猪肺炎霉形体膜的制备试验

猪霉形体性肺炎是一种慢性传染病。其霉形体的毒性及免疫性都与膜浓度和膜蛋白有关。从培养菌中制备足够量的膜制剂是研究该致病原理、免疫机制以及基因表达调控的关键步骤。为此我们在Ｒａｚｉｎ的反复冻融裂解和低渗裂解两种破膜方法的基础上，提出了一种低渗与冻融相结合的新型破膜方法。并通过测定ＡＴＰ酶和已糖激酶活力以鉴定膜制剂的纯度。试验表明这种方法能提高膜的收获率，达到２８％左右。     

检测猪肺炎支原体抗体间接ELISA方法的建立

选用猪肺炎支原体Mhp J株培养物制备抗原,建立检测猪肺炎支原体抗体的间接ELISA(酶联免疫吸附)方法.结果显示,ELISA试验的最佳反应条件为:抗原包被浓度为1.5 μg/ml,待检血清的最佳稀释浓度1∶100,2%明胶作封闭液,抗原抗体最佳结合时间为90 min,酶标抗体1∶10 000(体积比)稀释,最佳作用时间为60 min.对136份样品检测结果表明,建立的猪肺炎支原体间接ELISA抗体检测方法与美国IDEXX公司生产的猪肺炎支原体抗体检测试剂盒检测的符合率达到83.8%,假阴性率8.8%,假阳性率1.5%.     

农杆菌介导抗根结线虫Bt cry6A基因转化茄子的研究

本试验以茄子下胚轴和子叶为外植体,通过对抗生素选择压筛选、不同抗生素抑菌效果比较、农杆菌侵染时间、预培养时间、共培养时间等条件优化,建立了适用于茄子的遗传转化体系,并利用农杆菌介导法将抗根结线虫Bt cry6A基因导入茄子中,以期获得抗线虫的茄子材料,探索新的抗线虫育种途径,为利用茄子转基因技术培育和改良茄子品质提供理论依据.结果表明,75mg· L-1的卡那霉素可以有效地抑制愈伤组织的产生;200mg· L-1特美汀能够完全抑制农杆菌的生长;最佳侵染外植体为子叶,在预培养4d,侵染10min,共培养1d时转化率最高;获得的56株Kan抗性植株中有15株具有GUS活性;经过PCR、RT-PCR验证,初步确认Bt cry6A基因已整合至茄子基因组中,并在转录水平上正常表达;根结线虫幼虫接种鉴定表明,转Bt cry6A基因茄子再生植株对南方根结线虫抗性明显提高.     

托鲁巴姆(Solanum torvum Sw.)在茄子嫁接栽培上的应用研究

茄子近缘野生种托鲁巴姆(Solanum torvum Sw.)具有良好的抗病、抗逆性,作为砧木在茄果类蔬菜嫁接生产上得到广泛应用,显示出良好的抗病增产效果。本文对近年来国内外S.torvum作为砧木在茄子嫁接栽培生产上的应用,以及嫁接栽培抗病、克服逆境伤害机理的研究进展等作了阐述。     

猪肺炎霉形体膜上ATP酶基本性质的研究

本文测定了猪肺炎霉形体膜上ＡＴＰ酶的活性，同时就温度、ｐＨ及一些金属离子对该ＡＴＰ酶活性的影响进行了研究。结果表明：猪肺炎霉形体膜上ＡＴＰ酶比活力为９．２３２左右。在２５～４０℃温度范围内酶活性较稳定。ｐＨ适应范围为６．５～８之间，以ｐＨ７．６为最适。Ｍｇ２＋、Ｍｎ２＋、Ｚｎ２＋对酶均有一定程度的激活作用，而Ｃａ２＋、Ｎａ＋－Ｋ＋具有不同程度的抑制作用。     

