Experimental study on seismic behavior of beam-column sandwich joints with big beam-column eccentricity

Three specimens of sandwich joints with eccentricity being larger than a quarter of the column width in middle floor of frame are designed and loaded under cyclic loading. Their shear capacity, failure modes, and ductility, as well as energy dissipation are analyzed. The results show that the performance of sandwich joints with big eccentricity is good under cyclic loading. X-type reinforcements can be used to substitute for stirrups in the joint to bear shear forces. But the anchorage of longitudinal bars of beams in eccentric sandwich joints is relatively weak. Comparing to sandwich joints without eccentricity, the column longitudinal bars near the sandwich joints with big eccentricity are vulnerable to sudden change of strain.     

草鱼白介素10基因的克隆表达及其双抗体 夹心ELISA检测方法的建立

为建立检测草鱼白介素10(CiIL-10)的双抗体夹心 ELISA方法,首先克隆CiIL-10基因、构建与表达原核表达重组质粒pET-32a-CiIL-10,并对表达产物进行纯化,以获得重组CiIL-10(rCiIL-10)纯化蛋白.然后,以纯化的rCiIL-10蛋白为免疫原制备兔源及鼠源抗rCiIL-10的多克隆抗体,并对其进行纯化与酶标记.最后,以纯化的鼠抗rCiIL-10抗体为捕获抗体,rCiIL-10纯化蛋白为夹心抗原,HRP标记的兔抗CiIL-10纯化抗体为检测抗体,通过优化反应条件,建立双抗体夹心 ELISA检测方法.结果显示,该方法的优化反应条件包括,捕获抗体的最佳包被浓度为20μg·mL-1,检测抗体的最佳稀释度为1 ∶ 3 200,最佳封闭条件是使用5％脱脂奶粉,37℃封闭1.5 h,样品反应时间为2 h,以OD450值≥0.174作为阳性判定标准.该方法的板内及板间重复性变异系数小于10％,最低检测限量为24.29 ng·mL-1,与草鱼白介素6、草鱼肿瘤坏死因子、小鼠白介素10、小鼠干扰素和小鼠单核细胞趋化蛋白均无交叉反应.结果表明,建立的双抗体夹心ELISA方法具有较好的特异性、重复性和灵敏度,可用于草鱼白介素10的快速检测.     

犬瘟热病毒单克隆抗体夹心ELISA检测方法的建立

为建立方便快捷的犬瘟热病毒(CDV)检测方法,本实验应用杂交瘤细胞融合技术,建立了4株分泌抗CDV单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株,分别命名为A2、F7、H4和G12.相加ELISA试验显示4株MAb作用于CDV不同的抗原表位.选取相加指数较高的两株MAb G12和A2分别作为捕获抗体和酶标检测抗体,建立检测CDV的夹心ELISA检测方法,并对实验条件进行了优化.结果显示,该方法与犬细小病毒、犬副流感病毒、犬腺病毒1型、犬冠状病毒等犬类病毒无交叉反应,敏感度为5 μg/mL,变异系数小于6％.利用该方法与RT-PCR方法同时检测57份临床样品,两种方法的符合率为100％.本实验建立的MAb夹心ELISA方法具有特异、敏感、方便快捷等优点,适用于大批量临床样品检测.     

猪戊型肝炎病毒的流行病学调查

利用双抗原夹心ELISA对2009-2011年间采自广东省各地区的若干猪场的484份血清样品,进行血清流行病学调查;对69份病猪胆汁样品进行分子流行病学调查,分离得到猪源戊型肝炎病毒(swine hepatitis E virus, swHEV),并基于ORF2部分基因序列进行核苷酸序列比对、相似性分析和遗传进化树分析,以期初步了解广东各地猪群戊型肝炎(hepatitis E, HE)的感染情况和流行特点。试验结果显示,全部被检查猪的swHEV抗体平均阳性率为71.9%(348/484),分离的猪源HEV毒株均属于基因Ⅳ型,阳性率为71.0%(49/69)。调查结果表明基因Ⅳ型swHEV在广东地区普遍流行。     

冬种马铃薯稻草包芯栽培的生长发育特性及其生理特征

南方冬种马铃薯区推广的稻草覆盖栽培有多种方式,应用前景较大。为探讨冬种马铃薯稻草包芯栽培增产机理,以无覆盖稻草(裸地)为对照,研究了稻草包芯栽培与稻草免耕覆盖栽培马铃薯的生长发育及其生理特性。结果表明,包芯栽培为每667m2产量1727.8kg,比对照增产12.04%。从产量构成因素看,其高产优势缘于该栽培方式具有较高的平均单株薯块重和薯块数,而光合能力强、根系活力高、生物产量高是其高产的生理基础,具体表现为叶面积、光合势、根系活力和生物产量分别比对照增加39.1%、68.3%、36.3%和63.7%。稻草包芯栽培操作简便,稻草用量少,农民易接受。包芯后减少杂草,保水增温,疏松土层,能有效减少裂薯率和绿薯率,提高商品率,增产显著,综合表现良好,适于在福建等南方冬种区推广。     

