云南烟草靶斑病(Rhizoctonia solani Kühn)病原鉴定及其融合群研究

2016年云南省普洱市和临沧市烟草种植区大面积发生叶部病害,经鉴定为烟草靶斑病(Rhizoctonia solani Kühn),此病为云南烟区首次发现。广泛采集2个市的烟草靶斑病病叶标本59份,采用常规组织分离法获得58个菌株,将所获菌株分别与立枯丝核菌标准融合群菌株AG-1-IA、AG-2-1、AG-3、AG-4-HGⅡ、AG-5、AG-6GV、AG-8和AG-9进行载玻片对峙培养,并进行菌丝融合观察,结果表明:58个菌株均属于立枯丝核菌AG-3标准融合群,且不与其他标准融合群发生融合反应。随机选取云南省6个地区各1个代表性菌株,以待测菌株的基因组DNA为模板,利用真菌核糖体基因转录间隔区(ITS)通用引物ITS1和ITS4对病菌rDNA ITS序列进行PCR扩增,扩增产物序列在Gen Bank中进行BLAST同源性检索比对。应用MEGA 6.06软件和NeighborJoining法,分别计算遗传距离及构建系统发育进化树分析亲缘关系。基于5.8S rDNA-ITS区序列的系统发育树进一步分析,结果表明,Rhizoctonia solani菌株的ITS序列可明显的分为2个支系,同一菌株的不同ITS序列可分别存在不同的分支中,但所有菌株的序列均隶属相同的融合群即AG-3,且隶属相同融合群的不同菌株之间其序列的一致性可高达99%~100%。     

新型农用抗生素TS99效价及室内毒力测定

研究了生物测定法和分光光度法测定农用抗生素TS99效价的可行性,并以烟草赤星病菌和辣椒炭疽病菌为供试菌测定了其室内毒力。结果表明,2种测定方法均适用于农抗TS99发酵液的效价测定,但生物法的测定结果较分光光度法测定值低,对于大规模工业化生产来说,要及时了解生产过程中发酵液的效价变化,宜采用紫外分光光度法。室内毒力测定结果表明,农抗TS99对辣椒炭疽病菌和烟草赤星病菌有良好的抑制作用,其EC50分别为43.68μg/ml和87.84μg/ml。     

不同供Fe水平下受TMV感染的烟草中几种防御酶活性变化

采用烟草栽培品种NC89,利用不同Fe离子浓度处理烟草感染TMV后,对防御酶系活性进行测定,研究不同供Fe水平与烟草感染TMV后防御酶系活性的互作关系。结果表明,烟草幼苗用不同浓度Fe离子处理后,其中1.68 g/LFe处理和感染TMV后的烟草体内,超氧化物歧化酶(SOD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性均迅速升高,酶活性高峰值出现也早,且明显高于其他Fe水平的。     

链霉菌原生质体融合技术研究进展

现在人们已广泛应用链霉菌原生质体融合技术选育改良链霉菌菌株，筛选新农用抗生素品种，提高农用抗生素的效价。对当前原生质体融合的主要方法。助溶剂的种类及助溶机理，重组菌株的主要筛选方法及利用生理生化特点标记菌株等进行了详尽的综述，同时例举了原生质体融合技术在农用抗生素筛选中的具体应用实例。     

不同硫酸钾用量对烤烟氮、钾、硫吸收的影响

采用大田试验研究不同硫酸钾施用量对烤烟干物质及氮、钾、硫等元素吸收的影响。结果表明,与不施肥相比较,施肥显著增加了烤烟干物质积累以及氮、钾、硫元素的积累;在烤烟生长发育进程中,提高硫酸钾施用量并没有明显增加烟叶干质量;氮在烟株中的分配比例为叶＞茎＞根;在团棵期和旺长期,钾和硫在烟株中分配比例为叶＞茎＞根,在成熟期则为茎＞叶＞根;在烤烟生长进程中,硫酸钾施用量对烟根氮、钾、硫的积累量影响不明显,硫酸钾施用量对烟叶氮、钾、硫积累量的影响大于对根和茎;提高硫酸钾用量显著增加了烟叶钾和硫的含量。     

