贵州地方猪BF基因的群体遗传特性分析

以BF基因为候选基因,利用PCR和直接测序技术对贵州白香猪、可乐猪、大约克猪3个品种共95个个体BF基因外显子15、16、17的733 bp进行多态性分析,并对不同品种进行群体遗传学分析。结果显示:在第16外显子45 bp处存在A→C的碱基突变,命名为BF-exon16-A45C,导致编码的氨基酸由谷氨酸(Glu)突变为天冬氨酸(Asp);在贵州白香猪和可乐猪群体内均检测到AA、AC和CC三种基因型,在大约克猪群体内只检测到AC和CC两种基因型,贵州白香猪处于低度多态,可乐猪和大约克猪处于中度多态。经χ2适合性检验表明:贵州白香猪在该位点偏离了Hardy-Weinberg遗传平衡状态,可乐猪和大约克猪均处于Hardy-Weinberg遗传平衡状态。     

胎牛血清在猪孤雌囊胚玻璃化冷冻后恢复培养中的作用研究

【目的】研究胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)在猪孤雌囊胚玻璃化冷冻后恢复培养中的作用。【方法】本试验以体外培养第5天的猪孤雌激活囊胚为材料,将新鲜和冷冻囊胚分别在含10% FBS(V/V)的胚胎培养液中继续培养48 h,即分为新鲜组(Fresh)、新鲜+FBS组(Fresh+FBS)、冷冻组(Vitrified)、冷冻+FBS组(Vitrified+FBS)。观察各组囊胚的扩张和孵化能力,检测胚胎的细胞膜损伤、凋亡细胞数目、总细胞数目、胞内活性氧(ROS)水平、线粒体活性以及发育相关基因的表达水平。【结果】与Fresh和Vitrified组相比,Fresh+FBS和Vitrified+FBS组的完全扩张率、孵化率和囊胚细胞总数均显著提高(P＜0.05),细胞膜损伤率和细胞凋亡率均显著降低(P＜0.05)。与Fresh组相比,Vitrified组ROS水平显著升高(P<0.05),Fresh+FBS和Vitrified+FBS组ROS水平均显著降低(P<0.05)。Vitrified+FBS组的线粒体活性显著高于Vitrified组(P<0.05)、显著低于Fresh+FBS组(P<0.05),与Fresh组无显著差异(P＞0.05)。相比于Fresh组,Vitrified组POU结构域与类转录因子1(POU5F1)表达水平显著上升(P＜0.05)、过氧化氢酶(CAT)表达水平显著下降(P＜0.05)。增殖细胞核抗原(PCNA)、DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)、超氧化物歧化酶1(SOD1)、BCL2相关X蛋白(BAX)/BCL2L1的表达水平在Fresh和Vitrified组之间均无显著性差异(P＞0.05)。Fresh+FBS和Vitrified+FBS组中PCNA、SOD1和CAT的表达水平显著高于Fresh和Vitrified组(P<0.05)。【结论】体外培养第5天的新鲜和冷冻猪孤雌囊胚在10% FBS中继续培养,其发育能力及胚胎质量均得到明显改善。     

Detection and genetic diversity of porcine rotavirus A,B and C in eastern Australian piggeries

Rotaviruses (RV) have a high prevalence in piggeries worldwide and are one of the major pathogens causing severe diarrhoea in young pigs. RV species A, B, and C have been linked to piglet diarrhoea in Australian pig herds, but their genetic diversity has not been studied in detail. Based on sequencing of the structural viral protein 7 (VP7) RVA G genotypes G3, G4 and G5, and RVC types G1, G3, G5, and G6 have been identified in Australian piggeries in previous studies. Although occurrence of RVB was reported in Australia in 1988, no further genetic analysis has been conducted. To improve health management decisions in Australian pig herds, more information on RV prevalence and genetic diversity is needed. Here, 243 enteric samples collected from 20 pig farms within Eastern Australia were analysed for the presence of RV in different age groups using a novel PCR-based multiplex assay (Pork MultiPath™ enteric panel). RVA, RVB, and RVC were detected in 10, 14, and 14 farms, respectively. Further sequencing of VP7 in selected RV-positive samples revealed G genotypes G2, G5, G9 (RVA), G6, G8, G14, G16, G20 (RVB), and G1, G3, G5, G6 (RVC) present. RVA was only detected in young (<10 weeks old) pigs whereas RVB and RVC were also detected in older animals (>11 weeks old). Interestingly, RVB and RVC G-type occurrence differed between age groups. In conclusion, this study provides new insights on the prevalence and diversity of different RV species in pig herds of Eastern Australia whilst demonstrating the ability of the Pork MultiPath™ technology to accurately differentiate between these RV species.     

