高效毛细管电泳法研究重瓣榆叶梅花中蛋白质的动态变化

为验证毛细管电泳方法,研究测定重瓣榆叶梅花朵生长过程中的DNA酶、RNA酶和细胞色素C含量及动态变化的有效性,以磷酸氢二钠溶液为提取液,超声提取重瓣榆叶梅花朵中的蛋白质作为待测液,考察缓冲溶液种类、浓度、pH、分离电压、分离温度及进样时间等因素对HPCE分离检测蛋白质的影响。确定了HPCE最佳测定条件为:运行缓冲液为pH为2.5、浓度为30mmol/L的磷酸氢二钠溶液,0.5MPa压力进样5s,分离电压为8kV,电泳温度为25℃,检测波长为254nm。在最佳条件下,样品可在20min内完全分离,线性关系良好。该方法准确、快速、简便,可同时检测样品中的DNA酶、RNA酶和细胞色素C。     

毛细管电泳 电化学发光测定苯磺酸顺阿曲库铵

基于苯磺酸顺阿曲库铵对三联吡啶钌电化学发光信号的增敏作用,建立了检测苯磺酸顺阿曲库铵的毛细管 电泳电致电化学发光新方法.最佳实验条件为:检测电位1.30V,三联吡啶钌浓度5mmol/L,检测池磷酸缓冲溶 液浓度65mmol/L(pH=8.5),运行缓冲溶液100mmol/LTris-HCl(pH=8.5),进样电压16kV,进样时间30s, 分离电压17kV.方法的检测限为0.45μg/mL,线性范围为4.5~150μg/mL,相关系数为0.9987,回收率为 86.8%~96.9%.本方法简便、快速、灵敏、进样量少,可用于苯磺酸顺阿曲库铵注射液含量测定.     

利用高效毛细管电泳测定真菌代谢产物吲哚乙酸含量

建立真菌代谢产物吲哚乙酸的高效毛细管电泳检测方法,具体探讨缓冲溶液的种类、浓度、酸碱度,检测波长、有机添加剂及操作电压、进样时间等因素对检测结果的影响.结果表明,以Na<,2>B<,4>O<,7>-NaH<,2>PO<,4>(Na<,2>B<,4>O<,7>浓度为20 mmol/L)为缓冲液,在进样时间20 s、检测波长200 nm、分离高压30 kV、pH值9.0的碱性条件下可以检测吲哚乙酸含量,检测的线性范围为0.1～50.0 mg/mL,回归方程为y=11460x-1226,相关系数r为0.99992,检出限为0.15 μg/mL.     

草莓中几种水溶性维生素的毛细管电泳测定

[目的]建立高效毛细管电泳同时分离和检测草莓中6种水溶性维生素的方法。[方法]采用高效毛细管电泳方法分离和测定维生素B1、B2、B6、C、PP和叶酸含量,同时研究了缓冲液pH值、电压、检测波长等对测定结果的影响。[结果]实现了6种水溶性维生素的同时分离,回收率为89.9%～97.8%。在柱温20℃,电压20kV,磷酸硼砂缓冲液pH值8.6,进样时间5s,检测波长265nm时,检测效果最好。[结论]建立了毛细管电泳同时测定草莓中6种水溶性维生素含量的方法,并为其他水果维生素的测定提供了依据。     

使用超声萃取和毛细管电泳技术检测牛奶中的三聚氰胺方法的介绍

采用超声萃取前处理方法和毛细管电泳技术检测牛奶中的三聚氰胺。样品制备:采用了超声萃取的样品前处理方法,并摸索了毛细管电泳的分离条件、缓冲溶液pH值、缓冲溶液离子强度、进样时间和电泳电压。结果:通过定量分析,标准曲线的相关系数为0.9994,到方法检出限为0.163 mg/kg。证明该方法具有简单快速、成本低廉等优点,可以准确的检测牛奶中的三聚氰胺。     

