鲤鱼肝原代细胞的分离与培养方法

本研究在酶消化法的基础上,通过比较不同的肝组织分离和培养条件,获得鲤鱼肝原代细胞培养的最佳培养方法和条件。首先,结合细胞数量和台盼蓝染色所得的细胞存活率,比较了胰蛋白酶消化鲤鱼肝组织的不同反应温度和时间,结果表明:肝组织用0.25%(m/V)胰蛋白酶在25℃消化40 min时细胞分离效果最好。其次,经酶消化得到的肝原代细胞粗制液,设置4种不同的细胞纯化和培养条件:1)将细胞直接重悬于含10%胚牛血清(FBS)的L-15/DMEM培养基中培养;2)以10%鲤鱼血清取代培养基中的胚牛血清重悬细胞并培养;3)将细胞经Percoll液密度梯度离心纯化后,重悬于含10%胚牛血清的L-15/DMEM培养基中培养;4)细胞经Percoll纯化后,重悬于含10%鲤鱼血清的L-15/DMEM培养基中培养。利用光学显微镜观察肝细胞的形态,进而通过HE染色法检测,结果表明经Percoll纯化后,肝细胞纯度显著提高;采用MTS/PMS法检测肝细胞的增殖情况,结果表明鲤鱼血清代替胚牛血清培养细胞,肝细胞活力显著提高。本研究将为建立稳定的毒理学肝原代细胞实验模型奠定基础。     

种鸡开产前免疫不同新城疫-传染性支气管炎-禽流感H9三联油苗的效果观察

为了探讨尽可能延长母鸡开产后免疫保护期的可能性,本试验选用市售的两种新城疫(ND)-传染性支气管炎(IB)-禽流感(AI)H9三联灭活商品疫苗在广西地区主要地方品种三黄鸡的两个品系黄1和黄2上分别进行对比免疫试验。种鸡开产前的150日龄分别使用疫苗A(精制浓缩型油苗)、疫苗B(普通油苗)免疫,然后分别于免疫时以及免疫后的1个月、2个月、3个月、4个月和5个月分别使用HI试验和ELISA测定两组鸡只相应产生的血清抗体滴度。结果表明,在黄1品种上的试验,疫苗A免疫组的ND抗体水平高于疫苗B免疫组,两组鸡的H9、IB抗体水平则无明显差异;在黄2品种的试验,疫苗A免疫组的ND、H9、IB抗体水平均高于疫苗B免疫组;开产前免疫疫苗A后5个月,黄1和黄2品种均仍能维持较高的抗体水平,其中黄1品种可推迟补免时间20多天,黄2品种推迟补免时间1个月。     

饲料脂肪水平对俄罗斯鲟幼鱼生长、血液生化指标及抗氧化性能的影响

以鱼油、豆油、亚麻籽油等比例混合,配成脂肪含量分别为5.45%(L1)、7.00%(L2)、10.44%(L3)、14.37%(L4)、16.34%(L5)、18.91%(L6)及20.15%(L7)的等氮饲料,饲喂俄罗斯鲟(Acipenser gueldenstaedtii)幼鱼[(6.20±0.02)g]8周。实验结果表明,L3组的终末体质量、增重率最大,但与L2组间无显著差异(P0.05),L3组的蛋白质效率显著高于其它组(P0.05),且饲料系数最低。L6和L7组终末体质量、增重率和蛋白质效率显著低于L2和L3组(P0.05)。将幼鱼的增重率与饲料脂肪水平进行回归分析,得出俄罗斯鲟幼鱼在饲料脂肪水平为10.69%时生长最佳。随着饲料脂肪水平的升高,各组鱼的肝体比和体粗脂肪有上升趋势,其中肝体比在饲料脂肪含量大于14.37%时显著增大(P0.05)。血清中的甘油三酯、胆固醇含量也随脂肪水平升高而显著提高(P0.05),提示脂肪过高会影响俄罗斯鲟幼鱼的生长,降低蛋白质效率,导致脂肪在体内的过量积蓄。L7组鱼血清中高密度脂蛋白胆固醇含量最高,而L1组鱼的低密度脂蛋白胆固醇含量最高。肝脏脂蛋白酯酶活性随饲料脂肪水平的提高而升高,脂肪酸合成酶活性则随脂肪水平升高而降低,提示饲料脂肪水平的提高会促进鱼体脂肪的分解代谢。肝脏丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性均随着饲料脂肪水平的提高显著升高(P0.05),表明脂肪含量过高会导致脂质过氧化,引发机体抗氧化酶活性的升高。综合俄罗斯鲟幼鱼的生长、血液指标及抗氧化性能,建议生产中将幼鱼的饲料脂肪水平控制在7.00%~10.69%。     

盐酸赛拉嗪麻醉时对犬血清糖、脂、蛋白质含量的影响

研究临床上动物手术前应用盐酸赛拉嗪麻醉时对犬血清中3大营养代谢物质含量的影响。挑选8只健康犬,试验前犬禁食24 h、禁水12 h,分别在股四头肌肌肉注射0.24 mg/kg体重的塞拉嗪。分别在注射麻醉药后0、0.5、1、1.5、2 h颈静脉采血2 m L,常规分离血清,检测葡萄糖、甘油三脂、总胆固醇、总蛋白和白蛋白的含量。结果与试验开始相比,0.5 h、1.5 h、2 h血清葡萄糖含量极显著增加(P<0.01),而各时间点之间无显著差异(P>0.05);甘油三酯含量在试验开始后1.5 h和2 h时极显著下降(P<0.01)。整个试验期间血清总胆固醇、总蛋白和白蛋白含量均无显著变化(P>0.05)。结论是临床应用赛拉嗪用于犬麻醉时应密切关注由于塞拉嗪引起的血糖和甘油三酯含量变化对动物机体的影响,减少麻醉意外的发生。     

