巨型艾美耳球虫早熟株选育及其相关生物学特性研究

为了选育巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)早熟株并观测其生物学特性,运用Jeffers创立的球虫早熟株选育方法,对实验室保存的E.maxima进行了早熟株选育,并比较了所获得的早熟株与母株在卵囊大小、繁殖能力、致病性、免疫保护力等生物学特性上的差异。经过17代早熟株选育,E.maxima的潜在期由母株的142 h缩短至107 h,缩短了35 h。早熟株卵囊的长、宽及大小均比母株小,且差异显著(P0.05);卵囊形状指数比母株的稍大,但差异不显著(P0.05)。早熟株的卵囊繁殖能力较母株的低,排卵囊高峰出现在接种后d6,较母株提前1 d。在同等剂量之下,早熟株的致病性低于母株,但免疫保护力和免疫原性与母株相当。早熟株的选育成功,为球虫早熟株弱毒疫苗的研制以及早熟株相关基因的筛选提供了重要材料。     

几种药物抗小鼠弓形虫感染的初步效果

为寻找有效的抗弓形虫药物,选择了临床上使用较多的6种药物进行抗小鼠弓形虫感染初步实验。用刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）长宁株（CN株）速殖子,按1×104/鼠腹腔接种昆明系雄性小白鼠,接种后4 h用药组通过灌服或饮水用药,每鼠剂量分别为阿奇霉素（Azithromycin）150、120、90 mg/（kg·d）,泰妙菌素（Tiamulin）100 mg/（kg·d）,克拉霉素（Clarithromycin）15 mg/（kg·d）,磺胺氯吡嗪钠（Sulfachloropyrazine sodium）150、120、90 mg/（kg·d）,甲硝唑（Metronidazole）150 mg/（kg·d）,甲氧苄胺嘧啶（Trimethoprim）10 mg/（kg·d）,连续用药5~6 d,接种后10 d结束实验。结果阿奇霉素、磺胺氯吡嗪钠组的平均存活天数明显高于感染不用药组（P〈0.05）,泰妙菌素、克拉霉素、甲硝唑、甲氧苄胺嘧啶组在所用剂量下的存活天数与感染不用药组无明显差异（P〉0.05）;用药后4－7 d,取腹腔液镜检速殖子,与感染不用药组相比,阿奇霉素组减少70%以上,磺胺氯吡嗪钠组减少99%以上。研究结果提示,磺胺氯吡嗪钠具有良好的抗弓形虫效果,其推荐剂量与用药疗程还有待进一步研究。     

中国部分地区奶牛球虫病流行病学调查

为了解我国奶牛场球虫病流行情况,本研究采用饱和食盐水漂浮法对来自6省、市、自治区27个奶牛场的435份粪样进行了球虫虫卵检测,结果显示,共有26个奶牛场检测出球虫感染,平均感染率为96%,各省市的样品阳性率为0%～56%,感染强度(OPG)为0～8 734个,平均OPG为3 279个。研究表明,上述地区的奶牛场均存在不同程度的球虫感染,其样品阳性率和感染强度存在明显差异。     

利用BiFC技术研究柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原1结构域Ⅰ与棒状体颈部蛋白2互作关系

为了验证柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)顶膜抗原1结构域Ⅰ(apical membrance antigen 1 domain I,E tAMA1-DⅠ)与棒状体颈部蛋白2(rhoptry neck protein 2,EtRON2)的互作关系,以柔嫩艾美耳球虫子孢子cDNA为模板,PCR扩增出492 bp的E tAMA1-DⅠ片段和1395 bp的E tRON2片段,并与pGEM-T-easy载体连接构建相应重组质粒。获得的阳性重组质粒及双分子荧光互补技术的真核表达载体pBiFC-VN155和pBiFC-VC155用E c oRⅠ和B g I II进行双酶切,将E tAMA1-DⅠ、E tRON2分别与pBiFC-VN155、pBiFC-VC155连接,构建真核重组质粒pBiFC-VN155-E tAMA1-DⅠ和pBiFC-VC155-E tRON2。将2个真核重组质粒分别转染BHK细胞进行表达,经间接免疫荧光鉴定,可在BHK细胞中成功表达。将2个真核重组质粒共转染至BHK细胞中,同时将pBiFC-bJunVN155和pBiFC-bFos(deltaZIP)VC155、pBiFC-bJunVN155和pBiFC-bFos(delta)VC155共转染至细胞中分别作为阳性和阴性对照组。BiFC结果发现真核重组质粒共转染组和阳性对照组的BHK细胞均产生绿色荧光,而阴性对照组无荧光,表明E tAMA1-DⅠ与E tRON2蛋白之间存在互作关系。本研究结果为深入研究E tAMA1及E tRON2在球虫入侵过程中的功能与作用机制奠定基础。     

