槐花中芦丁的正交提取工艺及抗氧化活性研究

以芦丁的紫外最大吸收波长510nm为指标,进行正交试验设计,筛选出从槐花中提取芦丁的最佳工艺参数,将芦丁用超氧负离子自由基清除法进行抗氧化活性试验。结果表明,醇提法提取工艺最为理想,其工艺参数为:乙醇浓度80%、乙醇用量100mL、振荡温度45℃,该工艺提取出的芦丁含量最高可达11.6%;芦丁对超氧负离子自由基O2-·的清除作用呈量效关系,清除作用的IC50值为:0.0305g/L,存在显著性差异(t=2.93,P<0.05)。     

变黄环境对烤烟中部叶芸香甙含量变化规律的影响

试验采用206最优回归设计方案,研究了不同烘烤变黄温度和相对湿度对烤烟中部叶芸香甙含量的变化规律。结果表明,在试验温度和相对湿度范围内,随着温度的升高,芸香甙含量呈现先降后升的趋势,相对湿度对芸香甙的影响则与温度相反,中温及高湿有利于芸香甙含量的增加。     

苦荞麦中芦丁提取及体外抑菌活性研究

采用乙醇回流法提取苦荞麦中的芦丁,并进行TLC检测、紫外光谱和红外光谱检测。将芦丁对两种供试菌进行体外最小抑制浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)、半数抑菌浓度(IC50)测定。结果表明,其对大肠埃希氏杆菌、金黄色葡萄球菌的MIC分别为0.40mg/mL和0.20mg/mL;MBC分别为0.50mg/mL和0.20mg/mL;IC50分别为0.2605mg/mL和0.1607mg/mL。     

高效毛细管电泳法测定加杨叶芦丁含量的动态变化

建立了加杨叶中芦丁含量测定的高效毛细管电泳方法。用甲醇溶解样品采用超声提取,研究了缓冲溶液浓度、pH值、电压、温度及进样时间等因素对分离检测的影响;确定了最佳的测定条件:50mmol/L硼酸盐缓冲溶液(pH值为9.3),压力进样时间为5s,温度为25℃,运行电压为20kV,检测波长为254nm。在此条件下,峰面积与芦丁浓度具有良好的线性关系,平均回收率达到98.58%,方法准确。同时,利用建立的方法研究了加杨叶生长过程中芦丁含量的变化。     

苦荞全生育期芦丁积累与其生物合成途径相关基因表达分析

【目的】探究苦荞全生育期芦丁含量变化与其合成途径关键酶基因和调控因子MYB基因表达量之间的相关性,以期进一步明确苦荞植株体内芦丁生物合成的分子机制。【方法】以九江苦荞为试验材料,整个生育期分别在萌发期、子叶期、真叶期、盛叶期、现蕾期、盛花期、灌浆期和籽粒成熟期共8个时期取材(S1—S8)。采用RT-PCR方法,克隆获得与黄酮类代谢相关的MYB类转录因子基因。采用T-coffee软件进行氨基酸同源序列比对及保守结构域分析。与拟南芥黄酮类代谢相关的MYB转录因子及荞麦同源MYB转录因子序列比对,基于邻近法构建系统进化树;实时荧光定量PCR技术分析芦丁合成途径中5个关键酶Ft CHS、Ft F3H、Ft4CL、Ft FLS-like和Ft UFGT及上述克隆到的MYB转录因子在不同组织中的表达模式。基于高效液相色谱法(HPLC)测定全生育期取材组织的芦丁含量。同时采用相关性分析方法分析不同组织中芦丁含量变化与基因表达模式的相关性。转换上述数据为矩阵,采用欧式距离法构建共表达层次聚类图谱。【结果】克隆到2个MYB类转录因子,即Ft MYB7和Ft MYB9,其核酸序列长度分别为876和912 bp,分别编码291和303个氨基酸残基。氨基酸序列同源性比对分析结果表明,二者均具有典型的R2R3保守结构域,为R2R3类型的MYB转录因子。结合Nr数据库中17个苦荞和3个拟南芥黄酮类代谢相关MYB转录因子同源氨基酸序列构建系统进化树,结果表明这22个基因分成6大类群,其中Ft MYB7属于第II类群,Ft MYB9属于第IV类群,二者分属于不同类群,暗示这2个MYB转录因子可能涉及调控植物生长发育过程中不同功能类型。荧光定量结果显示,Ft MYB7在S3(真叶期)和S5(现蕾期)基因相对表达量最高,达到501和867倍;Ft MYB9在S1(萌发期)和S2(子叶期)相对表达量最高,分别为34和72倍。上述基因表达量与芦丁含量变化模式相关性分析表明,8个生长时期中,Ft4CL、Ft CHS、Ft F3H、Ft UFGT和Ft MYB7相对表达模式与芦丁含量变化幅度呈正相关,其相关系数分别为0.748、0.683、0.704、0.890和0.862。而Ft FLS-like和Ft MYB9与芦丁含量的变化幅度呈负相关,其相关系数分别为-0.442和-0.501。【结论】Ft MYB7和Ft MYB9转录因子在整个生育时期中表达模式存在明显差异。其中Ft MYB7可能在苦荞芦丁积累的过程中起到正调控作用,而Ft MYB9则为负调控作用。     