泛素激活酶抑制剂对猪精子获能状态、膜重构及体外受精的影响

【目的】评估泛素激活酶（E1）对猪精子获能、膜重构和体外受精的影响。【方法】选取5头长白猪采集精液，以硫醇酯法评估泛素激活酶（ubiquitin activating enzyme，E1）抑制剂（TAK-243）对精子中泛素（ubiquitin，Ub）与E1结合的影响；将精子分为鲜精组（Fresh）、DMSO组（DMSO）、获能组（Capacitated）及2.4、4.8和7.2 nmol/L TAK-243组，鲜精组用2 mL PBS重悬精子沉淀；获能组用2 mL获能液重悬精子沉淀；DMSO组及2.4、4.8和7.2 nmol/L TAK-243组分别用2 mL含0.07% DMSO及2.4、4.8和7.2 nmol/L TAK-243的获能液重悬精子沉淀，使用微生物动（静）态图像检测系统检测精子的动力学参数；以Western blotting法检测精子的酪氨酸磷酸化水平；Zn²⁺荧光探针检测精子的Zn²⁺含量；花生凝集素染色检测精子的顶体膜重构；免疫荧光法检测顶体表面精子黏附蛋白（AQN-1、AWN）的表达；体外受精法检测TAK-243对精卵结合和卵裂率的影响。【结果】硫醇酯分析结果表明，TAK-243处理组精子未形成Ub-E1复合物，说明TAK-243抑制了E1对Ub的激活作用。与鲜精组相比，获能组精子的曲线速度（VCL）和平均鞭打频率显著升高（P<0.05）。3个浓度TAK-243组与获能组精子的各项动力学参数差异均不显著（P>0.05）。与获能组相比，3个浓度TAK-243组酪氨酸磷酸化水平均显著降低（P<0.05），且随着TAK-243浓度的增加，精子蛋白的酪氨酸磷酸化水平逐渐降低。后续试验使用7.2 nmol/L TAK-243进行精子中Zn²⁺水平和顶体膜重构的研究，其结果表明，与获能组相比，7.2 nmol/L TAK-243组Zn²⁺水平、顶体膜完整性及AQN-1和AWN蛋白的表达水平均显著增加（P<0.05），精子与卵母细胞的黏附率和卵裂率均显著降低（P<0.05）。【结论】7.2 nmol/L TAK-243显著降低了精子获能期间蛋白酪氨酸磷酸化水平、精卵结合率和卵裂率，显著增加了Zn²⁺含量、顶体膜完整率及顶体表面蛋白AWN和AQN-1的表达，说明泛素-蛋白酶体信号通路参与了精子的体外获能。     

莱芜猪胴体切块质量预判

本文以莱芜猪肉质育种为例，介绍了在屠宰线上对胴体的肉色、大理石纹、特别是肌内脂肪进行主观评定预测的简单易行的方法，其结果可用于肉质选种选育。     

基层常见猪传染性腹泻病的临床诊断与防控对策

猪传染性腹泻病是猪的常见多发病。基于受基层单位病原检测技术的条件限制,一旦发生传染性腹泻病,基层兽医通常依据临床症状做出初步诊断与治疗,如果临床经验稍有不足,误诊、误治或延误诊治的现象时有发生。为此梳理出了常见的12种猪传染性腹泻病临床诊断要点与综合防治措施,以防止其重大疾病的发生。     