鸡球虫广东清远分离株对七种药物的抗药性试验

为了了解广东清远某鸡场球虫抗药性的产生程度,并制定出合理的用药方案,给延长药物的使用周期提供科学的依据,我们从该鸡场现场采集了新鲜粪便,实验室分离和繁殖卵囊,并在实验室进行球虫的抗药性研究.经检测粪中含堆型艾美耳球虫(E.acervulina)和变位艾美耳球虫(E.mtvati)共81.3%,柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)18.7%.试验选择目前常用的7种抗球虫药物,分别为球佳(地克珠利Diclazuril)、杜球(马杜拉霉素Madu-ramicin)、欲可胖(莫能菌素Monensin)、球安(拉沙里霉素Lasalocid)、氨丙啉(Amprolian)、球克(海南霉素Hainan-mycm)、氯苯胍(Robenidine).试验设7个药物组和感染不用药、不感染不用药2个对照组,每组10只鸡.在15日龄,除不感染不用药组外,每组接种孢子化卵囊12×104个.以抗球虫指数(ACI)、病变记分减少率(RLS)、相对卵囊产量(ROP)、最适抗球虫活性百分率(POAA)为试验指标,进行综合评定.结果显示鸡球虫广东清远株对球佳为轻度抗药,对杜球、欲可胖、球安、氨丙啉为完全抗药,对球克、氯苯胍为中度抗药.     

毒害艾美耳球虫鸡胚培养研究

为了建立毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)的鸡胚培养体系,用毒害艾美耳球虫子孢子分别接种8～11日龄鸡胚以确定最佳接种日龄,用不同剂量子孢子接种同一日龄鸡胚以确定最佳子孢子接种剂量,并在子孢子混悬液中分别加入不同剂量的胰岛素和叶酸以观察对球虫在鸡胚中发育的影响.结果显示,毒害艾美耳球虫子孢子接种9日龄的鸡胚,其卵囊产量(平均每只胚的卵囊量)和卵囊成熟率均为最高,成熟率达到99%;当每个鸡胚接种子孢子1×104个时,其卵囊产量最高;在子孢子混悬液中分别加入胰岛素1 000 U/mL、叶酸0.05 mg/mL,均能明显增加鸡胚中的卵囊产量.本文通过对毒害艾美耳球虫的鸡胚接种日龄、子孢子接种剂量、营养物质添加等因素的研究,初步建立了毒害艾美耳球虫的鸡胚培养体系.     

健康养殖中的设施标准研究进展

为完善标准体系,指导全国养殖设施标准制修订工作,实现技术创新与标准化的结合,以满足中国渔业可持续发展的需要,通过调研,收集国内外相关资料,梳理现行与水产健康养殖有关的标准,并分类组织研讨,按照中华人民共和国标准化工作导则《标准体系表编制原则和要求》和《综合标准化工作指南》建立养殖设施标准体系,回顾了健康养殖的发展过程,简要介绍了健康养殖中设施标准的现状,指出了今后发展方向。     

鸡堆型艾美耳球虫生物学方法鉴定

[目的]确定单卵囊分离获得的鸡球虫种类.[方法]采用生物学方法,测定该鸡球虫寄生部位、最短孢子化时间、潜伏期、孢子化卵囊和孢子囊大小等生物学特征.[结果]该鸡球虫主要寄生于十二指肠,卵囊呈卵圆形,囊壁光滑分为2层,囊内有1～3个折光性颗粒,未见卵囊残体;测100个孢子化卵囊大小为(13 ～22) μm×(11 ～ 16) μm,平均为16.96 μm×12.96 μm,形状指数1.31;测60个孢子囊大小为(8～ 13) μm×(5～8) μm,平均11.22 μm ×6.83 μm;最短孢子化时间为17 h,潜伏期为99 h.[结论]根据该鸡球虫的生物学特征及参考国内外文献,鉴定该鸡球虫为堆形艾美耳球虫(Eimeria acervulina).     

世界绵羊(Ovis aries)球虫种类与地理分布

为了解绵羊(Ovis aries)球虫的种类及在世界各地的分布情况,本文收集整理了世界上报道绵羊球虫的相关资料,按照虫种学名的字母为序,介绍了寄生于绵羊的17种艾美耳球虫(Eimeria),其中3种在中国发现与命名的球虫为卵状艾美耳球虫(Eimeria oodeus Hu and Yan,1990)、厚膜艾美耳球虫(E...     

壳寡糖对柔嫩艾美耳球虫感染雏鸡免疫增强效果的评价

为研究壳寡糖对柔嫩艾美耳球虫感染雏鸡免疫效果的影响,本研究先通过笼养试验筛选壳寡糖的有效剂量,再在平养试验中考察免疫期间鸡只体重、攻虫后的抗球虫指数(Anticoccidial index, ACI)以及血清抗体、细胞因子水平等指标。结果显示,笼养试验中5.0 mg和7.5 mg壳寡糖组的免疫增强效果均优于2.5 mg壳寡糖组。平养试验中5.0 mg和7.5 mg壳寡糖组免疫期间雏鸡体重和ACI均高于无佐剂免疫组,且7.5 mg壳寡糖组的ACI稍高于5.0 mg组;在免疫期间壳寡糖可明显促进鸡只CD8分子的增殖,而在免疫初期对CD4分子的增殖具有抑制作用,可明显刺激鸡只TNF-α的产生,而对IgM、IgG抗体以及TGF-β1、IL-2、IL-4、IL-5、IL-10等细胞因子均无显著性影响(P0.05)。