鸡喹乙醇中毒对血中自由基水平及抗氧化系统的影响

 对鸡喹乙醇中毒时，血中自由基（MDA）及抗氧化系统的变化进行了研究；艾维因鸡随机分为两组，正常对照组（Ⅰ组），饲喂基础日粮；喹乙醇处理组（Ⅱ组），饲喂基础日粮，且以15 mg喹乙醇/kg体重处理Ⅱ组，连续处理42 d，每天1次，Ⅰ，Ⅱ组每7 d采血1次，共采血6次，测定MDA及抗氧化系统各指标水平；结果：第2～6次Ⅱ组MDA水平明显高于Ⅰ组（P<0.05，P<0.01），而Ⅱ组T-AOC,GSH,T-SOD,CAT,GST,GSH-PX水平明显低于Ⅰ组（P<0.05，P<0.01）。第1次各指标在Ⅰ，Ⅱ组间无显著性差异（P＞0.05）。鸡喹乙醇中毒时可引起血中自由基水平（MDA）明显升高，而抗氧化系统各指标水平明显下降。     

喹乙醇对断奶仔猪生产性能的影响及亚急性毒性试验研究

 试验选用38日龄的杜长大三元杂交仔猪90头［(9.36±0.045)kg左右］,试验期为39d,随机分成3个组,第1组为空白对照组(不含任何药物添加剂,即基础日粮组),第2组为基础日粮+喹乙醇100mg/kg组,第3组为基础日粮+喹乙醇200mg/kg组。生长性能试验结果表明,日增重随喹乙醇添加量的增加,而明显减少,3个组间日增重均差异极显著(P<0.01)。料增重比随喹乙醇添加量的增加而明显增高,各组间差异极显著(P<0.01)。日采食量、粗蛋白消化率无显著差异(P>0.05)。测定血清肝、肾功能生化指标结果, 喹乙醇对仔猪的生理效应是存在的,只是在不同的试验中表现出程度上的不同而已。     

粪源抗生素金霉素和喹乙醇在养殖水体中的残留及对锦鲤的生态毒理效应研究

用含不同剂量金霉素和喹乙醇的猪粪饲喂锦鲤,分别测定摄食10、20和30d时肌肉组织中抗生素含量、体表和消化道微生物数量,试验结束时对肝脏中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性和脂质过氧化物丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量进行了测定。结果表明,猪粪中金霉素和喹乙醇在养殖水体中溶出存在较大差异,从试验第1d到结束养殖水体中喹乙醇浓度Ⅲ和Ⅳ组分别为0．05-0．32mg·kg^-1和0．12～0．70mg·kg^-1,锦鲤肌肉组织中喹乙醇浓度Ⅲ和Ⅳ组在试验的10、20和30d分别为1．87、5．25、3．83mg·kg^-1和2．96、4．33、mg·kg^-1。没有在水环境和锦鲤体内检测到金霉素。锦鲤体表和消化道微生物随着加样次数增加,数量也急剧上升。猪粪中的成分能显著降低SOD酶活性,增加MDA含量,而加入金霉素和喹乙醇也未能使锦鲤肝脏SOD活性和MDA含量恢复到机体正常水平。     

高效液相色谱法测定饲料中喹乙醇含量

通过实验比较,认为用高效液相色谱法测定饲料中喹乙醇含量在370 nm波长下较在260 nm波长下测定方法分离度更高、回收率更好.     

高效液相色谱质谱联用法测定饲料中喹乙醇

本实验建立了饲料中喹乙醇的固相萃取和高效液相色谱法定量检测及质谱确证的方法。饲料经5%甲醇溶液提取,离心,过滤,移取2mL滤液注入已活化的3mLHLB固相萃取小柱,分别用3mL0.02mol/L的盐酸溶液和5%甲醇溶液淋洗,用2mL40%甲醇溶液洗脱,洗脱液经微孔滤膜过滤后上机定量检测,同时滤液进行质谱确证。试验结果表明,喹乙醇浓度为0～100μg/mL时具有良好的线性关系;喹乙醇回收率为86%～100%。     

