射转基因用猪胚胎获得研究

本文从猪胚胎的体外成熟和体内成熟两方面对显微注射用猪胚胎的获取进行了初步研究。实验结果表明 ;超数排卵母猪的手术冲胚是获取显微注射用猪胚胎的最佳方法 ,该方法获得的胚胎数量多 ,质量好 ,转基因效率高。体外成熟法获得可供显微注射用猪胚胎的效率低 ,基因转移的总效率也很低。     

猪胚胎移植技术研究进展及其在生产中的应用

综述了猪胚胎移植技术在国内外的研究进展及应用情况，提出了目前的技术水平在良种猪的快速扩繁和引进种猪方面应用的可行性及具体操作方案，供种猪的生产经营者和育种工作者参考。     

猪乙脑病毒WHe株的PrM—E、NSl、E—NS2A基因的克隆及序列测定

本文通过RT—PCR扩增了猪乙型脑炎病毒wHe株主要抗原基因NS1(约1．14kb)、prM-E(约2．1kb)、E-NS1-NS2A(约3．0kb)，并将NS1、E-NS1-NS2A、PrM-E基因克隆、测序。与Cenbank发表的JEV基因序列进行序列分析，发现WHe株与其他12种典型的JEV强毒株的同源性在88．3％～99.4％之间。wHe株与K94P05株的同源性最低(88．3％)，与P3株的同源性最高(99．4％)，可认为wHe株是由P3株衍生而来的。在JEV基因组5’端389-3910的长3522nt的决定JEV抗原性的C-prM-E-NS1-NS2A区中，wHe株与P3株仅有21个碱基不同，其中的14个单碱基突变为同义突变，另外7个为错义突变，导致相应的氨基酸序列(1173个)中的6个氨基酸发生了变异，其中的5个氨基政变异出现在含有各关键的抗体中和决定簇的E蛋白内，另一个位于NS1蛋白内。     

哺乳动物基因工程的胚胎干细胞途径

从1982年Palmiter等人获得转大鼠生长激素基因的小鼠以来,哺乳动物基因工程的研究已有十几年的历史。数十种不同的外源目的基因转移到小鼠、兔、猪、牛和羊等动物的基因组。已有的研究结果表明,基因工程不仅可以大幅度提高家畜的生产性能,例如生长速度、饲料转化率、瘦肉率、产奶量、产毛量、抗病性等,而且还可以利用转基因动物作为生物反应器,大量生产对人类有特殊用途的蛋白质,例如胰岛素、凝血因子、血红蛋白等等。然而现有的转基因技术存在许多待解的难题。目前人们所能得     

关于用注入细胞的方法获得嵌合体鸡的可能性

关于用注入细胞的方法获得嵌合体鸡的可能性Ａ．Ｂ．等著魏庆信译原载《ＣＥ》１９９３．Ｎｏ．２（译者单位：湖北省农科院畜牧兽医研究所）为了获得转基因禽，除了显微注射外源遗传物质到受精卵的基本方法之外，正在试验不直接转基因的方法，这种方法是利用转移供体细胞...     

抗猪瘟核酶基因导入湖北白猪实验初报

猪瘟是由病毒引发的分布最广、发病最多、死亡率最高、对养猪业危害最大的烈性传染病。目前世界各国对该病的预防,主要采用免化弱毒疫苗免疫注射的方法,在一定程度和范围内控制了疫情。但是,用于生产疫苗和预防注射所耗费的人力、物力和财力是十分巨大的。我国数十万兽医防疫人员,每年要进     

猪分级卵母细胞体外成熟时间规律的研究

试验根据猪卵丘－卵母细胞复合体（COCs）的颗粒细胞层数,把COCs分成A、B、C和D级,A、B级用于体外分别培养24、32、38、44、48和54 h,C级用于体外分别培养24、32、38、44、48、54和60 h,观察它们不同时间排出极体数,然后将排出极体的卵母细胞孤雌激活。结果发现,A和B级COCs培养48 h时成熟率最高（83.2%和78.0%）,明显高于同级水平培养24、32和38 h的成熟率;不同级别COCs体外培养相同时间,A与B级成熟率差异不显著（P＞0.05）,但二者与C级的成熟率差异显著（P＜0.05）;体外培养48 h COCs卵裂率最高（81.7%）,与培养38 h前的卵裂率差异显著（P＜0.05）。结果表明,A、B级卵母细胞更适于体外培养,能获得高的成熟率和卵裂率,COCs周围颗粒细胞对卵母细胞的成熟有显著影响;COCs培养38 h之前,部分虽能看到极体,但激活后卵裂率极低,说明卵母细胞并未真正成熟,通常通过排出极体判断卵母细胞成熟是不够准确的,COCs体外培养44～48 h是成熟的最佳时期,能为体细胞核移植提供大量优质的MⅡ期卵母细胞。