乳铁蛋白酶标抗体的制备及其酶联免疫检测方法的建立

采用过碘酸钠法对抗牛乳铁蛋白抗体进行了辣根过氧化物酶标记,建立了二步式的双抗体夹心ELISA法,并对市售奶粉样品进行了测定。结果表明:所制备的酶标记抗体效价达到了1.6×106,与乳中主要其他蛋白如酪蛋白、乳白蛋白和β-乳球蛋白基本没有交叉反应,特异性较好;将HRP-2B12稀释105倍,以1%OVA为封闭液、含3%BSA的PBST溶液为酶标抗体稀释液,在此条件下建立的ELISA方法实现了对奶粉样品的定性测定。     

考虑横截面塑性区域扩展的竹木复合夹芯梁弯曲变形的理论研究

简述了竹木复合梁的研究现状,研究了竹木复合夹芯梁弯曲变形的破坏过程,运用理想弹塑性材料应力演化规律将横截面塑性区域的扩展过程分成了4个阶段,以平面假设为基础建立了竹木复合夹芯梁强度预测的理论模型。并通过对实例的计算,分析了夹芯梁弯曲变形过程中不同时刻横截面的弯矩与最大应力之间的关系。以此模型为基础计算的3点弯曲夹芯梁各阶段的跨中挠度理论值与试验结果具有较好的一致性,最大误差不超过6％。图3表2参11     

单克隆抗体夹心ELISA检测蚕豆萎蔫病毒研究

利用 ２ 株特异性单抗,建立了检测蚕豆萎蔫病毒（ＢＢＷＶ）的灵敏度高、特异性好的单抗夹心ＥＬＩＳＡ 方法⒚经测定,ＭｃＡｂ 最适包被浓度为０４ μｇ／ｍ Ｌ,ＨＲＰＭｃＡｂ 最佳工作浓度为１∶２ ０００,该方法最小检出浓度为０１６ μｇ／ｍ Ｌ,与几种常见的病毒无交叉反应⒚对杭州地区的 １４０ 多个样本进行了检测,发现蚕豆、豌豆中ＢＢＷ Ｖ 的阳性率达 ８０％ ⒚     

菲律宾蛤仔过敏原可视化抗体微阵列玻片的检测方法

采用辣根过氧化物酶(HRP)与3,3′,5,5′—四甲基联苯胺(TMB)—H2O2作为信号示踪系统,建立了一种可视化抗体微阵列检测菲律宾蛤仔过敏原的方法。对孵育时间、抗体浓度等免疫条件进行了优化。采用改良双抗体夹心法,将菲律宾蛤仔过敏原的兔多克隆抗体固定于琼脂糖三维芯片上,依次加入待检样品、菲律宾蛤仔鼠多克隆抗体和HRP-羊抗鼠IgG,孵育后加TMB显色,肉眼观察后,用平板扫描仪获取扫描图象,采用GenePixPro6.0软件分析灰度值。试验结果表明,该方法最低可检出10ng/mL的菲律宾蛤仔过敏原,片内平均变异系数(CV)为5.99%,片间为10.3%;香肠及蟹棒中3个不同浓度的加标回收率为73.54%～95.44%;4℃存放4个月内抗体微阵列玻片活性保持稳定。该方法不需要大型精密仪器,结果直观可见,可以发展为对多种过敏原进行同时检测,具有良好的实用和推广价值。     

抗伊氏锥虫表膜单克隆抗体的研究 Ⅱ.用抗伊氏锥虫表膜抗原McAb检测循环抗原

利用抗伊氏锥虫表膜抗原的McAb双抗体夹心法,检测了48匹健康马(骡)、5匹人工接种伊氏锥虫马(骡),9匹先用锥虫弱毒株免疫后用强毒株攻毒马(骡)共278份血清的循环抗原(CA),同时用常规间接ELISA检测了相应的循环抗体(CAb)。结果: 278份血清的CA、CAb阳性率无显著差异,但其阳性检出时机不完全吻合;人工接种马(骡)的CA阳性检出率高于CAb,于接虫后经1-2个CA高峰而死,濒死前4/5动物的CA呈现阳性,免疫马(骡)在攻虫前CA即可呈现阳性,多经1-3个CA高峰后逐渐转阴;人工接种马(骡)的CA水玉高于免疫马(骡),二次攻虫后的CA水平高于首次。