猪PBD1成熟肽基因在干酪乳酸杆菌中的表达及其抑菌活性的检测

为获得一株能够稳定表达猪β防御素-1 (PBD1)成熟肽蛋白的重组干酪乳酸杆菌,本研究将PBD1成熟肽基因克隆至含有短小干酪乳酸杆菌信号肽的pUCK-SP载体中,再将SP-PBD1亚克隆到干酪乳酸杆菌整合性表达质粒pMJ67的Lac启动子下游,获得重组质粒pMJ67-SP-PBD1,电转化入干酪乳酸杆菌,经红霉素抗性筛选和基因组DNA PCR测序鉴定,证实猪PBD1基因整合到了干酪乳酸杆菌中。采用半定量RT-PCR分析显示,经2%乳糖诱导18 h后的重组菌中猪PBD1 mRNA含量最高。Western blot检测显示,经乳糖诱导的重组菌表达了约5.8 ku的目的蛋白,与PBD1成熟蛋白理论分子量相符。抑菌试验结果显示重组PBD1对葡萄球菌具有明显抑制作用。表明猪PBD1基因在重组干酪乳酸杆菌中获得了表达,且具有抑菌活性。本研究为进一步研发具有广谱抗菌作用的微生态制剂奠定了基础。     

低致病性禽流感病毒在河南的分离

1 临诊发病情况1.1 河南漯河临颖县大郭乡某鸡场(代号1)饲养的罗曼鸡12 000只，从110日龄开始，每天有鸡死亡。120日龄后，鸡群死亡情况加重，剖检见气管有粘液，心冠脂肪有出血点，心包有黄色纤维素状物覆盖，腺胃水肿，肠粘膜充血出血，肝、肾肿大。因为60日龄防过流感，误认为新城疫，用Ⅰ系和Ⅳ系苗紧急接种，死亡率反而增高，没有效果。1.2 河南许昌县程庄一鸡场(代号2)饲养的来航鸡12 500只，该鸡群从65日龄开始表现精神沉郁，食欲减退，下痢，以后逐渐死亡，药物控制没有明显效果。剖检发现气管和喉粘膜弥漫性出血，腺胃乳头出血，肠…     

家畜"猝死症"的调查研究

近几年来,在我国的四川、江苏、吉林、安徽、河南、山东、福建、陕西等省,散发或流行一种以肉牛为主的动物急性死亡症,其发病急,病程短,死亡率高,常称为猝死症.本病由各种原因,包括一些不明原因,而引起的急性死亡,给诊断治疗带来一定困难,为此,对家畜"猝死症"的流行情况,开展诊断学,流行病学等全面调查研究,并采取了综合防制措施.     

黄芪、金银花体外对伪狂犬病病毒作用研究

选用黄芪、金银花作为抗病毒药物，利用CPE抑制实验测定出黄芪、金银花单独使用及1：1联合使用在PK15培养上对PRV的最小直接杀灭浓度和最小阻断浓度。结果表明：黄芪、金银花对PK15的无毒浓度分别为62.5mg/ml，15.62mg/ml，金银花体外对PRV有抑作用，其对PRV的直接杀灭浓度为3．90mg/ml；最小阻断浓度为1．95mg/ml。与黄芪联合使用，其抑制作用增强，对PRV的直接杀灭浓度为1．95mg/ml，最小阻断浓度提高0．93mg/ml。黄芪单独使用对PRV的抑制作用不显著，但与金银花合用可使其抑制作用增强。     

有机硒在动物体内的营养作用

硒作为动物体内重要的微量元素之一,近几年来已广泛应用于畜禽饲料中。国内外大量研究资料证明,硒在动物体内的代谢过程中以有机硒的形态发生作用,其活性大小与硒结合的组分有关,硒蛋氨酸远比无机硒的利用率高。另外有机硒同无机硒相比,具有吸收率高,生物活性强,毒性小,环境污染小等优点,因而已成为目前硒研究的一个热点。1 有机硒的营养有机硒的最基本作用是参与谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)合成,GSH-PX广泛存在于所有动物机体的组织中,起保护细胞膜免受自由基对其膜上的不饱和脂肪酸的过氧化伤害,GSH-PX通过还原型谷胱甘肽(GSH)向氧…     