酪蛋白磷酸肽的制备及其性质

采用胰蛋白酶水解牛乳酪蛋白 ,可释放出能促进钙吸收的物质酪蛋白磷酸肽 (CPPs)。研究了胰蛋白酶水解牛乳酪蛋白的条件对CPPs得率的影响 ,并采用大孔强碱性阴离子交换树脂对CPPs进行纯化 ,分析了洗脱条件对纯化效果的影响。结果表明 :水解温度、水解时间、pH值、底物浓度都对CPPs得率有明显的影响。其中水解温度对CPPs得率的影响最大 ,其次是水解时间、pH值 ,再次是底物浓度。最佳的水解条件为 :底物浓度 5 % ,pH值 7.5 ,水解时间 2 .5h ,水解温度 60℃ ,加酶量 13 .16U/g。最佳的洗脱条件为 :进样浓度 5 % ,进样量 10g ,进样速度 1d/s ,洗脱速度为 1.5d/2s,进样pH值 5 .5 ,洗脱液为浓度 0 .2mol/LHCl。在最佳条件下每 10 0g酪蛋白可制得 18.8gCPPs ,其r(N/P)为 5 .67。     

高效毛细管电泳法测定鸡蛋中环丙沙星的研究

[目的]建立高效毛细管电泳测定鸡蛋中环丙沙星含量的方法。[方法]通过对电泳缓冲液类型、离子浓度和pH值、样品溶剂种类、分离电压、分离温度和冲洗程序等电泳条件进行考察,确立测定鸡蛋中环丙沙星的高效毛细管电泳法,并测定电泳参数对检测结果的影响。[结果]在检测波长为277 nm时,最佳电泳条件为:电泳缓冲液为30 mmol/LNa2B4O7-10 mmol/LKH2PO4溶液(pH值8.53),未涂层石英毛细管(50μm×47 cm,有效长度38.5 cm)为分离通道,分离电压为18 kV。在鸡蛋中对环丙沙星的检测结果显示,在最佳电泳条件下,环丙沙星在11 min内实现基线分离,在0.25～80.00μg/ml浓度范围内其浓度和峰面积呈良好的线性关系(R2=0.999 2),平均加标回收率为101.48%,平均RSD为2.466 4%(n=5)。[结论]该方法快速简便、灵敏度高、重现性好,可用于鸡蛋中环丙沙星含量的测定。     

DNS法检测食用菌多糖含量条件优化研究

DNS法为食用菌多糖含量测定的常用方法,该法具有经济、操作简便、反应灵敏且干扰少等优点.试验以葡萄糖为显色底物,优化了DNS法的检测波长、显色温度、显色时间、pH值等测定条件.试验结果表明:DNS法检测食用菌多糖含量的最佳检测波长为520 nm,最适反应温度为90℃,最佳反应时间为6 min,最适pH值为6～7,适宜检测的糖浓度范围为≤0.16 mg/mL;试验研究了其他糖类对多糖含量测定的影响,结果表明其他糖类对DNS法检测多糖含量结果影响很大,在本试验研究的3种糖中,以麦芽糖干扰最大.本试验结果为食用菌多糖的含量测定及开发利用提供了科学的参数.     

毛细管区带电泳法研究杜仲叶中绿原酸含量的变化规律

以豫西南地区不同生长期杜仲叶为研究对象,建立了一种快速、简便、重现性好的毛细管区带电泳(capillary zone electrophoresis,CZE)方法测定杜仲叶中绿原酸的含量。毛细管区带电泳条件如下:运行缓冲液为20 mmol/L硼砂体系(pH值8.5),压力进样6 s,分离电压为20 kV,紫外检测波长为328 nm。该方法在0.03~0.15 mg/mL范围内线性良好,样品的回收率为98.74%~100.15%,RSD为1.5%(n=6)。不同采摘时间杜仲叶中绿原酸含量差异显著,其中6月份含量最高。     

水中高锰酸盐指数测定的连续流动分析法

[目的]建立水中高锰酸盐指数测定的连续流动分析法.[方法]在波长520 nm,电压220V,进样时间60s,清洗时间80s,空气0s,反应温度95℃的仪器条件下,对高锰酸盐指数标准系列进行测定,绘制标准曲线;按照同样试验步骤,计算方法检出限及平均加标回收率.[结果]建立了饮用水中高锰酸盐指数测定的连续流动分析法,方法的相关系数为0.999,最低检出浓度为0.063 mg/L,平均加标回收率为100.8％.[结论]该研究建立的方法精密度高,适用于水中高锰酸盐指数的测定.     

