鸡白痢沙门氏菌病原的分离鉴定及耐药性分析

为鉴定新疆某些地区鸡白痢沙门氏菌主要流行株的流行现状和耐药情况,本研究采用平板凝集试验方法对有发病史的种鸡场进行现场检测,被检的750只鸡中,发现78例疑似鸡白痢沙门氏菌感染,运用沙门氏菌鉴别培养基、组织病理学观察和PCR方法进行确诊,并进行药敏试验。结果显示,疑似的78例鸡白痢沙门氏菌中有69例符合鸡白痢沙门氏菌的生化特性和病理学特点,PCR成功扩增出invA基因,分离率为9.2%,血清型诊断为D1型;其中分离菌对万古霉素和新霉素耐药性最高,耐药率分别为100.0%和81.2%,而对头孢曲松、克拉维酸和多黏菌素的敏感率达60.0%以上。本研究为养殖户和兽医工作者在净化鸡白痢沙门氏菌及临床用药方面提供参考。     

小鼠IL-10基因的克隆及其原核表达

从ConA活化的昆明小鼠脾细胞中提取总RNA,利用RT-PCR方法扩增得到小鼠的IL-10基因.编码序列经测序验证后,将其克隆入表达载体pET-28a,构建IL-10基因的重组原核表达载体,在大肠杆菌(DE3)中诱导表达目的蛋白.SDS-PAGE结果表明,该表达产物的分子量与预期值相符,Western blot结果说明小鼠IL-10基因得到了表达.     

布鲁氏菌omp25基因真核表达载体的构建与分析

摘 要: 【目的】 构建表达流产布鲁氏菌外膜蛋白基因omp25的酿酒酵母表达菌并进行验证。 【方法】 对流产布鲁氏菌疫苗株S19外膜蛋白基因omp25设计特异引物进行PCR扩增,连接到pGM-T载体上,获得pGM-T-omp25,进行PCR扩增、酶切、测序鉴定。将质粒pGM-T-omp25与pGBKT7载体进行EcoRⅠ/SalⅠ双酶切,回收DNA片段,并进行连接,构建pGBKT7-omp25后,转化酿酒酵母菌Y187,并进行PCR鉴定、自激活实验和毒性检测。 【结果】 克隆了流产布鲁氏菌外膜蛋白基因omp25,PCR、酶切、测序表明成功构建了pGBKT7-omp25真核表达载体,获得的转化子酵母Y187菌株无自激活活性,无毒性。 【结论】 成功构建了表达流产布鲁氏菌外膜蛋白基因omp25的酿酒酵母表达菌,为揭示流产布鲁氏菌感染与母畜流产间的分子机制奠定基础。关键词：流产布鲁氏菌;基因omp25;酿酒酵母Y187;真核表达     

猪瘟基因疫苗在小鼠肌肉中的动态分布表达

本研究应用原位杂交法、免疫组化、PCR法对肌肉注射猪瘟基因疫苗pcDST、pcDSW后小鼠胫前肌中质粒存在的方式、部位及时间进行了动态观察，结果表明猪 病毒基因疫苗注射3h后质粒就到达细胞核，至20d在细胞核内仍呈阳性反应；pcDST质粒在肌肉内存在120d，pcDSW质粒在肌肉存在150d;pcDST质粒肌肉注射后第3d，pcDSW质粒肌肉注射后第5d，在胫前肌肌肉中可检测到表达产物，持续表达20d以上。表明构建的猪瘟基因疫苗经肌肉注射是较好的免疫途径。     

猪瘟和猪霉形体肺炎等多种流行病混合感染的诊断与防治

1994年3月底,A市某单位从四川省购入断乳仔猪2557头,4月16日开始发病至6月 5日共死亡猪834头,死亡率32.6％。其间虽经诊断、治疗,但始终未能制止死亡。6月6日畜主要求我们协助诊疗,现将诊治情况报告如下: 1 发病情况 该单位于94年3月下旬从四川省永川县和云昌县农贸市场购入长白杂种20公斤左右断乳仔楮2557只,购买时货主曾出示当地猪瘟防注证明。但据说有的货主害怕防注后有反应不易出售而买证明下注射者。该单位购入仔堵后即用汽车跋山涉水昼夜不停地在五日内运行四千多公里于四月初运抵A市该单位猪场。 该猪场位于A市市郊,附近无养猪单位,猪舍分全封闭与半封闭式二种,均为水泥地面、砖木结构。猪运到后分二处饲养,北场养1649只,南场养908只。所有猪均每日早、晚各喂一顿配合饲料,中午喂一顿青绿饲料。早上喂料后打扫圈舍,扫圈后用水冲洗地面时可见猪抢饮冲地面的污水。到半上午向饲槽内加水供猪饮用。     

