富硒麦芽对二乙基亚硝胺致肝癌大鼠低血糖症及相关体液调节因子动态变化的影响

雄性SD大鼠193只，体重100～120g，随机分成5组。组Ⅰ～组Ⅲ，日粮中添加富硒麦芽（SEM）至硒含量分别为0．3、1．0、3．0mg／kg；组Ⅳ，模型组；组Ⅴ，阴性对照组，不加SEM也不诱癌，日粮中分别添加亚硒酸钠至硒含量达0．1mg／kg。组Ⅰ～组Ⅳ，饮水中添加100mg／L二乙基亚硝胺（Diethylnitrosamine，DEN）诱癌，维持DEN摄人量每天约10mg／kg体重，连续16周，然后改饮普通灭菌水至18周末。组V始终以普通灭菌水自由饮用。每4周眼眶采血1次，测定血浆葡萄糖及其相关体液调节因子胰岛素、胰高血糖素、胰岛素样生长因子Ⅱ（IGF-Ⅱ）等的含量，统计胰岛素／葡萄糖（IGR1）、胰岛素／胰高血糖素（IGR1）、胰高血糖素／葡萄糖（GGR）值。分析血糖与各相关调节因子间的相关性。结果发现，与同期阴性对照组相比，各诱癌组大鼠血糖和血清胰岛素、胰高血糖素水平及GGR值均显著下降，血清IGF-Ⅱ水平和IGRz值则显著上升，而某些剂量的SEM能有效地抑制血糖、胰高血糖素水平的下降和血清IGF-Ⅱ水平、IGR2值的上升。血糖与上述各调节因子间分别存在显著相关性。结果表明SEM能抑制肝癌大鼠低血糖症的发生，该作用可能是通过对诸多相关调节因子的共同调节而实现的。     

富硒麦芽预防二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌的研究

采用100 mg.L-1二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌16周,同时分别饲喂含0.3、1.0、3.0 mg.kg-1富硒麦芽硒和3.0 mg.kg-1亚硒酸钠(Na2SeO3)硒的饲料,停止诱癌及补硒处理2周后,处死大鼠,测定生化指标等,并用流式细胞术分析肝细胞增殖周期的变化。结果显示,3.0 mg.kg-1富硒麦芽组大鼠的肝/体重比、血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TB IL)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、谷胱甘肽硫转移酶(GST)显著低于模型组,肝癌结节数明显低于0.3、1.0 mg.kg-1富硒麦芽组和3.0 mg.kg-1Na2SeO3组,但ALT和γ-GT高于0.3 mg.kg-1富硒麦芽组;1.0 mg.kg-1和3.0 mg.kg-1的富硒麦芽组S期细胞较模型组明显减少,增殖指数(proliferation in-dex,PI)明显下降,而G0/G1期细胞明显增多。表明富硒麦芽具有减轻肝脏损伤、延缓大鼠肝癌形成的能力。其作用机制之一可能是阻滞G1期细胞向S期的进程,从而抑制DNA合成,阻止肝细胞分裂和恶性增殖。     

肝癌分次放疗间位置变化的研究

目的：应用千伏级锥形束CT （kV级CBCT）图像引导放疗技术评估肝癌患者分次放疗间位置的变化。方法15例肝癌患者,每例患者在放疗前行CBCT扫描,每周1～3次,共获取121幅 CBCT图像。离线下以肝脏、椎体外轮廓分别为参照物完成CBCT图像与计划CT的配准,将配准结果定义为分次放疗间肝脏及椎体位置的变化,将两者配准结果的差值定义为肝脏相对于椎体位置的变化,分别予以评估。结果分次放疗间在三维方向,肝脏位移的绝对值以上下方向最大6.3 mm （0～19.3 mm）、左右方向次之2.3 mm（0～16.0 mm）、前后方向最小1.5 mm （0～7.6 mm）（P＜0.001）;椎体位移的绝对值以上下方向最大6.0 mm （0～18.0 mm）、左右方向次之3.0 mm （0～16.0 mm）、前后方向最小2.0 mm （0～10.0 mm）（P＜0.05）;肝脏相对于椎体位移的绝对值以上下方向最大4.8 mm （0.1～19.3 mm）、左右方向次之2.0 mm （0～8.6 mm）、上下方向最小1.4 mm （0～10.3 mm）（P＜0.001）。若通过配准椎体校正患者位置,放疗时左右、上下、前后方向肝脏位移的绝对值可能增大,可能性分别为39.7％、42.1％、43.0％。结论椎体不适于作为肝癌图像引导放疗的参照物。     

