仿刺参肠多糖提取物对小鼠实体瘤的抑制作用

采用碱解、酶解和醇沉淀法提取仿刺参Apostichopusjaponicus肠组织中的粗多糖（简称肠多糖）,通过构建小鼠I-122肝癌实体瘤模型,采用腹腔给药途径,研究了不同剂量的肠多糖[200、100、50mg／（kg·d）]对小鼠实体瘤的抑制作用,并测定了小鼠的脾脏指数、胸腺指数以及血清中肿瘤坏死因子（TNF—α）和白细胞介索2（IL-2）的含量。结果表明：肠多糖对患H22肝癌小鼠的实体瘤具有显著的抑制作用,肠多糖高剂量组小鼠的瘤质量与肿瘤对照组差异极显著（P〈0．01）,肠多糖中、低剂量组的瘤质量与肿瘤对照组差异显著（P〈0．05）,肠多糖高、中、低剂量的抑瘤率分别为90．1％、85．2％和71．7％;各肠多糖组小鼠的脾脏指数与肿瘤对照组均无显著差异（P〉0．05）,但随着肠多糖剂量的上升,小鼠的脾脏指数也上升;各肠多糖组小鼠的胸腺指数均高于肿瘤对照组,除肠多糖低剂量组外其余各组均与肿瘤对照组差异显著（P〈0．05）;肠多糖高剂量组小鼠血清中的IL-2含量极显著高于3个对照组（P〈0．01）,而肠多糖中、低剂量组血清中的IL-2含量与肿瘤对照组、给药健康对照组均无显著差异（P〉0．05）;肠多糖高、中、低剂量组小鼠血清中的TNF—α含量与3个对照组均无显著差异（P〉0．05）。     

周小舟教授治疗肝癌经验

周小舟教授认为肝癌的病因是内因正气亏虚和外因外染疫毒相互作用所致,其主要病机是气虚血瘀,针对主要病机设立芪术抗癌方辨证加减治疗,临床疗效显著;周教授通过实验及临床研究亦初步阐明了芪术抗癌方的作用机制,值得临床借鉴。     

miR-144表达质粒的构建及其对肝癌细胞生物学行为的影响

【目的】构建microRNA-144(miR-144)的真核表达质粒,并探讨miR-144对人肝癌细胞株HepG2生物学行为的影响,为肝癌的生物学治疗提供依据。【方法】构建miR-144真核表达质粒并合成miR-144反义寡核苷酸,通过实时定量PCR检测miR-144的表达,采用MTT比色法及流式细胞仪技术,检测抑制与过表达miR-144对肝癌细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。【结果】成功构建了miR-144的真核表达质粒,过表达miR-144能够显著抑制肝癌细胞的增殖(P<0.05),促进细胞凋亡(P<0.05);而抑制miR-144的表达则得到相反的结果;抑制与过表达miR-144对肝癌细胞周期的影响都不大(P>0.05)。【结论】miR-144能影响人肝癌细胞株HepG2的生物学行为,具有抑制肝癌细胞增殖的作用。     

沙棘提取物对癌细胞DNA、蛋白质合成及体内血浆中的cAMP含量的影响

采用同位素示踪技术和蛋白质结合法研究了沙棘汁和沙棘油的抗癌机理,结果显示：沙棘汁对L7712白血病、S110肉瘤、腹水型肝癌等细胞的DNA、蛋白质合成均无抑制作用。沙棘油浓度在0．005mg／L-1．0mg／L时对L7712白血瘸细胞DNA合成有抑制作用,且此时抑制率与浓度呈负相关,沙棘汁ip注射剂量为1／5LD50时,沙棘汁对小鼠血浆cAMP含量略有提高。     

槲寄生碱对人肝癌细胞株SMMC-7721 bcl-2mRNA表达的影响

为研究槲寄生碱对人肝癌细胞株SMMC-7721对bcl-2mRNA表达的影响。采用半定量RT-PCR法测定bcl-2mRNA表达变化。结果表明,RT-PCR检测SMMC-7721细胞中bc1-2、mRNA表达的相对强度,发现bc1-2mRNA的表达强度降低(P0.05)。说明中药槲寄生碱抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖作用与降低bcl-2mRNA表达水平有关。     

超声造影在肝癌射频消融治疗前后的应用价值

目的探讨超声造影技术在肝癌射频消融前后的应用价值。方法 56例肝癌患者接受射频消融治疗,于治疗前后采用超声造影技术对其中65个病灶进行造影超声检查。结果射频消融前,造影增强超声显示65个病灶表现为动脉早期抱球状、弥漫或轻度增强;治疗后病灶超声造影检查结果与MRI增强检查结果一致（Kappa〉0.70,P〈0.05）,明显优于常规彩超结果（Kappa〈0.40,P〉0.05）。结论超声造影可以帮助了解患者肝癌病灶的大小、数目和肿瘤血管等信息,有助于射频消融方案的制定及疗效的评估。     