北虫草培养基添加量对酱油制曲及酶活性的影响

在酱油发酵基料(由40 g豆粕和60 g麸皮配制而成)中分别添加5、10、15、20 g北虫草培养基(分别称其为处理1、处理2、处理3、处理4),以不添加北虫草培养基的处理为对照,研究其对酱油制曲及对蛋白酶、淀粉酶、亮氨酸氨肽酶、纤维素酶活性的影响;采用血球计数板法检测种曲孢子数,观察种曲的感官变化。结果表明:1)各处理中,处理2种曲的孢子数最多,孢子生长能力旺盛,制曲48 h时曲料蓬松,菌丝丰满,米曲霉孢子为淡黄色,制曲54 h时蓬松的曲料中长出黄绿色丰满的成熟米曲霉孢子;2)制曲过程中,蛋白酶、淀粉酶、亮氨酸氨肽酶、纤维素酶活性均呈先上升后下降的趋势,酸性蛋白酶活性在制曲42 h出现峰值,其余各酶的活性均在制曲48 h出现峰值;3)除亮氨酸氨肽酶酶活性各处理间与对照间的差异无统计学意义外,处理组中中性蛋白酶、碱性蛋白酶、酸性蛋白酶、淀粉酶及纤维素酶的酶活性均高于对照,在酶活高峰时,处理2的酶活性均显著高于对照组及其他处理组(P0.05)。综上可见,在制曲过程中添加北虫草培养基,可显著提高米曲霉沪酿3.042制曲的质量,提高其酶活性,且以处理2的制曲效果较好,酶活性最高。     

检测兽用疫苗中支原体污染的PCR-ELISA技术的建立及应用

建立了检测兽用疫苗中支原体污染的PCR-ELISA方法,探索其最佳实验条件及优化组合。实验依据GenBank中登录的鸡源支原体和猪源支原体16SrRNA基因序列(登录号:Mg,AY744942;Mhp,AE017244;Mhs,AY973563;Mf,X63377),运用DNAStar软件和Primer5.0软件设计PCR特异性引物和探针,其中引物用地高辛标记,探针用生物素标记。以培养的支原体中提取的DNA为模板,依据PCR-ELISA技术原理设计实验,建立并优化PCR-ELISA反应条件。对30批鸡新城疫Ⅰ系活疫苗、30批鸡新城疫La Sota系活疫苗样品和30批猪瘟活疫苗样品进行检测。结果表明,应用建立的PCR-ELISA反应体系和条件可以从疫苗样品中检测到支原体,检测率为35.6%,比PCR法的检测率高11.2%。该方法灵敏度高,特异性强,在疫苗的支原体污染检测中具有推广应用价值。     

端粒、端粒酶与肿瘤

端粒,端粒酶与肿瘤的关系是当今生物学,医学研究的热点之一。端粒是一种封闭了真核染色体末端的脱氧核糖核酸。它与端粒结合蛋白结合在一起,对染色体起到了保护的作用,另外,端粒的长度和细胞增殖有很大关系。端粒酶是一种特异的染色体末端转移酶,它的存在解决了染色体末端复制引缩问题,而且认为端粒酶的过度表达和细胞的永生化和癌变直接相关。端粒酶的结构和功能决定了它在肿瘤与癌症治疗等方面具有广泛的应用前景。文章综述了端粒、端粒酶的结构、功能,以及端粒与端粒酶活性在细胞癌变中的重要作用。     

Q热血清学检测方法的研究进展

Q热是由贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii)引起的急性自然疫源性传染病。本病呈世界性流行,人类和动物普遍易感,已经成为当前分布最广的人兽共患病之一。文章综述了Q热的病原学、流行病学以及血清学检测方法的研究进展,为Q热的进一步研究与防控提供科学依据。     

禽胰多肽小脑膜受体多克隆抗体的制备与效价测定研究

本试验对禽胰多肽小脑膜受体多克隆抗体进制备,进而进行效价测定研究。试验表明:成功制备出禽胰多肽小脑膜受体多克隆抗体,构建的多克隆抗体效价是稳定的,效价也是较为满意的。