复合酶法改善大豆分离蛋白乳化性的试验

运用配料试验设计解决了多酶复配的比例优化问题.采用米曲霉蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶对大豆分离蛋白进行水解,建立复合酶配合比例与乳化性之间的数学模型.确定最佳比例为:米曲霉蛋白酶11.79%、胰蛋白酶32.93%、木瓜蛋白酶55.28%.最佳水解条件为:复合酶温度40℃、底物质量分数9%、酶添加量3%、pH值7.5、水解时间3 h,乳化能力比原料提高了50.86%.     

白叶枯病菌拮抗菌筛选及水稻叶围微生物互作研究初报

 1998年7月～10月, 于田间汕优63水稻叶片上分离采集微生物, 并进行叶围微生物鉴定,以筛选白叶枯病拮抗菌。结果表明:除极少量分布的真菌和细菌外, 主要种群包括真菌类群Alternaria和 Fusarium属; 细菌类群Flavobacterium, Xanthomonas, Pseudomonas和Bacillus属。对白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae pv. oryzae）具有明显拮抗作用的微生物为Bacillus属,而且Bacillus属细菌对其余大部分叶围微生物具有程度不同的拮抗作用,可以初步断定其产生的拮抗物质具有一定的广谱性。     

伪狂犬病弱毒株的分离鉴定及生物学特性的研究

在流行病学调查中分离到1株病毒,经鉴定为伪狂犬病弱毒株,定名为F971株。分离病毒经克隆纯化后测得其毒价为10^7.59TCID50/ml,通过细胞中和试验表明分离病毒能也有效地被猪伪狂犬病毒闽A株阳性血清中和。病毒在电镜下可以清楚地观察到囊膜及外周纤突。分离株对3日龄乳鼠有一定的致病力,但对家兔、3日龄乳猪及妊娠母猪都有很高的安全性。用不同的剂量10^0、10^-1、10^-2肌肉注射3日龄乳猪后14天用10^5.7TCID50伪狂犬病强毒攻击,所有试验仔猪均得到保护。用分离株免疫母猪,其后代可获高滴度的母源抗体,15日龄的仔猪能抵御10^5.7TCID50强毒的攻击。用ELISA普查试剂盒测定免疫猪抗体,结果均为阳性,而用g^1-ELISA试剂盒测定抗体时,结果均为阴性。证明分离株具有缺损g^1糖蛋白的特性。综合上述特性,确定F971为1株g^1糖蛋白缺损的猪伪狂犬病弱毒株。     

357细菌拮抗物质的提取和生物活性检测

从Bacillus cereus中提取了357细菌的拮抗物质。该拮抗物质为非蛋白类的脂溶性物质。它对真菌、细菌、酵母以及小鼠腹水肿瘤细胞的生长有很强的抑制作用。该细菌只能在固体培养的条件下分泌拮抗物质。     

Fish meal replacement with solvent‐extracted soybean meal or soy protein isolate in a practical diet formulation for Florida pompano (Trachinotus carolinus,L.) reared in low salinity

Two 8‐week growth trials were conducted with juvenile Florida pompano, Trachinotus carolinus fed 0–1000 g kg^?1 replacement of fish meal (FM) protein with soybean meal (SBM) or soy protein isolate (SPI). Practical‐type diets were formulated with at least 360 g kg^?1 digestible protein and 24 mg kJ^?1 digestible protein/digestible energy. Weight gain and efficiency were not different between 0 and 800 g kg^?1 FM protein replacement with SBM. Regression of weight gain and protein productive value suggested a conservative level of SBM substitution was 380 g kg^?1 FM protein. It appeared that lysine could be limiting beyond 400 g kg^?1 FM replacement. No significant differences were detected in fish fed 0 and 200 g kg^?1 FM protein replacement with SPI. A decrease in weight gain and efficiency parameters occurred at 400 g kg^?1 protein replacement, and fish fed a replacement of 600 g kg^?1 or greater with SPI exhibited signs of starvation. A third trial indicated intake and growth were significantly reduced (P < 0.0001) in fish fed 600 g kg^?1 relative to 0 g kg^?1 FM protein replacement with SPI. Poor palatability of diets containing 400 g kg^?1 or more FM protein replacement with SPI appeared to be the causative factor for poor performance.     

