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本研究通过体外细胞试验和体内动物试验,对已制备的抗细胞间粘附分子1(ICAM-1)单克隆抗体(MAb)4F1和2C5的生物学活性进行检测.间接免疫荧光试验表明:这两株ICAM-1 MAb可以与人血管内皮细胞ECV304细胞中的ICAM-1结合.以乳酸脱氢酶释放法检测ICAM-1 MAb抑制单核细胞与血管内皮细胞的黏附作用.4F1和2C5 MAb分别可以使细胞黏附降低34.4%和26.9%.二甲苯致小鼠耳廓肿胀试验和毛细血管通透性试验表明:ICAM-1 MAb能够抑制小鼠耳廓肿胀度,使伊文思蓝渗出量降低.本研究证明所制备的MAb均具有阻断ICAM-1及抑制炎症反应的功能,其中4F1生物学活性高于2C5. 相似文献
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[目的]探讨鲤鱼肝细胞原代培养的最佳条件。[方法]通过对鲤鱼的肝脏细胞进行原代培养,分析不同培养基、温度、pH、胰蛋白酶浓度、生长时间对鲤鱼肝细胞生长状况的影响,并测定肝细胞活力。[结果]鲤鱼肝细胞培养的最佳条件为:温度在25℃左右,pH7.4,胰蛋白酶浓度0.250%,消化时间40 min,培养基为M199。分离肝细胞的平均存活率>85%,每克肝平均可获得3.8×106个分离细胞,在细胞活力及数量上达到最佳平衡。[结论]该研究可为建立稳定的毒理学和药理学试验模型奠定基础。 相似文献
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【目的】克隆鲤鱼春季病毒血症病毒(SVCV)的磷蛋白(P蛋白)基因,并对其进行原核表达,为进一步制备SVCV-P蛋白单克隆抗体及建立新的SVCV诊断方法奠定基础。【方法】采用RT-PCR方法扩增SVCV P蛋白基因,将其克隆入pET-28a(+)载体中,获得原核重组表达质粒pET28-P,进行原核表达。将该重组原核表达质粒转化至大肠杆菌Rosetta感受态细胞中,用0.4 mmol/L IPTG进行诱导表达,用镍亲和层析试剂盒对表达产物进行纯化,分别用SDS-PAGE和Western Blotting方法对表达产物进行鉴定。【结果】成功克隆了SVCV-P蛋白基因,该基因长度为933 bp。成功构建了原核重组表达质粒pET28-P,其诱导表达产物分子质量约为37 ku;表达的重组P蛋白可被SVCV阳性血清所识别。【结论】成功克隆了SVCV P蛋白基因,获得了分子质量约为37 ku的重组P蛋白。 相似文献
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为探明吉林省查干湖湖泊水环境生态系统的特征,于2017年10月末(冬季)、2018年4月(春季)、7月(夏季)、9月(秋季)调查分析查干湖水生生物的种类与密度的变化及规律.调查的水生生物包括浮游植物、浮游动物以及底栖动物.调查结果表明:查干湖浮游植物74种,隶属于8门61属,夏季浮游植物栅藻属(Scenedesmus)占优势,冬季浮游植物小球藻属(Chlorella)占优势.浮游动物29种,隶属于17属,底栖动物共12种,湖泊中部底栖动物所含种类少,仅有水丝蚓(Limnodrilus). 相似文献
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为研究嗜水气单胞菌D102致弱菌株的制备、OD值变化及其致病性,首先利用细菌在生长过程中毒力不断减弱的特性,对嗜水气单胞菌102正常株进行数次传代培养,得到在血液琼脂平板上没有β-溶血圈的D102致弱株。然后对102正常株和D102致弱株进行OD值测定,发现102正常株在6 h时进入对数生长期,24 h开始进入稳定生长期;而D102致弱株在2 h即开始进入对数生长期,20 h时开始进入稳定生长,对数生长期较正常株提前。鱼体注射0.5 m L的D102致弱株菌液7 d后无发病现象,然后在不发病鱼体上注射强毒性102正常株原菌液。结果表明:80%的鱼正常生长,无发病状态,20%的鱼出现轻微充血后痊愈,D102致弱株对鲤鱼有很好的保护作用;提取不发病鱼的血清进行血清学反应,确定其抗体效价为1∶128。 相似文献