不同产区烤烟中主要潜香型物质对评吸质量的影响研究

以中国不同烤烟产区C3F烟叶为材料,对烤烟叶中类胡萝卜素及其降解形成的中性香气物和多酚类化合物绿原酸、芸香苷等潜香型物质进行了分析比较．结果表明：各烤烟产区烟叶中上述潜香型物质的含量存在较大差异．烤烟在类胡萝卜素和绿原酸、芸香苷含量较高时,其香气质和香气量也较高．当烤烟中新植二烯和类胡萝卜素降解物各组分之间的含量协调平衡时,烤烟在抽吸时具有较高的香气质和香气量得分．     

银杏叶中芦丁含量快速定量数学模型的建立

利用傅里叶变换近红外透射光谱收集了19批不同产地银杏叶样品的近红外光谱图,运用OPUS 6.5分析软件对其进行一阶导数和多元散射校正预处理。在7 500~6 099 cm-1和5 450~4 249 cm-1范围内,因子数选择7,采用偏最小二乘法(PLS)对芦丁的含量进行了快速定量测定,根据超高效液相色谱-串联质谱测定的芦丁含量结果,建立了银杏叶中芦丁含量的定量数学模型。近红外模型预测结果与色谱检测结果相吻合,模型均方差为0.194,预测集的平均回收率为98.40%。本方法快速、简便,可应用于银杏叶药材的质量控制和大批量产品的检测。     

添加5种植物酚类化合物对高精料底物瘤胃体外发酵及产甲烷的影响

甲烷排放是全球变暖和气候变化的主要影响因素之一,而瘤胃微生物发酵会排放大量甲烷,因此减少反刍动物排放甲烷已引起广泛关注。本试验旨在采用人工瘤胃体外发酵技术,研究在精粗比为65∶35的条件下,添加不同浓度(0、0.05%、0.10%、0.20%)的单宁酸、对羟基苯甲酸、鞣花酸、丁香酸及芦丁对瘤胃体外发酵参数及甲烷产量的影响。结果表明,与空白对照相比,在体外条件下,添加0.05%及以上的单宁显著降低NH₃-N水平(P<0.05),添加0.20%的单宁显著降低发酵终点pH(P<0.05),并显著提高48 h累积产气量和乙丙比(P<0.05)。添加0.10%及以上浓度的对羟基苯甲酸可显著降低NH₃-N和乙酸浓度并提高累积产气量(P<0.05);除乙酸外,对挥发性脂肪酸的产生无显著影响(P>0.05)。添加鞣花酸后显著降低CH₄产生和乙丙比(P<0.05);当添加水平达到0.10%后TVFA(总挥发性脂肪酸)显著下降(P<0.05),达到0.20%后pH和NH₃-N显著下降(P<0.05)。添加丁香酸后NH₃-N和累积产气量显著下降(P<0.05);当添加水平达到0.10%后,CH₄和TVFA显著增加(P<0.05)。添加芦丁显著降低NH₃-N并增加TVFA(P<0.05),当添加水平达到0.10%时,乙丙比显著下降(P<0.05);达到0.20%时pH下降而累积产气量显著增加(P<0.05)。由此可见,添加一定水平的酚酸和芦丁能降低NH₃-N浓度,增加产气量;丁香酸和芦丁可增加TVFA水平,而鞣花酸降低TVFA水平;仅鞣花酸能抑制甲烷产生,而丁香酸促进甲烷的产生。     

Dietary rutin has limited synergistic effects on vitamin C nutrition of fingerling channel catfish (Ictalurus punctatus)

A study was conducted to determine the possible synergistic effects between dietary rutin (a bioflavonoid) and vitamin C, and to evaluate their antioxidant effects in fingerling channel catfish. Purified casein/gelatin diets containing two levels of rutin (0 and 1000 mg/kg diet) and three levels of L-ascorbic acid (0, 1500 and 3000 mg/kg diet) in a factorial arrangement were fed to fingerling channel catfish for 16 weeks. Fish fed the diets without supplemental vitamin C showed deformed spinal columns, external hemorrhages and fin erosion after 10 to 12 weeks. Also these fish had significantly (p < 0.05) depressed body weight gain, feed efficiency, hematocrit, hepatosomatic index (% liver weight), as well as reduced liver, fillet and plasma vitamin concentrations after 16 weeks. Liver, fillet and plasma vitamin C concentrations were correlated with dietary vitamin C levels. Forced oxidation of fillet samples significantly (p < 0.05) increased 2-thiobarbituric acid (TBA) values of fillets from fish fed diets without vitamin C and rutin. However, results from the present study indicated only limited synergistic effects of dietary rutin on vitamin C nutrition of channel catfish.     

HPLC法测定拟南芥中总黄酮含量的研究

为更好地开发和利用拟南芥中总黄酮及相关副产品,研究了检测拟南芥中总黄酮含量的方法。结果表明:以芦丁为标准品,建立了检测拟南芥中总黄酮含量的HPLC法。HPLC法色谱条件:C18色谱柱、35℃柱温、256nm检测波长、35%甲醇∶65%水(含0.4%磷酸)流动相、10μL进样量及10mL·min-1流速。标准品芦丁在该色谱条件下,峰型良好,在0.05~1.60 mg·mL-1时峰面积与质量浓度间呈良好线性关系,R2=0.999 7,平均加样回收率为99.90%,RSD小于3%(n=6),该方法适用于拟南芥中总黄酮的检测。