高效毛细管电泳法用于猪尿中莱克多巴胺含量的测定

建立了高效毛细管电泳测定猪尿中莱克多巴胺残留量的方法。通过对缓冲体系的种类、浓度、酸度、分离时间、分离电压及进样时间等条件对分离影响的研究，明确了电泳分析的最佳条件。在214nm波长处，分离电压为15kV，进样时间为20s，分离时间为12min，80mmol／L的醋酸-醋酸钠（pH5．04）运行缓冲液下，莱克多巴胺得到完全分离。莱克多巴胺质量浓度与电泳峰面积在0．05—100．00μg/mL范围内呈现良好的线性，相关系数为0．9961，最低检测限为0．05μg/mL，添加回收率为82．0％～94．3％。     

玉米中β-D-葡萄糖苷酶活性测定条件的研究

为了研究玉米植株中β-D-葡萄糖苷酶测定的最佳条件,建立快速准确的β-D-葡萄糖苷酶活性的检测方法。本试验以玉米品种泰玉11号为研究材料,研究了以对硝基苯-β-D-葡萄糖苷(pNPG)为底物,分光光度比色法测定玉米叶中β-D-葡萄糖苷酶活性的反应条件(包括缓冲液pH值、底物浓度、测定波长、反应温度和时间)。结果表明,当反应温度为40℃、反应时间为40 min、缓冲液pH值4.8、反应底物pNPG的浓度为10 mmol·L~(-1)、测定波长为402 nm时,β-D-葡萄糖苷酶的活力最大。     

荧光法测定有机磷农药残留总量的条件优化研究

[目的]为农药污染的治理提供有价值的参考和依据。[方法]在pH值6.40的Clark-Lubs缓冲溶液中,加入碱性藏花红(ST)与一定浓度的十二烷基苯磺酸钠(SDBS),测定荧光强度,再加入有机磷农药,检测荧光强度变化,据此建立测定有机磷农药残留总量的新方法。[结果]有机磷农药残留总量荧光法测定的优化条件为:在室温下,以ST+SDBS为反应体系,ST浓度为5.0×10-6mol/L,SDBS浓度为9.0×10-4mol/L,缓冲溶液pH值为6.40,缓冲溶液用量为1.0 ml,溶液中甲醇的用量控制在10%以内。[结论]试验所建立的测定方法已成功用于土壤中有机磷农药残留总量的检测。     

大青枣叶中黄酮的提取及其含量的伏安法测定

[目的]研究大青枣叶中黄酮提取与测定的最佳方法。[方法]以新鲜的大青枣叶片为材料,用乙醇提取其中的黄酮,研究乙醇浓度、提取时间和提取温度对黄酮提取量的影响;用芦丁标准溶液绘制微分脉冲伏安曲线后,在磷酸盐缓冲液中,用微分脉冲伏安法测定提取液中的黄酮含量。[结果]当乙醇浓度为70%、提取温度为80℃、提取时间为4 h时,黄酮提取量最高;微分脉冲伏安法测定黄酮含量具有操作简单、灵敏度好、检出限高等特点。当磷酸盐溶液的pH值为4.5时,黄酮的检出限为3.0×10-7mol/L。[结论]大青枣叶中黄酮提取的最佳条件为:用70%乙醇在80℃条件下提取4 h。微分脉冲伏安法对黄酮含量的检测效果较好。     

不同枫树叶片中酚酸类物质高效毛细管电泳检测方法的研究

采用正交试验的方法,研究了缓冲液pH、分离电压、运行温度等电泳参数对枫树叶片中酚酸类物质提取检测的影响,建立了4种槭树科枫叶中绿原酸、原儿茶酸、没食子酸和咖啡酸4种酚酸类化合物检测分离的高效毛细管电泳(HPCE)方法。得出了最佳分离条件为:紫外检测波长214 nm,缓冲液为20 mmol·L-1的磷酸-硼砂,pH 8.0,电压为22 kV,温度25℃。在此条件下,4种酚酸类化合物在9 min内完全分离,且各组分浓度与峰面积呈良好的线性关系,r2为0.974 8～0.996 5。迁移时间的RSD≤0.84%,峰面积的RSD≤5.29%,加标回收率为80.38%～96.88%。4种枫树叶片中均含有绿原酸,其中蚜虫宿主三角枫中绿原酸含量最低。     