牛产肠毒素性大肠杆菌病病原的分离与鉴定

黑龙江省安达市某牛场二月份发生牛腹泻,采集病牛腹泻物进行细菌分离培养,涂片、染色、镜检观察,并对其形态特征、培养特性、生化特性、药物敏感性及致病性等生物学特性进行研究。结果表明引起该病的病原是产肠毒素性大肠杆菌。该菌株对环丙沙星、阿莫西林、羧苄青霉素等高度敏感,而对链霉素、四环素、土霉素等表现耐药性。     

Characterization of the FODMAP-profile in cereal-product ingredients

Cereal-based products, such as bread, are staple foods in the western diet. Due to the nature of their basic ingredients and the diversity of recipes, the amount of fermentable short-chain carbohydrates (FODMAPs) in those products may be high. This study characterized the FODMAP-profiles of a broad range of cereal-product ingredients, serving as a basis for low FODMAP product development. Different cereals, pseudo-cereals, gluten-free flours, pulses, pulse protein ingredients, commercial sprouts, and other cereal-product ingredients were analyzed, using anion-exchange chromatography with electrochemical detection. Wheat and related cereals were high in fructans. Pulses, such as peas contained high galactooligosaccharides (GOS) amounts. Whereas GOS levels in pulse protein ingredients varied, depending on their production. Gluten-free flours, for instance, rice-flour, showed low FODMAP-profiles. Amongst those, buckwheat, which does not contain any of the FODMAPs investigated, contained high amounts of other soluble non-digestible carbohydrates, namely fagopyritols; these may have a similar effect on a sensitive gut as GOS. Finally, ingredients contained mainly high levels of fructans and GOS. Yet, the analysis of commonly consumed commercial cereal products, including bread, pasta, crackers and biscuits, highlighted the relevance of lactose, fructose in excess of glucose and polyols. These products serve as benchmarks for further product development.     

基于光谱技术的维生素B12与大豆分离蛋白相互作用分析

为了提高维生素B12稳定性和开发维生素B12营养强化食品,以维生素B12-大豆分离蛋白复合体系为研究对象,利用光谱技术(荧光光谱、紫外-可见吸收光谱、红外光谱、圆二色谱)分析维生素B12与大豆分离蛋白的相互作用对蛋白质结构的影响。荧光光谱分析表明,随着维生素B12质量浓度的增大,大豆分离蛋白的荧光强度不断降低,通过Stern-Volmer方程计算可得,维生素B12对大豆分离蛋白的猝灭方式属于静态猝灭,二者主要通过范德华力和氢键作用结合,结合位点数为1;同步荧光光谱分析表明,维生素B12与大豆分离蛋白结合位点位于色氨酸附近;紫外光谱分析表明,维生素B12诱导色氨酸残基附近的微环境疏水性增强,蛋白分子的结构发生改变;红外光谱和圆二色谱分析表明,维生素B12的加入导致大豆分离蛋白的二级结构发生改变,具体表现为α-螺旋和β-转角相对含量增加、β-折叠和无规则卷曲相对含量减少。     

