MTT法测定8种中草药体外抗肝癌细胞SMMC-7721活性

[目的]建立一套适合于实验室的高效、快速的体外抗肝癌活性物质筛选模型.[方法]首先,选用乙醇为溶剂对芸香草、半边莲、蜜蒙花、甘草、地榆、柴胡、旱芹和莪术8种中草药植物材料进行浸提.然后通过MTT法对8种中草药体外抗肝癌细胞SMMC-7721的活性进行仞测.试验采用二甲基亚砜(DMSO)与甘氨酸-NaOH缓冲液作为溶剂,消除剩余培养基对吸光值的影响.为确保细胞株最大吸收峰位置不变,酶标仪采用570 nm波长测定OD值.为验证筛选出的3种物质对癌细胞的抑制作用,以活性物质浓度为横坐标,细胞生长抑制率为纵坐标,描绘肿瘤细胞生长曲线,倒置显微镜观察细胞不同阶段的生长状况.[结果]倒置显微镜下观察3种细胞阶段的形态:正常状态下,细胞的透明度大、折光性强、轮廓不清;当细胞受污染时,折光性变弱,胞质中常出现空泡、脂滴、颗粒样物质,细胞之间空隙加大,细胞变得不规则,失去原有特点;而受活性物质作用细胞尽管仍然贴壁,但其萎缩,边缘清晰化;三者之间存在一定区别.MTT法培养板定性检测显示,柴胡、莪术、甘草细胞培养孔内的液体颜色都较浅且比较均匀,可见,它们对细胞生长具有明显的抑制作用.而半边莲培养孔内液体颜色深浅不一.还有一些培养孔内液体颜色较深,如卤地菌、蜜蒙花、地榆和旱芹,表明它们对细胞生长没有明显的抑制作用.进一步定量计算表明,浓度为1.0～1.5 mg/ml的甘草乙醇浸提液(ESCG)、莪术乙醇浸提液(ESCC)和柴胡乙醇浸提液(ESCB)对体外培养的肝癌细胞SMMC-7721有较强的抑制增殖作用,抑制率分别为51.6%、48.5%和52.9%.甘草、柴胡和莪术3种物质的抑制作用曲线结果也验证了它们对细胞生长有明显的抑制作用,并且抑制程度与浓度呈正相关.[结论]MTT法筛选可作为重要抗肿瘤的1个基本筛选模型.     

MTT法测定8种中草药体外抗肝癌细胞SMMC-7721活性（摘要）

[目的]建立一套适合于实验室的高效、快速的体外抗肝癌活性物质筛选模型。[方法]首先,选用乙醇为溶剂对芸香草、半边莲、蜜蒙花、甘草、地榆、柴胡、旱芹和莪术8种中草药植物材料进行浸提。然后通过MTT法对8种中草药体外抗肝癌细胞SMMC-7721的活性进行初测。试验采用二甲基亚砜（DMSO）与甘氨酸-NaOH缓冲液作为溶剂,消除剩余培养基对吸光值的影响。为确保细胞株最大吸收峰位置不变,酶标仪采用570 nm波长测定OD值。为验证筛选出的3种物质对癌细胞的抑制作用,以活性物质浓度为横坐标,细胞生长抑制率为纵坐标,描绘肿瘤细胞生长曲线,倒置显微镜观察细胞不同阶段的生长状况。[结果]倒置显微镜下观察3种细胞阶段的形态：正常状态下,细胞的透明度大、折光性强、轮廓不清;当细胞受污染时,折光性变弱,胞质中常出现空泡、脂滴、颗粒样物质,细胞之间空隙加大,细胞变得不规则,失去原有特点;而受活性物质作用细胞尽管仍然贴壁,但其萎缩,边缘清晰化;三者之间存在一定区别。MTT法培养板定性检测显示,柴胡、莪术、甘草细胞培养孔内的液体颜色都较浅且比较均匀,可见,它们对细胞生长具有明显的抑制作用。而半边莲培养孔内液体颜色深浅不一。还有一些培养孔内液体颜色较深,如卤地菌、蜜蒙花、地榆和旱芹,表明它们对细胞生长没有明显的抑制作用。进一步定量计算表明,浓度为1.0～1.5 mg/ml的甘草乙醇浸提液（ESCG）、莪术乙醇浸提液（ESCC）和柴胡乙醇浸提液（ESCB）对体外培养的肝癌细胞SMMC-7721有较强的抑制增殖作用,抑制率分别为51.6%、48.5%和52.9%。甘草、柴胡和莪术3种物质的抑制作用曲线结果也验证了它们对细胞生长有明显的抑制作用,并且抑制程度与浓度呈正相关。[结论]MTT法筛选可作为重要抗肿瘤的1个基本筛选模型。     

