高压均质机提高替莫唑胺水溶性的方法研究

目的探究提高替莫唑胺药物水溶性的方法。方法在酸性条件下,以紫外分光光度法测定替莫唑胺在水中的溶解度,通过单因素和正交优化试验法确定最佳方案工艺,并对其样品进行粒径和Zeta、电位、红外光谱表征。结果由正交优化试验得出最佳方案为:选用烟酰胺为表面活性剂,替莫唑胺与水的比例为8∶1,高压均质压力为60 psi,经过15次高压均质处理后,替莫唑胺的溶解度与未经高压均质机作用相比溶解度提高了95.11%,平均粒径减小257 nm,Zeta电位为-26.7 mV。结论经最佳工艺处理后的样品溶解度提高了95.11%,分散均匀,稳定性较好,对替莫唑胺的进一步应用提供了理论基础。     

浅谈无抗养殖2.

正无抗养殖2.0 (Antibiotic-free Breeding 2.0)简称无抗2.0,是基于无抗生素养殖的不同要求作出划分的,即绝对的无抗养殖。绝对的无抗养殖是在养殖过程中拒绝使用促生长和疾病防治的一切抗生素。1无抗养殖2.0内涵无抗养殖是指养殖过程中不以预防和促生长为目的在饲料     

VR技术在动物科学实践(实验)教学中的应用研究

虚拟现实(vitualreality,VR)技术的出现,推动了现代教育的发展,颠覆了传统实践教学模式。通过对目前动物科学实践(实验)教学现状的分析,提出了VR技术在此领域内的应用潜力及优势,并指出VR技术在教学应用中还应注意的几点问题,以期为VR技术能够更好地在动物科学实践(实验)教学中推广应用,为提升教学水平和学生实践能力提供帮助。     

固元颗粒对免疫抑制鸡免疫功能的影响

为研究固元颗粒(GYKL)对免疫抑制鸡免疫功能的增强作用,试验将210只12日龄非免疫健康海兰褐鸡随机分为7组:固元颗粒(GYKL)低剂量(GYKL1)组、固元颗粒中剂量(GYKL2)组、固元颗粒高剂量(GYKL3)组、药物对照(APS)组、环磷酰胺对照(Cy)组、空白对照(BC)组、免疫对照(VC)组,每组5个重复,每个重复6只鸡。13日龄时,BC组和VC组注射0.5 mL生理盐水,其余组均按体重100 mg/kg肌肉注射环磷酰胺(Cy),每天1次,连续3 d;16日龄时,GYKL1～3组饮水口服固元颗粒,每日剂量分别为按体重25 mg/kg(低)、50 mg/kg (中)、100 mg/kg (高);APS组饮水口服阳性对照药物黄芪多糖;Cy组、BC组、VC组饮用生理盐水,各组均连用7 d。23日龄时,除BC组外,其余组均用新城疫(ND)-禽流感(AI)二联灭活疫苗颈部皮下注射,分别于免疫前和免疫后第7,14,21天,每组随机取6只鸡翅下静脉采血,分离血清,β-微量法检测血清中新城疫、禽流感HI抗体效价;称重后分离脾脏、胸腺、法氏囊,计算免疫器官指数;分离脾淋巴细胞,检测淋巴细胞增殖指数。结果表明:4个给药组鸡的体重、脾脏指数、淋巴细胞增殖指数、免疫后14天血清ND、AI的HI抗体效价均显著高于Cy组(P0.05);免疫后14天,4个给药组中,GYKL2组的鸡脾脏指数、胸腺指数、血清ND、AI的HI抗体效价最高;免疫后14,21天,4个给药组中,GYKL2组的鸡脾淋巴细胞增殖指数(LPS诱导)最高,显著高于其余3个给药组(P0.05)。GYKL2组的鸡脾淋巴细胞增殖指数(ConA诱导)在免疫7,14,21天时显著高于Cy组(P0.05),与BC组、VC组间差异不显著(P0.05)。说明免疫抑制鸡饮水口服固元颗粒之后,可使免疫抑制现象得到显著缓解,其中以GYKL2组缓解免疫抑制作用最为明显,固元颗粒中剂量(50 mg/kg)为推荐剂量。     

肉桂油口服液抗沙门菌Ⅲ型分泌系统的作用机制

为分析肉桂油口服液对沙门菌Ⅲ型分泌系统的抑制作用及机制,以鸡白痢沙门菌CVCC1798和鼠伤寒沙门菌SL1344为研究对象,基于主要毒力因子SipA的分泌表型,利用蛋白免疫印迹和荧光定量PCR分析检测肉桂油口服液对沙门菌主要毒力因子SipA和SipB分泌的影响及机制。结果显示,肉桂油口服液在不影响细菌生长的浓度范围内,可抑制沙门菌Ⅲ型分泌系统活性及其入侵细胞的能力。蛋白免疫印迹表明肉桂油口服液降低沙门菌Ⅲ型分泌系统主要效应蛋白SipA和SipB的分泌及调控蛋白HilA的表达。荧光定量PCR分析发现肉桂油口服液抑制沙门菌Ⅲ型分泌系统效应蛋白及调控蛋白的转录水平。结果提示肉桂油口服液可有效抑制Ⅲ型分泌系统效应蛋白及调控蛋白的转录和分泌,表明肉桂油口服液是一种潜在抗沙门菌感染先导复合物。     

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒GP5蛋白羧基端的噬菌体展示及其诱导仔猪产生中和抗体水平

