模拟氮沉降和混栽对杉木和浙江楠根系生长的影响

为探明杉木-浙江楠混栽状态下根系生长特征及其对日益严重的氮沉降的响应,通过控制模拟氮沉降(0、45 kg·hm-2·a-1)和不同种植方式(杉木和浙江楠纯栽、杉木-浙江楠1:1行状混栽)两个条件,分析不同种植方式和氮沉降模式对杉木、浙江楠根系生长的影响.试验结果表明:混栽抑制杉木根系生长,促使杉木根冠比降低;纯栽条件下,施氮导致杉木根系生长受磷限制,与浙江楠混栽能够解决施氮造成的磷限制问题;氮沉降提高了浙江楠土壤氮有效性,导致其倾向将更大比例生物量分配至地上部分竞争光资源,从而抑制了自身根系生长;浙江楠一旦建立地上竞争优势,将反馈地下部分从而造成其根生物量升高.     

花叶络石的组织培养

通过对植物生长调节物质种类、质量浓度及配比对花叶络石Trachelospermumjasminoides‘Variegatum’茎段和腋芽诱导、增殖、腋芽增殖、最佳继代时间和生根的影响进行探讨,旨在建立花叶络石组织培养的再生体系,为其产业化生产提供技术平台。结果表明:花叶络石较理想的腋芽诱导培养基为MS BA 3.0 mg.L-1 NAA 0.1 mg.L-1,其诱导率为88%;最佳的腋芽增殖培养基为MS BA1.5 mg.L-1 NAA 0.1 mg.L-1,增殖系数为6,继代周期以25 d为佳,最佳的生根培养基为1/2MS或1/2 MS BA 0.1 mg.L-1 NAA 0.1 mg.L-1,生根率均达到90%以上。表4参6     

杉木应压木形成中的显微特征及主要代谢成分变化

为了解析主要代谢成分与杉木(Cunninghamia lanceolata)应压木形成的关系,以3年生直立杉木苗为研究对象,与垂直方向倾斜45°放置30、60和90 d后观察其生长性状并测定木质纤维素含量,使用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)对木质部代谢成分进行鉴定和解析。解剖发现应压木木质部管胞发生变形;化学成分测定发现总木质素和半纤维素含量增加,纤维素含量降低;GC-MS检测出应压木、对应木和直立木中共有成分20种,其中有机酸7种、单糖3种、二糖2种、醇类3种、氨基酸2种、酚类和糖苷类各1种;主成分分析结合显著性检验发现,3个时期应压木和直立木中有11种共有差异代谢物,其中乙醇酸、甘氨酸、核糖酸和棕榈酸在应压木中的含量显著低于对应木和直立木,苹果酸、松醇、肌醇、半乳糖和蔗糖在应压木中的含量显著高于对应木和直立木。本试验结果从代谢角度解释了杉木应压木形成中的生物学变化,可为揭示木材形成的分子机制提供新途径,并为高品质木材的定向培育和木材功能性改良提供理论依据。     

光皮桦总RNA的提取及Actin基因的克隆

以光皮桦(Betula luminifera)的嫩叶为材料,针对光皮桦组织中富含多糖多酚等特点,改进了CTAB法,采用β-巯基乙醇和PVP去除酚类,无水乙醇去除多糖,LiCl沉淀过夜.运用该方法提取得到的RNA,条带整齐、清晰,证明得到的RNA纯度、完整性和产率均较高,蛋白、多糖及酚类等去除较彻底.在此基础上,通过逆转录、PCR和RACE实验从光皮桦中克隆得到Actin基因.     

光皮桦SSR分子标记体系的建立

采用十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）-硅珠法提取光皮桦Betula luminifera嫩叶DNA,利用近缘种日本白桦B. platyphylla var. japonica和欧洲白桦B. pendula的引物,建立光皮桦简单重复序列标记（SSR）反应体系。在体系建立过程中,采用单因素法分别对影响聚合酶链式反应（PCR）反应的因素进行分析。结果表明：在20 μL反应体系中,模板DNA用量、Mg²⁺浓度、脱氧核糖核苷酸（dNTPs）浓度、引物浓度、T_aq DNA聚合酶用量分别为60 ng,1.500 mmol·L^－1,0.175 mmol·L^－1,2.500 mmol·L^－1,1.0 × 16.67 nkat时结果最好;引物退火温度比日本白桦扩增时提高1 ℃时效果佳。PCR扩增产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳后随机挑取其中3对引物扩增的多态性片段进行克隆测序,对引物的通用性做进一步检验,序列经比对后得到的与原物种序列相似度（max ident值）均在95.0%以上。可见,近缘种日本白桦和欧洲白桦的SSR引物可以在光皮桦上应用。图7表2参17     