富硒麦芽对肝癌间质微血管密度及癌细胞增殖的影响

将体重为120～150 g的清洁级SD雄性大鼠145 只随机分为4组:对照组(25只)、肝癌模型组(40只)、亚硒酸钠组(40只)和富硒麦芽组(40只).在对照组和模型组大鼠日粮中添加亚硒酸钠至硒含量达到饲养标准(0.1 mg·kg-1),在亚硒酸钠组和富硒麦芽组日粮中分别添加亚硒酸钠和富硒麦芽使硒含量均达到3.0 mg·kg-1.除对照组外,其余各组连续16周饮用含100 mg·L-1的二乙基亚硝胺(DEN)溶液以诱癌,然后改饮自来水至18周末.每组于4、8、12、16和18周时随机挑取5只大鼠断头处死,肝脏切片经增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组化染色后计数肝癌组织中PCNA阳性细胞并计算PCNA指数(PI);取第18周肝脏上的癌结节经第8因子相关抗原(FⅧ-Rag)抗体免疫组化染色后,计数肝癌组织中的新生微血管数目并计算微血管密度(MVD).结果表明:2个补硒组大鼠MVD值及PCNA阳性细胞数显著低于模型组;与亚硒酸钠组相比较,富硒麦芽组大鼠MVD值及PCNA阳性细胞数显著降低.上述结果提示:富硒麦芽较亚硒酸钠更能有效抑制肿瘤组织新生血管形成,从而更有效抑制肿瘤细胞增殖.     

富硒麦芽对二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌血管生成的影响

试验选择雄性SD大鼠100只,体重100~120 g,随机分成3组。试验Ⅰ组日粮中添加富硒麦芽（SEM）使硒含量达到3.0 mg/kg;试验Ⅱ组为模型组;试验Ⅲ组为阴性对照组,不诱癌不加SEM;试验Ⅱ、Ⅲ日粮中分别添加亚硒酸钠使硒含量达到0.1 mg/kg。试验Ⅰ、Ⅱ组饮水中添加100 mg/L二乙基亚硝胺（diethylnitrosamine,DEN）诱癌,维持DEN摄入量每天约10 mg/kg体重,连续16周,然后改饮普通灭菌水至18周末。试验Ⅲ组始终以普通灭菌水自由饮用。18周末,处死大鼠。利用免疫组织化学法分析大鼠肝肿瘤微血管密度（microvessel density,MVD）和血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果表明,SEM组MVD和VEGF表达较模型组显著降低。因此,表明SEM对肝肿瘤血管生成有抑制作用,下调VEGF表达可能是其抑制肿瘤血管生成的主要机理之一。     

肝癌细胞系中Runx3基因表达及启动子区异常甲基化分析

目的：通过检测6种肝癌细胞中Runx3基因异常甲基化状态及表达情况,探讨药物5-aza-2＇-deoxycytidine（decitabine）激活Runx3基因重新表达的能力及对肝癌细胞生长的影响。方法：采用DNA甲基化特异性PCR（MSP）技术分别对6种肝细胞癌细胞系Runx3基因启动子区域甲基化状态进行检测,同时采用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）检测5种肝癌细胞中Runx3的表达情况及药物5-aza-2＇-deoxycytidine处理其中3种肝癌细胞前后Runx3表达变化。结果：6种肝癌细胞系中,有3种细胞Runx3基因启动子区域存在甲基化异常,药物5-aza-2＇-deoxycytidine处理3种肝癌细胞后,Runx3基因明显表达或表达活性增强。结论：启动子区异常甲基化是导致Runx3基因失活的主要原因之一,与肝细胞癌发生早期密切相关,可作为肝细胞癌早期诊断的分子标记物及分子治疗的靶点。     

MTT法测定8种中草药体外抗肝癌细胞SMMC-7721活性

［目的］建立一套适合于实验室高效、快速的体外抗肝癌活性物质筛选模型。［方法］通过MTT法,对芸香草、半边莲、蜜蒙花、甘草、地榆、柴胡、旱芹和莪术等8种中草药体外抗肝癌细胞SMMC7721的活性进行初测;描绘肿瘤细胞生长曲线,倒置显微镜观察细胞不同阶段的生长状况。［结果］受活性物质作用细胞尽管仍然贴壁,但萎缩,边缘清晰化,与生长状况良好的细胞形态有明显区别;浓度为1.0~1.5mg/ml的甘草乙醇浸提液（ESCG）、莪术乙醇浸提液（ESCC）和柴胡乙醇浸提液（ESCB）对体外培养的肝癌细胞SMMC7721有较强的抑制增殖作用,抑制率分别为51.6%、48.5%和52.9%,且抑制作用随着浓度的增加而加强。［结论］MTT法筛选可作为重要抗肿瘤的1个基本筛选模型。