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191.
为探究bta-miR-205和bta-miR-497对牛病毒性腹泻病毒(BVDV)复制的调控作用,在前期建立BVDV感染MDBK细胞miRNAs差异表达谱的基础上,筛选出表达量显著差异的bta-miR-205和btamiR-497,通过生物信息学软件预测、荧光素酶报告基因检测等方法鉴定bta-miR-205和bta-miR-497的靶基因。应用RT-qPCR和病毒滴度测定等方法验证bta-miR-205和bta-miR-497对BVDV复制的影响。结果发现,bta-miR-205能显著抑制BVDV的复制,而bta-miR-497显著促进BVDV的复制。研究结果为BVD防控提供了新的思路和依据。 相似文献
192.
为制备单核细胞增生李斯特菌(LM)减毒的prfA基因重组菌,本研究通过构建重组质粒pKSV7-ΔprfA-gfp,电转化至LM TA感受态细胞中,将绿色荧光蛋白基因gfp插入LM的prfA基因第25 bp~93 bp之间,在42℃和10μg/mL氯霉素的双重选择压力下,筛选LM重组菌(rLM-ΔprfA-gfp),并对其生物学特性进行鉴定。试验结果表明,重组菌与亲本菌相比具有相似的体外生长特性,溶血素基因(hly)mRNA的转录水平降低;对小鼠的毒力显著减弱,其LD50由105.53升高到109.79,对肝、脾、肾的损伤不明显;免疫保护力试验显示重组菌与LM TA灭活疫苗的保护率分别为90%和35%,表明rLM-ΔprfA-gfp比传统疫苗具有更高的保护力。本研究构建的rLM-ΔprfA-gfp具有良好的遗传稳定性,并且具有较好的免疫原性,为LM活疫苗载体和分子标记疫苗的研制奠定了基础。 相似文献
193.
动物布鲁氏菌病的防治研究进展 总被引:3,自引:0,他引:3
动物布鲁氏菌病(Brucellosis)是由布鲁氏菌(Brucella)引起的人畜共患的传染变态反应性疾病,世界各地都有广泛流行.据统计资料表明,全世界每年因布鲁氏菌病造成的经济损失近30亿美元,我国就新疆、青海两地概算,每年因布鲁氏菌病造成的直接经济损失达1亿元左右. 相似文献
194.
195.
根据已发表的牛流产型布鲁氏菌HtrA(High temperature requinnent A)基因、GroEL(热休克蛋白)基因设计特异性引物,从新疆绵羊种布鲁氏菌基因组中扩增出HtrA、GroEL基因片段,将HtrA、GroEL基因片段纯化后分别克隆到T载体上测序,结果表明新疆绵羊种布鲁氏菌HtrA基因片段长1542bp,编码513个氨基酸,与发表的牛种(B.abortus)、羊种(B.melitensis)、猪种(B.suis)的HtrA基因序列的同源性分别为99.68%、99.81%、99.55%。GroEL基因片段长1641bp,编码546个氨基酸,与B.melitensis、B.suis以及B.aborms GroEL基因的核苷酸序列同源性分别为99.88%、99.82%、99.88%。HtrA基因和GroEL基因与发表的B.abortus、B.melitensis、B.suis的HtrA基因和GroEL基因序列的具有很高的同源性。按正确的阅读框架分别将两基因片段定向克隆到表达载体pET.28a上,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21菌株,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳和western blot分析表明,HtrA、GroEL基因能在大肠杆菌中成功表达,表达的蛋白分子量都约为60Ku,并能和布鲁氏菌免疫兔子产生的抗体发生特异性的结合。 相似文献
196.
197.
为了在细胞水平测试金刚烷胺对牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的抑制作用,试验采用细胞培养技术和CCK8法测定不同浓度金刚烷胺对牛肾原代(MDBK)细胞的毒性作用,确定药物的安全浓度。将感染BVDV的MDBK细胞用金刚烷胺处理,通过荧光定量PCR方法检测金刚烷胺对BVDV的抑制作用。结果表明:金刚烷胺的浓度为500μmol/L时,对MDBK细胞有很强的毒性;当浓度低于125μmol/L时,基本对细胞无明显毒性作用。BVDV的半数致细胞病变量(TCID_(50))为1×10~(-2.5)/mL。在浓度为250,166,125,100μmol/L的金刚烷胺的作用下,病毒的相对表达量分别为4.17%、4.19%、7.51%、21.69%。说明金刚烷胺在合理浓度下对动物体细胞无显著毒性,且具有抑制BVDV复制的作用。 相似文献
198.
199.
200.
从奶牛分离得到耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methieillin—resistant Staphylococcus aureus,MRSA)。按常规方法复苏菌株,用血浆凝固酶试验鉴定SA。用KB法、琼脂筛选法、生化鉴定法(VITEK32)、聚合酶链反应等鉴定MRSA。常规分离鏊定的葡萄球菌468株,其中凝固酶阴性葡萄球菌(coagulase negative Staphylococcus,CNS)361株,检出率为77.149,6,金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)105株,检出率为22.44%,MRSA36株检出率为34.29%,2株未定型,占0.42%。而MRSA在乳房炎奶样中检出率高达34.29%,表明新疆兵团部分垦区牛场MRSA已经呈蔓延趋势。 相似文献