鸽新城疫的诊断和防制

1发病情况及临床症状 2005年10月，我省荥阳某养鸽场，饲养8600羽肉鸽，2005年3月中旬用鸽副黏病毒灭活苗仅免疫1次。10月初个别雏鸽（20--40日龄）开始出现精神沉郁，缩头闭目，羽毛松乱，不愿走动，张口呼吸，病初拉黄白色稀粪，后期排出蛋清样排泄物，有的同时出现神经症状，跛行或站立不稳，头颈向后或向一侧扭转。以后陆续出现一些发病鸽，发病率为4．5％，死亡率为20％。曾经用一些抗生素如：环丙沙星、强力霉素、头孢力新进行治疗，几乎没有效果。     

鸡传染性喉气管炎病毒gD基因与ChIL-2重组禽痘病毒的构建及其免疫效力试验

将鸡传染性喉气管炎病毒（ILTV）gD基因和鸡白细胞介素2（ChIL-2）基因通过同源重组法重组禽痘病毒转移载体,构建含ILTVgD基因和ChIL-2基因的重组禽痘病毒转移载体rFPVIL2ILTV—gD,蓝色蚀斑纯化法纯化重组病毒,用IFA检测重组病毒中ILTVgD基因的表达和用ELISA试剂盒检测ChIL-2的表达。重组病毒rFPV—IL2-ILTV-gD免疫试验鸡,间接ELISA测定血清中ILTV抗体效价,动物试验用构建的ILTV强毒以滴鼻方式攻击各组试验鸡,结果表明,外源基因在重组禽疽病毒中得到了稳定表达;ELISA检测结果表明在免疫7d后能够检测到血清抗体,免疫21d后血清抗体达到高峰,此后便开始逐渐下降,符合疫苗免疫的消长规律;攻毒后每组鸡的发病情况可以看出重组病毒rFPV-IL2-ILTV-gD组和疫苗对照组对ILTV强毒攻击的保护率分别为96％和92％,而空白对照组为8％。说明构建的重组病毒rFPV-IL2-ILTV—gD免疫效力稍优于弱毒疫苗,能够较好的保护免疫鸡群。     

板蓝根多糖的提取及其对猪繁殖与呼吸综合征病毒的体外作用

用水煮醇沉法从中药板蓝根中提取板蓝根多糖,作为试验药物,观察其在Marc-145单层细胞上对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的作用效果.结果表明,在安全浓度范围内,板蓝根多糖体外对PRRSV具有较好的阻断和抑制作用,最小阻断浓度为2.094 μg/ml,最小抑制浓度为8.375 μg/ml.     

3个品种鸡α干扰素基因的克隆与序列分析

根据GenBank中鸡α干扰素(IFN-α)基因序列设计1对引物,应用PCR技术直接从鸡肝组织基因组中扩增罗曼鸡、海兰鸡及固始鸡α干扰素基因,并进行克隆和测序.结果表明,获得了3个品种鸡IFN-α全基因序列,长度均为582bp,编码193个氨基酸残基.3个品种鸡IFN-α基因及推导的氨基酸序列比较结果显示,海兰鸡和罗曼鸡IFN-α基因序列完全一致,而固始鸡与海兰鸡和罗曼鸡IFN-α基因核苷酸同源性99.3%,有4个碱基发生非同义变异,氨基酸同源性为97.9%.克隆的3个品种鸡IFN-α基因序列与GenBank上发表的7条鸡IFN-α基因序列进行比较分析发现,核苷酸同源性在98.1%～100%之间,氨基酸同源性在96.9%～100%之间.     

生产性能的影响

 试验将60头28日龄断奶的健康、体重相近（7.63μ0.52kg）的长大二元杂交商品仔猪按体重、性别,随机分为5组,即对照组和4个试验组,对照组即原用进口鱼粉配方组,第1、2、3、4试验组为分别用山东济宁圣齐生物生物工程生产的活性酵母蛋白粉替代25%、50%、75%和100%的进口鱼粉组,共试验4w。研究添加不同水平酵母蛋白粉对断奶仔猪生产性能的影响。结果表明：断奶仔猪日粮中添加酵母蛋白替代进口鱼粉后均没有显著改变原添加进口鱼粉仔猪断奶后0~4w的平均日采食量和平均日增重,饲喂效果较好。综合各项试验指标,酵母蛋白粉以50%~75%的比例替代进口鱼粉,添加到断奶仔猪日粮中对仔猪生产性能有明显的促进作用,且饲料成本下降。