猪肺炎支原体膜蛋白的电泳分析及免疫印迹检测

以猪肺炎支原体Z株为试验材料,采用SDS-PAGE和Western印迹对该菌膜蛋白进行了分析。研究表明:猪肺炎支原体经A_(26)液体培养基培养,15000 r/min离心收集菌体细胞,低渗超声法破膜获得膜制剂后,应用12.5％的凝胶对膜蛋白进行SDS-PAGE分离,在电泳图谱上呈现出36条蛋白带,相对分子质量范围为1.18×10~4～9.12×10~4。同时以膜制剂作为抗原,分4次免疫试验兔,心脏采血,提取抗血清,并分离纯化得到IgG,然后进行Western印迹法检测。其结果发现在SDS-PAGE分离得到的36种膜蛋白(或多肽)中,有6种蛋白具有免疫原性。     

牛奶中掺假物的实验室鉴别法

随着生活水平的不断提高,人们对生活质量的要求也日益提高。由于牛奶具有香甜可口、营养丰富、易于消化吸收和老少皆宜等特点,故被誉为食品中的“皇后”。因此,对鲜牛奶的消费量也越来越大。在市场经济的大潮中,有些个体私营者为了获得较高的经济利益,在牛奶中掺杂其他物质,严重损害了广大消费者的利益。所以,对于掺假牛奶的鉴别是十分必要的。为了确保广大消费者喝上“放心奶“,本文将介绍几种掺假物的实验室鉴别法。1牛奶中掺水的检验1.1测比重法正常牛奶的比重为1.03～1.08gmL。在检测时沿量筒壁倒入200mL20℃的牛奶摇匀,放入比重计静置…     

猪支原体肺炎诊断及检测技术

猪支原体肺炎(M ycoplasm a Pneu-m oniae of swine,M PS,亦称猪气喘病)是由猪肺炎支原体(M ycoplasm a hyop-neum oniae,M hp)感染引起的一种慢性呼吸道传染病。M PS在世界各地广泛分布,发病率高,主要引起猪的生长受阻和饲料转换率的大幅下降,是造成养猪业经济损失的最重要疾病之一。M PS病的死亡率虽然不高,但由于流行的广泛性、长期性和消耗性,所造成的经济损失仍然是巨大的。经M hp感染的病猪易遭受其它病原体的侵袭,常因坏死性、化脓性细菌的继发感染而死亡。上世纪70年代以来,国外相继报道了灭活疫苗的应用,但均未达到良好的效…     

霉形体膜蛋白溶解及含量测定方法研究

本文选择双蒸水；０．１ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ；１．０ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ；４％ＤＯＣ和１％ＳＤＳ条件分别对猪肺炎霉形体膜制剂作增溶处理，使膜蛋白溶解，然后采用Ｌｏｗｒｙ法进行蛋白质含量的测定．测定结果表明：０．１ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ溶解效果较好，所测得膜蛋白含量达６８．８％左右。，数据更为接近实际含量．     

应用胰酶粗提液对淘汰蛋鸡肉的嫩化试验

用有机溶剂部分沉淀法获取胰酶粗提液，在室温下用此提取液对淘汰鸡进行浸泡嫩化试验，嫩化后的肌肉中非蛋白氮含量普遍提高，肌肉蛋白质电泳带谱与对照组显然不同，肌肉的嫩度有了明显提高。本试验完全能达到纯酶制剂的嫩化效果。     

兽用疫苗支原体污染的PCR检测技术的建立及应用

根据支原体的16 S rRNA基因设计特异性引物,以兽用疫苗中常见的支原体DNA为模板进行PCR试验,优化反应体系,建立了兽用疫苗支原体污染的PCR 检测方法,并对市场上的兽用疫苗随机抽查检测,其检出率为24.4%(22/90)。结果表明该方法特异性强,灵敏度高,有望成为兽用疫苗支原体污染的检测方法之一。     

茄子单性结实研究进展

茄子单性结实性能克服反季节栽培中的低温障碍,提高产量,降低栽培成本,改善果实品质。本文从特性鉴定、生理基础、遗传机制、生物学研究等几个方面对茄子单性结实的研究进展进行了综述,并提出了存在的问题和今后的研究方向。     

基于SSR分子标记的栽培种茄子遗传多样性分析

用105对茄子SSR引物对34份茄子高代材料进行遗传多样性分析。试验结果表明：47个标记在供试材料中有多态性,共检测出148个多态性位点。多态性信息含量（PIC）的变化范围是0.025 4～0.909 3,显示了较高的多态性。供试材料遗传相似系数在0.63～0.93之间,供试材料之间的遗传差异不大,遗传基础相对狭窄。利用UPGMA聚类分析,将供试材料归为两大类4个亚类,SSR分子标记与果实性状聚类分析结果基本一致。     

苓桂术甘汤对肉鸡腹水综合征的防治作用

将15日龄艾维茵肉鸡分成5组,一组在常温(21±1)℃下饲养,作为正常对照组(N);其余4组在低温(11±1)℃下饲养以诱发腹水综合征,其中模型对照组(C)不给任何药物,维生素组(V)饮水中添加VC(0.5 g/L)和VE(0.1 g/L),2个试验组(T1和T2)分别给予不同剂量(0.4和0.8 mL/kg bw)的苓桂术甘汤。结果显示,C组的腹水发病率、腹水心脏指数(AHI)、红细胞压积(PCV)、红细胞数、血红蛋白(Hb)及丙二醛(MDA)含量、血清α-羟丁酸脱氢酶(-αHBDH)、谷草转氨酶(GOT)和谷丙转氨酶(GPT)均显著高于N组;而3种抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)]的活性则显著降低;2个试验组及V组的上述检测指数都得到明显改善,表明苓桂术甘汤能增强肉鸡的抗氧化能力,具有防治肉鸡腹水综合征的作用。     

套式PCR在支原体检测中的应用

支原体(Mycoplasma)是一类缺乏细胞壁的原核微生物,它对猪、牛、禽以及实验动物等具有广泛的致病性,主要以侵害呼吸系统和生殖系统为主,还能引起关节炎、乳腺炎以及眼部感染.由于它为难培养的微生物,因而限制了一般实验室对其深入的研究.目前,其检测方法主要有分离培养法、电镜法、血清学方法以及核酸探针法等[1],但都存在着种种不足.进入20世纪90年代之后,国内外众多学者在PCR技术广泛应用的基础上,发展并形成了套式PCR方法(nested PCR,nPCR)来研究支原体.目前,应用套式PCR技术已在组织细胞培养中的支原体污染、动物支原体病诊断和人类疾病与支原体感染中得到了广泛的应用.