二狼山白山羊遗传性甲状腺肿发病机理及诊断研究——Ⅲ.甲状腺功能测定

本实验对内蒙古二狼山白山羊遗传性甲状腺肿(Inherited goitre,IHG)杂合子羊进行了甲状腺吸~(131)碘率测定;对IHG纯合子羊和杂合子羊进行了血清总T_3(TT_3)、总T_4(TT_4)、反T_3(rT_3)、游离甲状腺激素指数(FTI)以及促甲状腺激素(TSH)等甲状腺功能参数测定.结果表明,IHG杂合子羊的甲状腺吸~(131)碘率及吸~(131)碘速率降低(P<0.01);IHG纯合子羊和杂合子羊的血清TT_3、TT_4、FT_3I及FT_4I均显著降低(P<0.05或P<0.01),而TSH显著升高(P<0.01).据此认为,这些甲状腺功能参数(特别是TT_3和FT_3I)的改变,是山羊IHG的生化表型特征,可用于IHG基因群体中杂合子携带羊的检出.     

实验性禽巴氏杆菌病细菌在体内分布观察

禽巴氏杆菌病是禽类养殖业危害较大的传染病之一.自发现该病一百多年来,各国兽医科技工作者对该病的病原学、菌苗研制、免疫机制的探讨作了大量的工作.本实验通过人工感染巴氏杆菌后,应用免疫酶染色对体内各组织器官中的细菌分布及定位进行观察,为本病预防和治疗提供依据.1 材料和方法1.1 材料1.1.1 动物 选用禽霍乱平板凝集阴性鸡26羽饲养1个月后无异常分组实验1.1.2 细菌 C48—1强毒株(购自中监所),改良马丁琼脂24小时培养3～5个菌能致死2月龄以上的试验鸡.在马丁琼脂平板上,菌落光滑致密.在瑞氏在染色涂片中,见大小不一呈两极着色的卵园形或短杆状细菌.血琼脂斜面上保存菌种,每半月移植一次,4℃冰箱保存备用使用期不超过2个月,正式攻毒用细菌经马丁肉汤培养,鸡体复状,分离培养.     

隐性乳房炎患牛乳汁pH值变化与体细胞数关系的研究

采集奶牛乳样604份, 测定乳汁pH值与体细胞的含量, 确定奶牛隐性乳房炎与牛乳pH值的变化关系。结果表明, 牛乳pH值的变化与体细胞的含量呈正相关。正常乳汁的pH值在6 4~6 6之间; 体细胞在20万~50万/mL区间时, 奶牛乳汁pH值在6 6~6 8之间; 体细胞在50~150万/mL区间时, 奶牛乳汁pH值在6 8~7 0之间; 体细胞在150万~500万/mL区间时, 奶牛乳汁pH值在7 0~7 2之间; 体细胞大于500万/mL时, 奶牛乳汁pH值在7 2以上。     

患隐性乳房炎的奶牛乳汁pH值变化与体细胞关系的研究

采集新疆垦区奶牛乳样604份,利用奶牛隐性乳房炎诊断液、光学显微镜以及pH211酸度计测定乳汁的pH值与体细胞的含量,确定奶牛隐性乳房炎与牛乳pH值的变化关系。结果表明,牛乳pH值的变化与体细胞和炎性细胞的含量呈正相关,即泌乳奶牛乳汁的正常pH值在6.4～6.6之间;体细胞在20～50万/毫升区间时,奶牛乳汁pH值在6.6～6.8之间;体细胞在50～150万/毫升区间时,奶牛乳汁pH值在6.8～7.0之间;体细胞在150～500万/毫升区间时,奶牛乳汁pH值在7.0～7.2之间;体细胞在大于500万/毫升时,奶牛乳汁pH值在7.2以上。