HPLC法测定饲料中喹乙醇的研究

建立了饲料中喹乙醇含量的HPLC测定法，流动相为15％甲醇，流速0．9mL／min，进样量5μL，检测波长260nm。在10～100μg／mL范围内，喹乙醇浓度与峰面积呈良好的线性关系，r为0．99998，回收率85．8％～99．4％，批内变异系数≤5．7％，批间变异系数≤1．1％。24批鸡配合料中未检出喹乙醇，62批鱼饲料中喹乙醇的检出率为8．1％，含量范围为19．7～42．0mg／kg。该方法具有很好的分离度，方法简便、准确、重复性好。     

超高效液相色谱-串联质谱法检测扶正解毒散剂中非法添加物喹乙醇、乙酰甲喹

建立了扶正解毒散中非法添加喹乙醇、乙酰甲喹检测的UPLC-MS/MS方法。样品经60%乙腈提取稀释后,采用ACQUITYUPLCRBEHC18色谱柱为分离柱,质谱正离子扫描分析测定。结果显示,喹乙醇、乙酰甲喹在5~200ng/mL的范围内线性关系良好(R2=0.9984,R2=0.9995);样品检出限为25μg/mL,定量限为50μg/mL。在80、100、120μg/mL添加水平的回收率为90%~103%,批内批间变异系数均小于10%。本方法灵敏、快速、重现性好,适用于扶正解毒散中非法添加喹乙醇、乙酰甲喹的检测。     

HPLC-VWD法测定猪粪中喹乙醇的残留

建立了猪粪中喹乙醇残留的高效液相色谱检测方法,猪粪经蒸馏水提取震荡后,加入硼砂和硫酸锌等净化剂净化样品,离心,过0.22 μm滤膜,HPLC检测,以ZORBAX SB-C18色谱柱为固定相,12%甲醇水溶液为流动相,在波长382 nm状态下进行检测.喹乙醇浓度为0.05～10.0 μg/ml时与色谱峰面积呈线性关系,绝对系数R2=0.999 9.在0.6 ～3.0 mg/kg浓度添加范围内,回收率为70.07%～83.44%,日内变异系数为1.20%～4.38%,日间变异系数为4.64%～9.62%,样品的检出限为0.4 μg/kg.     

猪饲料中喹噁啉类药物酶联免疫检测方法的建立

饲料中喹乙醇、卡巴氧等喹噁啉类药物的使用易导致在动物可食性组织的残留,具有致癌、致畸、致突变性,WHO、FAO和EU已禁止使用,我国也对其在动物肌肉和肝脏中的最大残留限量(MRL)做了规定,因此,有必要对此类药物进行监测。通过对包被原QCA-OVA、抗QCA-BSA抗体、羊抗兔HRP-IgG的工作浓度以及反应时间进行优化,建立了饲料中喹噁啉类药物的ELISA分析方法。ELISA方法的线性范围为0.2~625mg/L,IC50为40.3 mg/L,与喹乙醇、卡巴氧、痢菌净、喹烯酮和喹赛多等的交叉反应率分别为100%、244.2%、98.8%、319.6%和266.9%,猪饲料中喹噁类药物的LOD为1.46~7.38 mg/kg,回收率为71.0%~92.3%,批间变异系数为9.73%~20.0%。对5个厂家饲料样品检测结果与HPLC方法一致。本方法可检测饲料中的喹噁啉类药物残留,样品处理方法简单省时,结果灵敏可靠。     

喹乙醇致线粒体DNA基因损伤的SSCP分析

为研究喹乙醇对mtDNA基因的致突变效应,以1日龄的健康艾维因商品代肉鸡为试材,运用改进的碱变性法提取肝脏的mtDNA,设计4对引物扩增mtDNA的tRNALeu(UUR)t、RNAIlet、RNALys、ATPase8 4个基因,同时运用SSCP技术对扩增产物进行突变分析。结果表明:喹乙醇处理Ⅵ组tRNALeu(UUR)有突变发生,序列测定结果表明该突变为4 007位的C→A点突变,其他各组的tRNALeu(UUR)基因无任何突变发生。该结果提示喹乙醇中毒可以导致mtDNA tRNALeu(UUR)基因突变。