1株感染洛氏鱥呼肠孤病毒的分离与培养

利用细胞培养技术从养殖发病洛氏鱥中分离出1株病毒,经人工感染试验、电镜观察、核酸基因组SDS-PAGE电泳、RT-PCR检测确认为呼肠孤病毒。人工感染发病的症状与自然发病症状相同;病毒感染可使鲤鱼上皮瘤细胞(EPC)产生典型细胞病变效应,收集细胞上清,负染后电镜下可观察到大小均一,直径约70nm,近球形,无囊膜结构的病毒粒子,初步判断为呼肠孤病毒;病毒基因组SDS-PAGE结果表明,病毒基因组由11个分段的RNA核酸片段组成,为典型的水生呼肠孤病毒核酸带型。病毒基因组S10节段RT-PCR结果表明,有特异性条带,其与GenBank中登录的呼肠孤病毒S10节段(JN206665.1)序列同源性为91%,该分离株应为呼肠孤病毒,本研究首次在洛氏鱥鱼内分离到呼肠孤病毒。     

副猪嗜血杆菌D15蛋白的原核表达及免疫原性分析

为了对副猪嗜血杆菌D15蛋白进行原核表达,本试验通过PCR方法扩增D15基因,之后将其克隆入pET-28a(+)载体构建重组质粒,再将重组质粒转化BL21 (DE3)感受态中,使用0.5mM 部PTG经20℃诱导表达了52Ku的D15重组蛋白.经Western blot试验证明D15重组蛋白具有较高的免疫原性,免疫4周龄昆明小鼠制备免疫血清,ELISA试验表明制备的血清效价在1∶20000以上,表明D15蛋白具有良好的免疫原性.     

禽分枝杆菌副结核亚种重组蛋白r22-ag85B的表达及纯化

为表达并纯化禽分枝杆菌副结核亚种主要抗原基因的串联重组蛋白r22-ag85B,期望研制出一种新型副结核病疫苗,以禽分枝杆菌副结核亚种参考株P18的基因组DNA为模板,扩增了22KD基因和ag85B基因。采用重叠延伸剪接PCR技术（SOE-PCR）获得了融合基因22-agS5B,将基因连接于表达载体pET32a（＋）,构建了重组质粒pET22-ag85B。将其转化到大肠杆菌感受态细胞BL21（DE3）中,以IPTG（终浓度1mmol／L）诱导后对表达产物进行Western blot检测。检测结果显示,成功表达并纯化了重组蛋白r22-ag85B,其分子质量约为65ku。Western blot检测表明此蛋白具有良好的免疫学活性。禽分枝杆菌副结核亚种22-ag85B重组蛋白的成功表达及纯化为副结核病疫苗的研究工作奠定了基础。     

抗ICAM-1单克隆抗体的生物学功能研究

本研究通过体外细胞试验和体内动物试验,对已制备的抗细胞间粘附分子1(ICAM-1)单克隆抗体(MAb)4F1和2C5的生物学活性进行检测.间接免疫荧光试验表明:这两株ICAM-1 MAb可以与人血管内皮细胞ECV304细胞中的ICAM-1结合.以乳酸脱氢酶释放法检测ICAM-1 MAb抑制单核细胞与血管内皮细胞的黏附作用.4F1和2C5 MAb分别可以使细胞黏附降低34.4％和26.9％.二甲苯致小鼠耳廓肿胀试验和毛细血管通透性试验表明:ICAM-1 MAb能够抑制小鼠耳廓肿胀度,使伊文思蓝渗出量降低.本研究证明所制备的MAb均具有阻断ICAM-1及抑制炎症反应的功能,其中4F1生物学活性高于2C5.     

单克隆抗体在狂犬病防控中的应用

狂犬病是一种人兽共患病,多发于经济欠发达地区,致死率极高。体液免疫是动物抵御外界病毒感染的有效手段,所以抗体成为控制狂犬病的一个重要武器。目前,抗狂犬病毒(RV)抗体已经由传统的多克隆抗体发展到各种单克隆抗体(mAb)、小分子抗体等,不同mAb联合使用的鸡尾酒疗法在狂犬病的防治中已经可以替代传统方法。mAb在狂犬病的检测、变异研究以及治疗方面都得到了充分的应用,但是仍然存在许多尚未解决的问题。文章就mAb在狂犬病防控中的应用进行综述。     

2株枯草芽孢杆菌的分离鉴定及特性研究

【目的】寻求适合制作水产类微生态制剂的益生菌。【方法】从养鱼塘底泥和健康鲫鱼Carassius auratus肠道中分离芽孢杆菌,结合细菌形态学、生理生化特征和16S rRNA序列分析对其进行鉴定,对菌株安全性、高温耐受性、酸性耐受性、拮抗性及产酶情况等特性进行研究。【结果】分离到2株芽孢杆菌,分别命名为B1和B2,细菌形态学、生理生化特征和16S rRNA序列分析的结果显示,B1和B2均为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。特性研究结果证实B1、B2菌株都具有较好的安全性、高温耐受性和酸性耐受性,可对致病性大肠埃希菌Escherichia coli、金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila以及温和气单胞菌A.sobria有良好的体外抑菌能力,均具有产脂肪酶、淀粉酶、蛋白酶和纤维素酶的能力。【结论】分离到2株性能优良的枯草芽孢杆菌,可将其作为水产微生态制剂的候选菌株。     

“野生菌王国”纪实

初秋的野生菌王国，处处菌香满南华，美味溢九洲。野生菌一年一度迷人的丰收景象哟，吸引了无数国内外食客、商人……络绎不绝，纷至沓来。     

“野生菌王国”纪实(散文)

初秋的野生菌王国,处处菌香满南华,美味溢九洲。野生菌一年一度迷人的丰收景象哟,吸引了无数国内外食客、商人……络绎不绝,纷至沓来。金秋一日,云南省林业文联组织了一批作家记者深入南华采风。一到目的地,作家记者们恨不得用尽自己的文学专长,把这里的秀美山川、风土人情、可喜变化、林改成果,野生菌、核桃、土豆、罗卜、烤烟等产业,从不同的侧面和视角广度记录下来,为"野生菌王国"增光添彩。这日下午,一行人走进野生菌批发市场以及野生菌加工企业,把所看到的松茸、猪拱菌、虎掌菌、干巴菌、鸡、羊肚菌、青头菌、牛干菌、黄葱菌、核桃菌、老人头菌、鸡油菌、铜绿菌、奶浆菌、谷熟菌、辣子菌、香肉齿菌、红黄鹅膏菌、     

单纯疱疹病毒ULA2基因及其编码蛋白的研究进展

疱疹病毒是一类球形、有囊膜的较大的双链DNA病毒,主要由核心、衣壳、皮层和囊膜4部分组-成[1],分为α、β、γ3个亚科.单纯疱疹病毒(HSV)属于α疱疹病毒亚科,包括HSV-1和HSV-2两个血清型,:HSV-1主要感染口腔、唇的皮肤及黏膜,而HSV-2通常与外生殖器感染和新生儿感染有关.     

复方中药胃溃安的急性毒性试验

胃溃疡（GU）是一种常见的消化道疾病,其发病率高达10%,然而其发病的主要机制是消化道侵袭因素的增强和防御修复因素的减弱。由于抗生素的长期使用,会导致畜禽产品中残留大量耐药性细菌和药物,对人类的健康存在极大隐患[1-2]。因此,世界各国都明令禁止抗生素的滥用。中药具有药用和营养两个方面的作用,