为了发现并验证猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)保护性抗原GP5蛋白羧基端新的中和性表位,本研究运用生物信息学软件预测PRRSV GP5蛋白羧基端的抗原性,全基因合成GP5蛋白羧基端168～198位氨基酸的编码序列,构建了重组噬菌体M13-GP5aa168～198,以临床阳性血清进行Western blot分析重组噬菌体表面展示的GP5aa168～198多肽的免疫反应原性。以1.0×10~(13) PFU/mL重组噬菌体混合氢氧化铝佐剂制备免疫抗原,按照灭活疫苗免疫程序肌肉注射免疫PRRSV抗体阴性断乳仔猪2次,间隔2周,分别于末次免疫后的第2,4和6周采血,分离血清,以临床分离PRRSV强毒株进行中和试验。结果显示:重组噬菌体表面展示的GP5aa168～198多肽具有免疫反应原性,免疫仔猪后,能够诱导仔猪产生较高水平的中和性抗体,为构建PRRSV GP5新型多表位疫苗的开发奠定了基础。     

表达MERS-CoVS1蛋白重组狂犬病病毒rSRV9-MERS_(S1)纯化方法的建立

建立一种可线性放大、应用于表达中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)S1蛋白重组狂犬病病毒rSRV9-MERS_(S1)的规模化纯化方法。将收获的病毒去除细胞碎片、灭活后,分别通过3种方法(醋酸锌沉淀+Sepharose 4FF凝胶过滤层析、500 000中空纤维超滤柱+Sepharose 4FF凝胶过滤层析、500 000中空纤维超滤柱+Cellufine~(TM )Sulfate亲和层析)进行纯化,经比较筛选出一种温和、目的蛋白回收率高、纯度高的纯化方法。结果显示,500 000中空纤维超滤柱+Sepharose 4FF凝胶过滤层析回收的抗原含量最高,50 mL重组病毒原液经纯化后可得到1.82 mg蛋白,杂蛋白去除率达到97.02%,病毒纯度较高,电镜下可见到病毒囊膜刺突。结合成本等方面综合考虑,此方法优于其他2种纯化方法。本试验筛选获得了一种适用于rSRV9-MERS_(S1)的纯化方法,为rSRV9-MERS_(S1)规模化纯化工艺的建立与MERS新型疫苗的研制奠定了基础。     

免疫增强剂蛋虫草粉的喷雾干燥制备

利用喷雾干燥法制备蛋虫草粉。前期成功将北虫草菌种接种在鸡蛋卵黄囊腔内培育出蛋虫草,经消毒、粉碎、打浆、过滤后喷雾干燥,以蛋虫草粉重量为考察指标,采用单因素和正交试验法优化影响产物指标的最佳工艺参数。结果显示,进风温度150℃、进样量300 mL/h、空气流量600 L/h、干燥剂比例4%时,色泽正常,蛋虫草粉质量达最高7.59 g。结果表明,本方法简单、方便,工艺可控、稳定,为将蛋虫草开发成免疫增强剂提供试验依据。     

褐藻多糖对仔猪抗氧化能力、肠道菌群和细胞因子的影响

为研究褐藻多糖对仔猪抗氧化能力、肠道菌群和肠细胞因子的影响,试验选用24头28日龄三元杂交断奶仔猪,随机均分为3个处理组(C、T1和T2组),C组饲喂基础日粮,T1组和T2组分别在基础日粮中添加200 mg/kg和400 mg/kg的褐藻多糖。试验期为21 d。结果表明:C组、T1组和T2组仔猪末重、日增重、日采食量和料重比均无显著差异(P0.05);T2组仔猪血浆总抗氧化能力(T-AOC)显著高于C组(P0.05);T1组仔猪血浆丙二醛(MDA)水平显著低于C组(P0.05),T2组仔猪血浆MDA水平极显著低于C组(P0.01);C组、T1、和T2组盲肠大肠杆菌、沙门氏菌、乳酸杆菌、双歧杆菌数量均无显著差异(P0.05);T1组盲肠白介素-1β(IL-1β)和白介素-22 (IL-22)水平均显著或极显著低于C组(P0.05或P0.01),T2组盲肠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β和IL-22水平均显著或极显著低于C组(P0.05或P0.01),T1、T2及C组盲肠白介素-10 (IL-10)水平均无显著差异(P0.05)。结果提示,饲料中添加褐藻多糖能提高仔猪抗氧化功能,降低盲肠TNF-α、IL-1β和IL-22水平;褐藻多糖的添加量以400 mg/kg为最佳。     

围产期奶牛高酮血症血液生化指标的监测

本试验选取30头年龄、胎次相近的健康围产期荷斯坦奶牛,根据分娩时间选取产前21 d、14 d、7 d、分娩当天和产后7 d、14 d、21 d共7个时间点,跟踪分析围产期奶牛部分血液生化指标变化规律。另选取171头年龄、胎次相近的围产期奶牛,根据测定的部分血液生化指标,筛选出高酮血症组(10头)与健康奶牛对照组(10头)进行统计学分析,找出与高酮血症相关性血液生化指标并进行ROC诊断评价,得出Cut-off point值。最后分析疾病危险因素,以OR值评价该指标对判定疾病的危险系数。结果表明,高酮血症组产前无发病,在产后14 d达最高发生率(10%),随后下降至4.8%,从时间来看,高酮血症的发生一般在分娩后1～3周,产后14 d最高;确定了高酮血症诊断的首选指标为BHBA、NEFA,辅助指标及cut-point值分别为DBIL(1.15 mmol/L)、AST(73.50 IU/L);危险因素分别为NEFA(OR=7.72),TG(OR=7.03),GGT(OR=6.71),LDH(OR=4.45),P(OR=6.23)。本试验为建立完整有效的奶牛群体监测体系对预防围产期奶牛生产性疾病具有现实意义。