固定化菊粉酶酶解菊芋提取液制备果糖的研究

[目的]研究固定化菊粉酶酶解菊芋提取液制备果糖的适宜反应条件。[方法]以菊芋提取液为原料,以固定化菊粉酶酶法制备果糖,采用蒽酮比色法测定总糖含量,采用3,5-二硝基水杨酸法测定果糖含量,研究了底物浓度、反应温度、pH值、加酶量对果糖制备的影响。[结果]底物浓度、反应温度、pH值、加酶量对果糖制备均有显著影响。固定化菊粉酶酶解菊芋提取液制备果糖的适宜反应条件为:底物浓度10%(W/V),反应温度60℃,pH值5.0,加酶量3.0U/g菊糖。在适宜条件下反应12h,底物降解率为98.2%,果糖占总糖的87.6%,总转化率高。[结论]固定化菊粉酶既保持了游离酶的活性,又具有固定酶的功效,具有实用价值。     

高三尖杉酯碱注射液含量的毛细管电泳法测定

建立了高三尖杉酯碱注射液中高三尖杉酯碱含量测定的高效毛细管电泳法。磷酸二氢钠-硼砂为电泳介质,乙醇为有机添加剂,在20kV高压,pH6.98的条件下检测了高三尖杉酯碱注射液中高三尖杉酯碱含量。在最佳的试验条件下,高三尖杉酯碱标准品峰面积（y）与质量浓度（p）之间呈现良好的线性关系,该法的线性范围为0.005-0.080mg.L^-1。着重探讨了缓冲溶液浓度、种类、酸碱度及其操作电压对检测的影响,结果表明毛细管电泳法测定高三尖杉酯碱注射液的含量,不仅操作简单、准确,而且重复性好。     

pH示差法测定黑米发酵饮料中花色苷的含量

为建立和优化适合黑米发酵饮料中花色苷含量测定的方法,利用pH示差法测定黑米发酵饮料中花色苷的含量。结果表明:测定波长为510nm,测定吸光度时的pH为1.0和4.5,平衡温度为30℃,pH 1.0缓冲溶液中平衡70min,pH 4.5缓冲溶液平衡时间为30min,pH示差法测定出黑米发酵饮料中花色苷含量为119.6mg·L~(-1)。该方法操作简单、方便,可以用于黑米发酵饮料中花色苷的定量分析。     

罗汉果蛋白酶对酒糟中蛋白质的水解作用研究

[目的]为酒糟中蛋白质的水解提供新方法。[方法]采用酶解法,用罗汉果蛋白酶提取酒糟中的蛋白质,测定酶解酒糟上清液中蛋白质的含量,计算单位体积蛋白质增量。在加酶量、酶解温度、酶解时间、pH值单因子试验的基础上,采用正交试验确定酒糟中蛋白质的最佳提取条件。[结果]各因素对单位体积蛋白质增量的影响依次为:pH值>水解时间>加酶量>水解温度。酶解酒糟的最佳条件为:pH值8.0,水解时间10 min,加酶量0.75 ml/100 g湿酒糟,温度65℃。在最佳条件下,单位体积蛋白质增量可达98.78%。[结论]该研究确定了酶解法提取酒糟中蛋白质的最优条件,使酶解上清液中蛋白质含量增加了近1倍。     

红叶杨红色素提取工艺研究

[目的]探讨影响色素得率的因素和工艺条件。[方法]以红叶杨新鲜叶片作为原料,研究了4种浸提剂(水、乙醇、石油醚和丙酮)、5种乙醇溶液浓度(15%~100%)、不同波长,浸提温度、料液比和pH值对红叶杨色素提取效果的影响。采用4因素3水平正交试验,确定了红叶杨色素提取的最佳条件组合。[结果]单因素试验表明,最佳浸提剂、乙醇溶液浓度、吸收波长、浸提温度、料液比和浸提pH值分别为乙醇、75%4、50 nm、70℃1、∶75和1;正交试验表明,提取红叶杨色素的最佳条件为:提取温度80℃、提取时间0.5 h、料液比1∶100、75%乙醇浸提剂和浸提pH值为1。[结论]该研究为红叶杨色素的进一步开发利用提供了参考数据。