富硒麦芽对大鼠肝癌细胞增殖周期及凋亡的影响

以100 mg·L-1二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌16周,同时分别饲喂含硒0.3、1.0、3.0 mg·kg-1富硒麦芽和含硒3.0 mg·kg-1亚硒酸钠饲料,停止诱癌及补硒处理2周后,处死大鼠.利用流式细胞术分析肝细胞增殖周期和细胞凋亡,探讨富硒麦芽对DEN诱发大鼠肝癌细胞周期及细胞凋亡的影响.结果表明: 与模型对照组比较,富硒麦芽组大鼠S期细胞显著减少,细胞增殖指数显著下降,而G0/G1期细胞显著增多,细胞凋亡率显著升高;与亚硒酸钠组比较,相同硒含量富硒麦芽组G0/G1期细胞和细胞凋亡率显著高于亚硒酸钠组,而S和G2/M期细胞显著低于亚硒酸钠组.证明富硒麦芽能干扰大鼠肝癌细胞增殖周期,阻断DNA合成与复制,使癌细胞在G1期堆积,再诱导G1期细胞发生凋亡,提示抑制癌细胞增殖和促进癌细胞凋亡可能是富硒麦芽发挥其抗癌作用的细胞学基础之一.     

川牛膝多糖联合维生素C体外抑制HepG-2肿瘤细胞活性的作用

为了解川牛膝多糖联合维生素C抑制肿瘤细胞活性作用,采用超声波提取法从川牛膝根中提取川牛膝多糖(RCP),经Sevage法除去蛋白,并采用30%双氧水脱色、浓缩、冻干,得到川牛膝粉针剂,通过苯酚硫酸法制作葡萄糖标准曲线,进而测得多糖含量。体外联合维生素C作用于肝癌HepG-2细胞,采用噻唑蓝(MTT)法研究对HepG-2细胞的抑制作用。结果表明,川牛膝多糖与维生素C均可抑制肝癌HepG-2细胞的增殖,当多糖质量浓度为5、50、100、200 mg/mL时,对肝癌HepG-2的抑制率分别为19.7%、62.1%、59.1%、65.1%。当维生素C的浓度为0.1、0.2、0.3、0.4 mmol/L时,对肝癌HepG-2的抑制率为10%、11%、12%、54%。研究结果提示两者对肿瘤的抑制均呈剂量依赖性,当两者联合用药时,两者呈协同增效抗肿瘤作用,随着两者浓度的增加抑制率逐渐增强,对HepG-2细胞的最大抑制率可达84.2%。     

原发性肝癌自发性破裂出血的临床处理

目的探讨原发性肝癌自发性破裂出血的处理方法。方法回顾性分析1996年1月-2014年6月收治的24例肝癌自发性破裂出血患者的临床资料。结果 20例行肝切除术,2例行无水酒精注射治疗,1例行保守治疗,1例行填塞止血、肝动脉结扎术。手术治疗的23例全部止血成功,保守治疗1例止血失败。结论手术是肝癌自发破裂出血的有效治疗手段,应根据患者的具体情况选择不同的手术方式。     