泰山马尾松花粉多糖对ALV-J不同接种途径诱导的鸡群免疫抑制的免疫调理作用

分别经口服、点眼、腹腔注射、肌肉注射模拟水平传播感染J亚群禽白血病病毒(ALV-J),同时连续10d口服给予泰山松花粉多糖(TPPPS),分别对各组试验鸡体质量及免疫器官指数、带毒、排毒及抗体、相关免疫学指标进行检测比较。结果显示,饲喂多糖组与接毒组相比,试验鸡体质量及免疫器官指数抑制程度得到改善,血液带毒及泄殖腔排毒量降低,抗体分泌提前、分泌量增加,而IL-2、IL-4细胞因子分泌水平提高,T淋巴细胞转化率、CD4+和CD8+T细胞数增加,其中以腹腔注射和肌肉注射组TPPPS的免疫调理作用最显著,而健康对照组饲喂TPPPS后试验鸡相关免疫指标水平提高。本研究结果表明,TPPPS对健康雏鸡具有一定的免疫增强作用,口服TPPPS对不同水平传播途径感染ALV-J引起的免疫抑制具有免疫调理作用,TPPPS可以作为免疫增强剂用于防控ALV-J的早期水平感染,降低其免疫抑制程度,减少经济损失。     

不同蛋白质水平代乳粉对牦犊牛体重及血清生化指标的影响

为探究西藏地区牦牛代乳粉哺育犊牛的适宜蛋白质水平,本试验以藏区高山牦牛为研究对象,研究不同蛋白水平对哺乳期牦犊牛的体重和血清学指标的影响,以筛选出蛋白质水平最佳的代乳粉。选取40头新生当雄县牦犊牛,随机分为4组(n=10):对照组犊牛随母牦牛哺乳(CON),试验组犊牛分别饲喂蛋白水平为21.95%低蛋白组(LP)、24.28%中蛋白组(MP)和26.11%高蛋白组(HP)3种牦牛代乳品。饲喂时间为犊牛30～90d日龄,期间跟踪测定犊牛体重,并分别在30、60和90d日龄采集血清进行分析。结果表明:饲喂3种代乳粉的犊牛体重均显著高于对照组(P0.001),120d日龄时HP组犊牛体重达到最高值;3种代乳粉对犊牛血清抗氧化指标和免疫指标产生一定的影响,其中HP组谷胱甘肽过氧化物酶活性有高于LP组的趋势(0.05P0.1),且HP组丙二醛含量及肿瘤坏死因子a较其他3组低,而免疫球蛋白(IgG、IgM)及谷胱甘肽过氧化物酶、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶活性均较其他3组高。综合分析显示在西藏地区蛋白水平为26%的牦牛代乳粉饲喂哺乳期牦犊牛的效果较好。     

家畜环境卫生学课程线上教学模式的研究

随着互联网信息技术发展和智能手机的普及,顺应时代发展的需要,线上教学成为未来高校教学活动开展一种必然途径。本文基于学习通和QQ群课堂平台构建了家畜环境卫生学课程的教学设计方案,并详细介绍了教学活动的实施办法,分析了线上教学面临的困难,并提出了相应对策,以期为高等学校线上教学改革提供参考。     

黄芪多糖和丁酸梭菌对蛋雏鸭生长性能、血清生化指标的影响

本试验旨在研究日粮中添加黄芪多糖和丁酸梭菌及其复合剂对蛋雏鸭生长性能和血清生化指标的影响。选取1日龄健康绍兴公鸭600只，随机分为5组，每组6个重复，每个重复20只。Ⅰ组饲喂基础日粮（对照组），Ⅱ~Ⅴ组分别在基础日粮中添加40 mg/kg的杆菌肽锌（抗生素组）、800 mg/kg的黄芪多糖、250 mg/kg丁酸梭菌、800 mg/kg黄芪多糖+250 mg/kg丁酸梭菌复合剂，试验期为28 d。结果显示：①1~14日龄时，各组平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）差异均不显著（P>0.05）。15~21日龄时，与Ⅰ、Ⅱ组相比，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组ADG显著提高（P<0.05）、F/G显著降低（P<0.05）；22~28日龄时，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组ADG显著高于Ⅰ组（P<0.05）；Ⅴ组ADFI显著高于其他组（P<0.05），Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组F/G显著低于Ⅰ、Ⅱ组（P<0.05）。1~28日龄时，与Ⅰ、Ⅱ组相比，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组ADG显著提高（P<0.05）、F/G显著降低（P<0.05）。②试验第28天时，与Ⅰ组相比，Ⅴ组三碘甲状腺原氨酸（T3）含量显著提高（P<0.05）；Ⅲ、Ⅴ组甲状腺素（T4）、生长激素（GH）含量显著提高（P<0.05）；各组间血清皮质醇（CORT）含量无显著差异（P>0.05）；Ⅳ、Ⅴ组白细胞介素-2（IL-2）显著高于Ⅰ、Ⅱ组（P<0.05）。Ⅲ、Ⅴ组干扰素-γ（IFN-γ）显著高于其他组（P<0.05）。综上所述，日粮中添加黄芪多糖和丁酸梭菌可一定程度上提高蛋雏公鸭生长性能，改善血清生化指标，黄芪多糖和丁酸梭菌复合添加效果优于单独添加。