高色素甘薯淀粉糊化特性的基因型差异

运用差示扫描量热分析仪(DSC)和淀粉黏度速测仪(RVA)分析了8个高色素甘薯品种淀粉糊化特性的差异。结果发现：品种间直链淀粉含量存在一定差异,变幅为19.59%～25.46%;DSC分析所得糊化温度也表现一定差异,起始温度（To）、峰值温度（Tp）和终止温度（Tc）的变幅分别为59.84～70.87℃、69.73～78.20℃和79.85～83.62℃,糊化     

香榧雌花芽部分内源激素的 HPLC 分析及动态变化

以香榧Torrega grandis `Merrillii' 雌花芽为材料, 研究了芽体中内源吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA )和赤霉素(GA3 )的提取、纯化方法和色谱测定条件。结果发现以石油醚作萃取剂, 并结合添加水不溶性聚乙烯吡咯烷酮和过Sep-PakC18小柱处理可达到较好的提纯效果。采用ODS-C18反相柱和Waters 486 型紫外检测器。用甲醇-水(体积比为50∶50 , 用乙酸调节pH为3.0 )作流动相, 流速为1 mLmin-1 , 柱温设为25 ℃, 进样量20 L , 分离IAA 和ABA 时紫外检测波长为280 nm 。分析GA3 时紫外检测波长为210 nm , 选用外标法进行定量。测定结果显示:该方法回收率高, 重演性好, 符合痕量分析要求。从2004 年2 月21 日至4 月29日的香榧雌花芽分化过程中, 芽体中IAA 和GA3 的质量分数呈现先上升后下降的变化趋势,而ABA 的质量分数表现出上升略下降再明显上升 的变化。图4 表4 参11     

“生物技术概论”通识课程教学方法改革探索与实践

“生物技术概论”是生命科学领域的基础性课程，也是生物技术基础知识和前沿科学相结合的综合性课程。通过分析大学生对“生物技术概论”课程的认识，从教学内容、教学方法与手段、考核形式等方面对通识课程教学进行了改革与实践，总结出一套符合通识课程的教学经验：在通识课程的教学中要求内容简单明了、实用，紧跟科学发展前沿；教学形式和手段应该多样化，要理论与实践相结合，提倡双向交流式授课和利用现代化教学工具进行教学；考核方法追求灵活多变。这些教学经验，可以为素质教育的开展和通识教学的改革提供一定的借鉴。     

杉木人工林木材管胞性状的变异研究

以采自浙江庆元巾子峰森林公园、庆元白岭头、庆元左溪、江西安福县陈山林场的4个杉木群体的17～25年龄段木材圆盘为试样,对其进行木材管胞性状的测定和分析,结果表明:杉木的管胞长度大多数分布在1100～2700 μm,管胞宽度大多数分布在27～ 57μm,壁腔比在0.1～0.6;杉木4个群体间管胞长度和壁腔比的差异不显著,而管胞宽度差异显著;杉木种群内个体间管胞性状遗传差异明显.     

紫楠转录组EST-SSR标记开发及通用性分析

紫楠(Phoebe sheareri)是商品材金丝楠木的原植物种之一,现存野生资源日益减少,为了进一步掌握其遗传多样性和遗传结构特征,大规模开发该种表达序列标签-简单重复序列(expressed sequence tag-simple sequence repeat,EST-SSR)标记迫在眉睫。本研究首次进行紫楠转录组高通量测序,挖掘SSR位点和开发EST-SSR标记,并进行引物的初步验证以及在楠属植物的通用性检测。结果显示,通过Illumina Hiseq 2500测序共获得43 781条Unigene,应用MISA软件鉴定了6 958个SSR位点,分布频率为15.89%,平均每5.31 kb出现1个SSR位点。紫楠SSR位点共包括340种重复基元,以二、三核苷酸为主,其优势重复基元分别为AG/CT(23.99%)和AAG/CCT(12.81%)。基于不同重复基元类型设计合成了94对SSR引物,以10份紫楠及同属4种楠木的基因组DNA为模板对其有效性及通用性进行初步验证,筛选出具有清晰扩增产物的引物41对,其中32对具有多态性,其平均等位基因数2.75个,观察杂合度(heterozygosity,Ho)、期望杂合度(heterozygosity,He)、多态信息含量(polymorphism information content,PIC)分别为0.369、0.563和0.541,且在同属材料中通用性较高。紫楠转录组测序获得的Unigene可作为SSR标记开发的有效来源,所获得的EST-SSR引物可为紫楠及楠属其他树种的遗传结构分析、种质资源利用及遗传图谱构建提供有效的分子标记。