丙二醛氧化对核桃分离蛋白结构及乳化性的影响

【目的】研究脂类过氧化作用的最终产物丙二醛（malondialdehyde,MDA）对核桃分离蛋白（walnut protein isolate,WPI）结构和乳化性能的影响,在分子水平上探讨这种氧化对WPI结构修饰与功能影响机制,为核桃蛋白抗油脂产物氧化及对乳化性功能的损伤提供理论依据。【方法】采用酸沉碱溶法分离核桃蛋白,加入1,1,3,3-四乙基环丙烷制备的产物MDA最终浓度分别为0、0.1、1、5、10和20 mmol·L^-1,在室温下与WPI反应24 h,通过透析去除MDA,再真空冷冻干燥制备MDA氧化核桃蛋白。测定氧化蛋白标记性基团（巯基、二硫键、氨基和羰基）、物理化学性质（溶解度、浊度、疏水性、粒径和Zeta电位）及蛋白的乳化功能性等。【结果】MDA氧化造成核桃蛋白溶解度从68.74%下降到11.88%,特别是5—20 mmol·L^-1 MDA对溶解度有显著影响（P<0.05）,但对蛋白溶液的浊度影响不大（其所有值保持在0.32左右）;在蛋白分子基团修饰方面,0—1 mmol·L^-1 MDA对总巯基、二硫键、自由氨基和羰基含量影响不大,但5 mmol·L^-1以上浓度的MDA对总巯基和自由氨基含量的降低及对二硫键和羰基含量的上升影响显著（P<0.05）;聚丙烯酰胺凝胶电泳结果也显示较高浓度MDA对二硫键的含量增加影响显著,并促进核桃蛋白分子间（内）形成了还原性二硫键和非还原性共价键。在低于0.1 mmol·L^-1的MDA中氧化并不影响核桃蛋白二级结构,而在1 mmol·L^-1 MDA以上则能显著降低α-螺旋和β-折叠、β-转角含量,提高无规则卷曲含量;随着MDA浓度增加而引起的蛋白荧光强度变化规律与蛋白二级结构中的有序结构变化规律相同,特别是10 mmol·L^-1以上浓度的MDA能极大地降低蛋白荧光强度。0—1 mmol·L^-1 MDA氧化不改变蛋白疏水性,但1 mmol·L^-1以上浓度的MDA显著降低蛋白疏水性,疏水性最大降低程度为对照组的1/10;同时,低于1 mmol·L^-1 MDA氧化对核桃蛋白粒径和带电量没有显著影响,而浓度超过1 mmol·L^-1MDA则能显著提高蛋白粒径大小,并在10 mmol·L^-1 MDA时达到最大粒径约1 160 nm,且显著降低蛋白带电量,且随着MDA浓度提高而一直降低。在核桃乳化功能性方面,0.1 mmol·L^-1 MDA氧化即可显著降低蛋白乳化活性,而1 mmol·L^-1MDA氧化可显著降低乳化稳定性;随着MDA的浓度上升至20 mmol·L^-1,乳化活性和乳化稳定性持续降低并均能损失约2/3的功能性。【结论】核桃蛋白在脂类氧化产物MDA氧化体系中,随着氧化度的加剧,MDA通过与蛋白反应而显著修饰蛋白分子结构（包括其残基基团）,促进其交联形成大的聚集体进而改变其物化性质,从而显著降低蛋白的乳化功能性。     

超声对豌豆分离蛋白结构及乳化性能的调控效应

【目的】考察超声波处理对豌豆分离蛋白（pea protein isolate,PPI）结构和理化性质的影响,揭示超声处理对PPI乳化特性的调控机制,为豌豆蛋白作为天然乳剂及其相关产品在食品领域中的应用提供理论依据。【方法】选用频率为20 kHz、功率为600 W的超声波经不同时长（0、20、30、40和60 min）的预处理后制备改性豌豆蛋白（ultrasonic-pea protein isolate,U-PPI）,再经高压均质制备U-PPI乳液。通过自由氨基、总巯基、粒径、溶解度及SDS-PAGE探究超声波处理对豌豆蛋白理化性质的影响;借助圆二色谱仪分析U-PPI二级结构的变化;通过内源性色氨酸荧光测定分析U-PPI三级结构的变化;通过乳化活性指数、粒径、乳液界面蛋白分布、Zeta电位和表观黏度表征U-PPI的乳化能力和乳液稳定性;借助激光共聚焦荧光显微镜观察乳状液的微观结构。【结果】超声波处理对PPI结构具有显著修饰作用,30—40 min的短时间超声处理能够显著降低α-螺旋并提高β-折叠含量,使PPI的结构更加舒展柔韧,更多的疏水基团暴露在界面上,同时超声波的解聚效应还引起PPI的平均粒径减小、溶解度显著增大;因而在此条件下超声处理对PPI结构的修饰有利于其在油/水界面形成致密而稳定的蛋白膜,有效地提高了PPI的乳化活性和乳状液的稳定性,微观结构也显示其乳液粒径更小、分布更加均匀。然而,60 min的长时间超声处理会导致PPI的疏水重聚,溶解度降低,不利于其在油/水界面的吸附重排,降低了其乳化活性和乳液稳定性。【结论】30和40 min超声处理产生的空化效应、机械效应等对PPI具有显著的解聚作用,促使蛋白分子结构舒展,有利于其在油/水界面的吸附重排,从而显著改善了豌豆蛋白的乳化性能。