小型猪复合麻醉剂对大鼠不同脑区突触体Ca^2＋，Mg^2＋-ATP酶活性的影晌

探讨Ca2＋，Mg2＋-ATP酶与小型猪复合麻醉剂全麻作用的关系，以判断该酶是否为该制剂作用的靶位之一。选取84只SD大鼠，先随机抽取12只为对照组，其余随机均分为高剂量小型猪复合麻醉剂组（腹腔注射7．5mg／kg）和低剂量小型猪复合麻醉剂组（腹腔注射5mg／kg），每个剂量组又随机均分为麻醉组、恢复I组和恢复Ⅱ组等3个亚纽。对照组腹腔注射生理盐水10mL／kg，5min后断头取材；麻醉组、恢复I组和恢复Ⅱ组分别在翻正反射消失即刻、翻正反射恢复即刻和大鼠可直线爬行后断头取材，在生理盐水冰面上取脑，用4℃生理盐水将脑上的血迹冲洗干净，迅速分离双侧大脑皮层、海马、小脑、脑干、丘脑，立即液氮冷冻。制备脑粗突触体，采用比色法测定ca2＋，Mg2-ATP酶活性。结果表明，小型猪复合麻醉剂的全麻作用与抑制小脑和丘脑突触体Ca2＋，Mg2＋-ATP酶活性相关，此酶可能是小型猪复合麻醉剂全麻作用的靶位之一。     

斜发沸石对苏淮育肥猪血液生化指标和肠道形态的影响

旨在研究基础日粮中添加不同水平的斜发沸石对苏淮育肥猪血液生化指标、肠道形态的影响,为斜发沸石在苏淮猪生产中的应用提供数据参考。选择体重(50±2)kg、健康的苏淮阉公猪40头,随机分为对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组共4个处理组。试验预饲期10 d,所有猪自由采食对照组基础日粮;正试期64 d,对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ至Ⅲ组分别在基础日粮中添加0.5%、1.0%、2.0%的斜发沸石。结果:随斜发沸石水平增加,血清免疫球蛋白G(IgG)、肠道黏膜分泌型免疫球蛋白(sIgA)和肠道黏膜IgG含量升高。随斜发沸石水平增加,血清碱性磷酸酶含量升高;血清甘油三酯含量先升高后降低。随斜发沸石水平增加,平均红细胞血红蛋白浓度含量升高;红细胞分布宽度变异系数降低。随斜发沸石水平增加,十二指肠隐窝深度降低;空肠绒毛高度和空肠段绒毛高度/隐窝深度有升高的趋势。试验表明,在各组日粮消化能和粗蛋白均满足且一致的情况下,添加适宜比例斜发沸石对改善猪的机体血液及肠道免疫功能有积极作用。综合考虑以上检测指标变化规律及斜发沸石添加成本,建议斜发沸石的适宜添加比例为1.0%。     

非洲猪瘟疫情对生猪产业链上市公司市场价值的影响研究

[目的] 研究旨在应用实证方法分析非洲猪瘟疫情对生猪产业链上市公司市场价值造成的影响,进而得出疫情对生猪产业链上养殖、屠宰、加工、消费等环节利益相关者收益的影响。[方法]采用事件研究法,选取涉及生猪产业链上市公司,按主营业务统计为肉制品加工、养殖、饲料和兽药4种类型的32家相关上市公司,通过设计指标对生猪产业链上市公司股票异常收益率波动进行计算和检验。[结果]研究结果表明：非洲猪瘟疫情事件对生猪养殖行业的影响最大；对兽药行业的影响周期最长；肉制品加工行业的影响程度和周期仅次于兽药行业,对饲料行业的影响最小。[结论] “非洲猪瘟”事件对猪产业链上的饲料、养殖、肉制品加工、兽药类上市公司市场价值存在显著的负面影响。     

猪胆囊中沙门菌L型的分离培养与invA基因检测

为了解猪胆囊中沙门菌L型携带情况,在贵阳市屠宰场采集970例健康生猪的胆囊组织与胆汁标本,用常规细菌学方法和非高渗分离培养法分离沙门菌及其细菌L型,用PCR和核酸序列分析方法对稳定L型纯培养物进行沙门菌的invA基因检测。结果显示,970例生猪胆囊标本未检出沙门菌细菌型,细菌L型检出率为8.25%;80例细菌L型分离物中有50例invA检测阳性,占5.15%;占细菌L型阳性分离物62.50%。研究结果为生猪胆囊沙门菌L型感染的流行病学及其检查提供了依据。