烟草原生质体制备体系的优化及PVY~N导入研究

植物原生质体是除去细胞壁后仍具有活力的裸露单细胞,其在植物RNA病毒的复制机理研究方面具有广泛的应用。为了获得高产、高活力的烟草原生质体,以烟草(Nicotiana tabacum Linn.)品种K326为材料,对原生质体制备体系中的不同细胞壁酶解液成分、酶解时间、酶解渗透压稳定剂含量、离心时间以及离心转速等因素进行优化。结果表明:在含1%纤维素酶,0.5%离析酶,0.6mol·L-1甘露醇的酶解液中,26℃慢速震荡(40r·min-1)酶解4h,700r·min-1离心3min,得到产量及活力较高的原生质体,可直接用于植物病毒的接种试验;利用聚乙二醇(PEG)融合法向获得的高活力原生质体中接种马铃薯Y病毒N株系(Potato virus Y necrosis strain,PVYN),经培养后提取总RNA,通过PVYN特异性引物经RT-PCR扩增后检测条带明显,表明PVYN成功导入烟草原生质体并自我复制。     

黄瓜绿斑驳花叶病毒对西瓜产量、品质及种子带毒的影响

研究了西瓜不同时期接种黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)后对其生长、产量、品质和种子带毒的影响。西瓜植株接种CGMMV越早其生长受到抑制越明显,砧木期、嫁接后定植前、定植期、压蔓期、授粉期各处理的株高、叶片数、叶片长与对照相比差异极显著(p0.01),而结瓜以后接种CGMMV对西瓜生长状况无显著影响。压蔓期前3个生育期接种该病毒,西瓜产量损失分别为56.49%、55.48%和51.14%。而压蔓期以后接种该病毒,西瓜产量损失与对照相比仍分别降低17%、13.1%和14.35%。关于倒瓤情况,压蔓期前接种该病毒可导致西瓜果实100%倒瓤,压蔓期、授粉期接种处理西瓜倒瓤率分别为48%和34%,即使结瓜后再接种病毒西瓜倒瓤率仍高达18%。血清学检测表明,压蔓期前接种的西瓜其果肉和种子均携带CGM-MV,带毒率达100%;结瓜后再接种CGMMV西瓜种胚和果肉的带毒率仍然高达64%。检测种胚和果肉病毒含量表明,接种时期越早病毒含量越高,但结瓜后接种仍有较高的病毒含量,种胚和果肉的病毒含量分别达5.98 mg/mL和5.64 mg/mL。     

辽宁省常见花卉病毒病调查研究初报

随着人民生活的逐步提高及国际交往迅速开展,花卉显得十分重要.它对美化环境,装点会场和居室,增加喜庆气氛和增进交谊均起到较大作用.然而,近年花卉栽培虽大有进展,但随之而来的花卉病害,特别是病毒病害,因国内交流和国外引种,通过种、苗等带病毒,显然已在扩大蔓延.由于植物病毒知识并未普及,以致大部分发病区或田地,并未引起人们重视.本文将1987～1988年在辽宁省及沈阳市有关花卉田间调查及部分室内诊断、鉴定情况作一初报.     

农用抗生素TS99产生菌YH9407的初步研究

从辽宁省丹东地区的土壤样品中分离到一株新的杀真菌链霉菌YH9407,其产生的次级代谢产物对多种植物病原真菌和细菌有较强的抑制作用。该菌株在各种合成培养基上生长良好 ,气生菌丝和孢子堆为灰白色 ,基内菌丝一般为浅黄色 ,有的可产生黄色可溶性色素 ;孢子丝柔曲或直立 ,直径为0.17～0.22μm,孢子呈球形或卵圆形 ,直径为(0.6～0.8)μm×(0.8～1.2)μm ;通过与杀真菌链霉菌已知种在形态特征、培养特征和生理生化特性方面的比较 ,YH9407为杀真菌链霉菌的一个新菌株 ,暂命名为StreptomycesfungicidicusNo.9407