半边旗二萜类成分PAG通过ROS诱导的线粒体凋亡克服肝癌多药耐药

目的 研究半边旗二萜类成分PAG对人肝癌耐药细胞株增殖与凋亡机制.方法HepG2/ADM细胞用不同浓度(0～75μmol/L)PAG处理24、48、72 h,分别用MTT、流式细胞术、Western blot、DCFH-DA法检测细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡、凋亡相关蛋白表达、活性氧自由基(ROS)水平.结果PAG呈剂量依赖性抑制细胞增殖及caspase 3、PARP和Bcl-2表达,增加G2/M期细胞分布、细胞凋亡、细胞内ROS水平及actived-caspase 3、cleaved-PARP和Bax表达,促进线粒体中细胞色素C释放到胞质;l mmol/L乙酰半胱氨酸可阻断PAG对细胞增殖的抑制作用.结论 半边旗二萜类成分PAG可通过ROS诱导的线粒体凋亡克服肝癌多药耐药.     

蒋益兰教授治疗肝癌经验

肝癌病因病机错综复杂,尚未明确。蒋益兰教授认为脾肾亏虚乃肝癌发病之本,痰、郁、毒、痰、瘀乃致病之标。蒋益兰教授临证治疗肝癌中西医学结合,辨病辨证论治;扶正祛邪灵活运用,整体局部全面兼顾;善补气血阴阳,注重护肾保肝;未病先防,既病防变。提出健脾补肾、化瘀解毒、疏肝解郁的肝癌基本治法,临证运用,获得良好疗效。     

抗HepG2核糖体展示抗体库的构建

[目的]构建鼠源抗HepG2核糖体展示抗体库。[方法]以培养的HepG2肝癌细胞4次免疫Balb／c小鼠,取脾脏分离总RNA,逆转录合成第一条链,PCR扩增重链可变区和轻链k,经linkerDNA连接形成VH／k核糖体展示抗体库。将VH／k与pMD18-T载体的连接产物转化E．coliTGI,蓝白斑筛选,挑取白色菌落,提取质粒,PCR鉴定,并测序。[结果]VH和k链得到正确的扩增,长度分别为399和6476p,VH／k连接产物正确,连接产物长度为10936p：[结论]所采用的引物及反应条件能够扩增出目的基因,成功构建了鼠源抗Hepc2核糖体展示抗体库,为进行核糖体展示体外筛选抗HepG2特异性单链抗体奠定基础。     

茜草蒽醌对肝癌SMMC-7721细胞增殖的抑制作用

目的探讨茜草提取物蒽醌单体对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的抑制作用.方法采用MTT法、形态学、集落形成法,检测蒽醌对人肝癌细胞增殖的抑制结果.结果MTT法显示各个浓度的蒽醌对肝癌SMMC-7721细胞的增殖均有抑制作用,呈现出与药物浓度、作用时间的依赖性;生长曲线由＂S＂型逐渐变得低平;倒置显微镜下可见药物组细胞数减少,间隙增大,细胞间出现＂接触性抑制＂;集落形成率降低（P〈0.01）,集落中细胞数减少.结论茜草蒽醌对人肝癌SMMC-7721细胞生长具有抑制作用;蒽醌有可能成为抗肝癌新药,为抗癌新药的开发提供理论与实验依据.     

B超监测下陡脉冲作用兔肝肿瘤的实验研究

目的: 研究B超在陡脉冲治疗兔肝肿瘤中的作用及治疗的有效性. 方法: 建立兔VX2肝脏肿瘤细胞实体瘤模型, 随机分为治疗组及对照组, 分别予以陡脉冲及假性治疗. 治疗过程中用B超定位及实时监测, 治疗后1, 4, 7, 14 d分别B超及镜下观察治疗靶区. 结果: 在陡脉冲治疗过程中, B超能起到很好的引导定位及监测作用; 镜下观察治疗靶区呈广泛性凝固性坏死. 结论: 陡脉冲可致肿瘤细胞发生不可逆性损伤, B超作为一种辅助手段, 能运用于陡脉冲治疗及术后监测中.