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从BL21(DE3)E.coli菌株中以PCR的方法扩增得到了与T7RNA多聚酶(T7RNApolymerase,T7pol)基因大小一致的DNA片断。将PCR产物纯化后直接克隆到pGEM—T载体中,经酶切鉴定和DNA序列分析表明克隆得到了正确的T7pol基因。将T7pol基因亚克隆入pET-28b( )中,构建得到原核表达质粒pET28T7。该质粒的BL21(DE3)pLysS转化菌在IPTG的诱导下可表达约98800的蛋白,这与T7pol的相对分子质量一致。将该质粒转化DH5α、JMl09、HBl01、BL21(DE3)和BL21(DE3)pLysS等5种不同的宿主菌,仅有转化T7pol酶活性受到抑制的宿主菌BL21(DE3)pLysS才能得到转化子,而其余4种T7T7pol酶活性不受抑制的E.coli宿主菌不能得到转化子。pET28T7原核表达质粒这种仅能在T7pol酶活性受到抑制的宿主菌中才能存活的现象说明本试验所克隆的T7pol基因能正确表达出具有RNA转录酶活性的蛋白。 相似文献
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前言 随着生产的发展和粮食市场的开放以及对外贸易的繁荣,粮食流通领域日趋活跃,粮食质量检验工作从粮库、加工厂的实验室走向粮食商品流通的各个领域。粮食质量的检验仪器应当主动适应这一变化,特别是非粮食部门经营粮食的单位,既无检验条件,又无检验设备,若准确地掌握粮食的质量是很困难的。针对这一问题,我们研制了“粮食物理检验组合仪器”。它不仅适用于室内检验,更适用于原粮、成品粮的现场检验。它是适应市场经济的产物,使粮食检验(物理检验)工作更加完善和科学。 相似文献
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尿素的含氮量高达44%~46%,江苏东海县科技示范户赵某,用尿素作为牛的氮素添加剂,有效地解决了蛋白质饲料的不足问题,收到了很好的效果,他养的牛个个膘肥体壮,年均出栏肉牛30头以上,获利6万余元,主要经验是: 相似文献
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