金华市柑橘种苗检疫监管模式探讨

柑橘黄龙病(Citrus huanglongbing)是影响世界柑橘产业最严重的一种毁灭性病害,通常被称为柑橘上的“癌症”[1]。柑橘黄龙病在自然条件下可通过嫁接和柑橘木虱传播,其中,带菌苗木和接穗的调运是该病害扩展蔓延和远距离传播的主要途径[2]。金华是浙江省最大的柑橘种苗生产基地之一。     

1株传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)的分离与鉴定

将虹鳟鱼苗研磨过滤除菌后接种到胖头鱼肌肉细胞系(FHM)后出现了特征性病变(CPE),电镜下观察到IHNV病毒粒子。用传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)和传染性胰腺坏死病病毒(IPNV)等水生动物病毒特异性引物对该毒株进行RTPCR试验,结果显示,用IHNV的引物能扩增出阳性片段。将分离株暂时命名为CJ-13。应用DNAStar和MEGA5.2软件,将CJ13的N基因与多株GenBank中已发表的IHNV毒株相应基因进行同源性比对和构建系统树。核苷酸同源性显示CJ-13株与HV7601株的N基因同源性高达97.1%,推导出的氨基酸序列同源性为95.2%。系统进化树表明,CJ-13分离株与HV7601株遗传进化关系较近,属于同一分支。     

1株感染洛氏鱥呼肠孤病毒的分离与培养

利用细胞培养技术从养殖发病洛氏鱥中分离出1株病毒,经人工感染试验、电镜观察、核酸基因组SDS-PAGE电泳、RT-PCR检测确认为呼肠孤病毒。人工感染发病的症状与自然发病症状相同;病毒感染可使鲤鱼上皮瘤细胞(EPC)产生典型细胞病变效应,收集细胞上清,负染后电镜下可观察到大小均一,直径约70nm,近球形,无囊膜结构的病毒粒子,初步判断为呼肠孤病毒;病毒基因组SDS-PAGE结果表明,病毒基因组由11个分段的RNA核酸片段组成,为典型的水生呼肠孤病毒核酸带型。病毒基因组S10节段RT-PCR结果表明,有特异性条带,其与GenBank中登录的呼肠孤病毒S10节段(JN206665.1)序列同源性为91%,该分离株应为呼肠孤病毒,本研究首次在洛氏鱥鱼内分离到呼肠孤病毒。     

靶向S基因外源性microRNA抑制TGEV增殖效果的研究

应用生物信息学软件对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因进行分析,筛选出可能与S基因有相互作用的外源miRNA:amiRNA-S-28035,amiRNA-S-28038,amiRNA-S-28165。之后,利用脂质体将构建好的相应的表达载体瞬时转染至PK-15细胞;通过Q-PCR和间接免疫荧光方法检测其对S基因的抑制作用;CPE分析和TCID50测定检测其对TGEV增殖的抑制效果。结果发现,3个外源性miRNA均降低了S基因mRNA的转录和蛋白的表达,其中amiRNA-S-28038对TGEV mRNA的平均抑制率可达64.6%,最高可达69.9%,表明外源性microRNA可以通过靶向TGEV基因组来抑制TGEV的复制。研究结果为猪传染性胃肠炎的预防和治疗提供了新的思路。     

鲤春病毒血症病毒单克隆抗体制备及鉴定

为制备鲤春病毒血症病毒(SVCV)单克隆抗体(MAb),本研究用纯化的SVCV免疫BALB/c鼠,通过杂交瘤细胞技术,制备2株抗SVCV的MAb,分别命名为2A3和3H7。经间接ELISA检测腹水效价为1:10240和1:12150。亚类鉴定证实,这2株亚类均为IgG1型。经非竞争酶免疫试验测定2A3和3H7的抗体亲和力常数分别为4.86×108L/mol和1.86×109L/mol,3H7相对亲和力高于2A3。MAb 2A3和3H7的饱和度均为1:400,叠加试验所得增值指数为63.2%,大于50%。抗体反应增值结果表明:两株MAb分别针对不同抗原位点。免疫印迹分析检测表明,两株纯化的MAb均可与SVCV抗原发生特异反应。     

虹鳟亲鱼养殖与管理

一、亲鱼培育的适宜饵料虹鳟鱼卵的质量直接影响卵子的孵化和受精效果。根据对鳟卵进行的外部观察和内含物分析,可以把它划分为三个不同的等级:一级卵为优质卵,呈红色或橘红色,卵粒圆而饱满,同腹卵的卵粒大小均匀。维生素A含量在460国际单位/100g鲜卵以上;胡萝卜素含量在23ug/100g鲜卵以上。。二级卵亦为优质卵,呈橙黄色,卵粒圆而饱满,同腹卵的卵粒大小均匀。维生素A含量在400国际单位/100g鲜卵左右。三级卵为劣质卵,呈淡黄色,卵粒欠     

好粘色板对柑橘小实蝇的诱杀效果

对好粘色板悬挂高度、色板形状、好粘使用量诱杀柑橘小实蝇进行试验.结果表明,好粘色板悬挂高度以树冠中部效果最好,试验期间虫量达9.84头·板-1；色板形状以圆柱形最佳,试验期间虫量达12.32头·板-1；好粘使用量以喷3次诱杀效果最好,试验期间虫量达37.5头·板-1.     

春夏花菜优质高产栽培

花菜栽培在生产中往往由于密度、施肥、病虫防治、中耕管理等生产技术存在一些问题,导致品质差、产量低、效益不理想,影响了花菜种植的发展。摸索一套高产栽培技术,对于发展花菜生产十分关键,对指导花菜生产具有重要作用。     

“好黏”等不同诱剂对桔小实蝇的诱杀作用分析

采用好黏等不同诱剂及不同黏板处理,对梨园桔小实蝇成虫的诱杀效果进行比较。结果表明,好黏对桔小实蝇的诱杀效果最好,7天内诱虫量达52.7头/板,雌虫比例1.5%;其次为附有甲基丁香酚、甲基丁香酚+乙酸乙酯+乙醇的黄板,7天内诱虫量分别为25.7头/板和24.6头/板;附有异丁香酚的黄板和单一黄板效果最差。另外,附有诱蝇酮的黄板对南瓜实蝇的诱杀效果较好。     

金华市植物保护技术水平的演变与分布

通过对金华市植保（植检）技术人员发表的论文和获奖的科研成果按年代、地区、职能、内容和作者进行详细的统计和分析,明确了金华市植物保护技术水平的历史演变以及在不同领域的分布。