启东与茅山茶区男性肝癌死亡率比较

用人群流行病学资料和血浆硒检测，比较了江苏省句容县茅山茶区与启东县非茶区男性肝癌死亡率与饮绿茶的关系。结果显示，饮茶率、饮茶量均较高的茅山，其男性肝癌死亡率明显低于启东，趋势性Ｘ２检验有极显著（Ｐ＜０．０１）的意义，但需在饮茶量相对较大时（＞３０ｇ／周）才有显著的保护作用，其ＲＲ值为０．１２。分别调整吸烟、饮酒因素的作用后，在茅山产茶区仍可看出常饮绿茶有显著降低肝癌死亡率的作用，趋势性Ｘ２值分别为８．８９（Ｐ＜０．０１）和５．４６（Ｐ＜０．０５），而在非产茶的启东，因饮茶量较少，绿茶的保护作用则不明显。此外，两地人群血浆抗癌成份硒水平的分析结果也表明，饮茶量大小与血浆硒成平行关系，以肝癌低发的句客人群平均血浆硒（１１．１μｇ／ｄ１）明显高于启东（５．７μｇ／ｄ１）。     

原发性肝癌的自杀基因治疗

原发性肝癌是常见的恶性肿瘤之一，传统的治疗方法主要是手术切除，放射治疗和化学药物治疗。这些疗法对早期肝癌可获得较满意的疗效，但对晚期肝癌伴有局部扩散和远处转移者，疗效往往较差。分子生物学的发展使基因治疗成为可能。肝癌基因治疗策略主要包括：①免疫基因治疗，又称细胞因子基因治疗，通过转导细胞因子基因，增强机体抗肿瘤免疫能力；②自杀基因治疗，使肝癌细胞产生对某些药物前体的特异敏感性而被杀灭；③基因置换或补充，置换突变的基因或补充缺失的抑癌基因；④反义核苷酸技术，用于抑制癌基因的表达。其中自杀基因治疗是近年来研究的一个热点，本文对近年来肝癌的自杀基因治疗研究情况作一综述。     

醉鱼草苷Ⅳ对H_(22)肝癌小鼠的抑瘤作用（英文）

[目的]观察醉鱼草苷Ⅳ对H22肝癌小鼠的体内抑瘤作用。[方法]取H22肝癌细胞接种于小鼠右腋皮下,H22肝癌小鼠随机分为5组:模型组、醉鱼草苷Ⅳ高、中、低(1.00、0.50、0.25 mg/kg)3个剂量组和阳性药(CTX,20.0 mg/kg)对照组。每组10只,治疗期间记录各组小鼠的体重变化并观察小鼠生存状态,连续腹腔注射10天后。于第11天观测抑瘤率、脾腺指数、胸腺指数,同时进行血清中SOD、MDA、GGT和AKP含量检测。[结果]与模型组比较,醉鱼草苷Ⅳ高、中剂量组对小鼠H22移植性肝癌均有显著的抑瘤作用(P<0.01),抑瘤率分别为56.96%,50.63%。与模型组相比,醉鱼草苷Ⅳ高剂量组小鼠血清SOD活性增加(P<0.05),醉鱼草苷Ⅳ各剂量组血清MDA、GGT和AKP水平均降低(P<0.01);除SOD活性之外,环磷酰胺组与模型组比较无显著差异。[结论]醉鱼草苷Ⅳ在体内具有抗肝癌作用,其机理可能和机体的抗氧化能力有关系,有待于进一步研究。     

肝癌患者生活质量影响因素多元线性回归分析

目的探讨不同因素对肝癌患者生活质量的影响。方法利用量表和问卷收集肝癌患者生活质量得分及其影响因素,采用差异比较、相关分析、多元线性回归分析,研究不同因素对肝癌患者生活质量的影响。结果肝癌患者的年龄、家庭月收入、婚姻状况、肝炎病程、营养状况与生活质量关系密切(P<0.05),肝癌患者的性别、文化程度、付费方式、居住地对生活质量的影响无统计学意义。结论在肝癌治疗时,应更加关注影响患者生活质量的不同因素,从而有针对性地采取防治措施,保障肝癌患者的生活质量。     

竹节香附素A抗肝癌作用机制的研究进展

竹节香附素A(RDA)是中药两头尖中主要抗肿瘤活性的单体成分,其在抑制肝癌细胞增殖、诱导肝癌细胞凋亡、抑制肝癌细胞血管生成,以及联合化疗的协同增效作用等方面具有显著作用,搜集并分析近年来竹节香附素A抗肝癌作用机制的相关文献,综述竹节香附素A抗肝癌作用机制的研究情况。