大豆饲料产品中主要抗营养因子含量的检测与分析

本试验旨在应用间接竞争酶联免疫吸附测定(ELISA)法以及色谱法测定不同加工工艺的大豆饲料产品中主要大豆抗营养因子大豆球蛋白、β-伴大豆球蛋白和胰蛋白酶抑制因子以及大豆中蔗糖、棉子糖和水苏糖的含量。采用ELISA试剂盒对国内257份大豆制品中大豆球蛋白、β-伴大豆球蛋白和胰蛋白酶抑制因子含量进行检测与分析;利用离子色谱建立了大豆产品中蔗糖、棉子糖和水苏糖的灵敏、准确的同步测定法,并对国内92份大豆制品中寡糖含量进行检测与分析。结果表明:发酵豆粕、膨化大豆、大豆浓缩蛋白和大豆分离蛋白中大豆球蛋白、β-伴大豆球蛋白和胰蛋白酶抑制因子含量相对较低;本试验所建立的离子色谱同步测定大豆中蔗糖、棉子糖和水苏糖的方法具有灵敏度和准确性高、重现性好的优点,适用于大豆寡糖的测定;通过对实际样品的检测和分析,发现发酵豆粕和大豆分离蛋白中3种大豆寡糖含量均相对较低。本试验所得到不同加工工艺的大豆产品中主要抗营养因子含量的相关数据将为大豆在畜禽饲料中的高效利用提供很好的技术支撑。     

鸡蛋粉在猪生产中的应用研究进展

鸡蛋粉是一种良好的蛋白质资源,富含免疫活性物质,在减少动物腹泻、增强机体免疫力方面具有重要功效。本文综述了鸡蛋粉的生产工艺、营养价值以及鸡蛋粉和特异性卵黄抗体在猪生产中的应用现状。     

HPLC测定NaOH水解法碘化酪蛋白中MIT、DIT和T4

建立了氢氧化钠水解法碘化酪蛋白中MIT、DIT和T4的高效液相色谱检测方法。在考察的浓度范围内（0.1～20μg/mL）,MIT、DIT和T4均保持较好的线性（r〉0.999）;检出限分别为0.5ng（MIT）和0.25ng（DIT,T4）;定量限分别为1.0ng（MIT）和0.5ng（DIT,T4）。碘化酪蛋白经4mol/L的氢氧化钠溶液110℃水解,水解时间在16～32h,MIT、DIT和T4得率基本保持稳定。定量测定结果和水解稳定性试验显示,MIT和DIT较T4有显著的高含量和高稳定性,更适合用作监测碘化酪蛋白的标识物。     

夹心ELISA快速检测蓖麻粕中残留的蓖麻毒素

通过实验建立了蓖麻粕中残留蓖麻毒素的夹心ELISA检测方法(双抗原夹心法)。蓖麻粕样品经pH值7.4的磷酸盐缓冲液(PBS)提取,使蓖麻毒素充分溶出后可直接用于ELISA检测。在本文确定的实验条件下,蓖麻粕中杂质对蓖麻毒素的检测无显著影响;方法检出限小于2.5ng/ml,以蓖麻毒素浓度(5～80ng/ml)对数做校准曲线,R2=0.995。经高压灭菌锅0.1MPa处理1h的蓖麻粕中未检出蓖麻毒素,并以此作为蓖麻粕的阴性对照,对实际样品进行了测定。     

致仔猪过敏性大豆抗原蛋白β-conglycinin单克隆抗体的制备与鉴定

研究以人工合成的对应于β-conglycinin分子α'亚基上的一段抗原表位肽(RPQHPER,78-84α')作为半抗原,与载体蛋白(OVA)交联后,作为免疫原制备了致仔猪过敏性大豆抗原蛋白β-conglycinin的单克隆抗体(Mab 6G4),并应用酶联免疫吸附等方法进行鉴定。结果表明,制备的单抗Mab 6G4属于IgG1;该抗体能与大豆β-conglycinin特异性结合,IC50为4.7 ng/mL,并对β-conglycinin表现出较强的亲和力,亲和常数达6.9×109 L/mol。因此,制备的单克隆抗体Mab 6G4为分析大豆制品中β-conglycinin的含量及探讨β-conglycinin对仔猪的致敏机理提供了一个潜在的分析工具。     

羟基蛋氨酸钙含量测定方法比较研究

本文对测定饲料添加剂羟基蛋氨酸钙含量的3种方法:专属指示剂法、自身指示剂法和电位滴定法进行了比较研究。结果表明,专属指示剂法和电位滴定法重现性比较好,测定结果分别略高于标准值0.08%～0.27%和0.11%～0.30%,而自身指示剂法的重复测定间变异比较大,测定结果比标准值低0.25%～0.45%。     

凯氏定氮法与杜马斯燃烧法测定大豆粗蛋白的比较研究

豆粕是现代畜禽养殖业基础日粮的主要蛋白来源。为比较目前最常用的粗蛋白含量检测技术的优劣,实验采自中国不同地区的162种大豆样品为实验材料,分别用凯氏定氮法和杜马斯燃烧法测定其粗蛋白含量,分析2种方法的差异,确定一种快速、安全的测定饲料原料粗蛋白含量的方法。结果表明:实验样品大豆粗蛋白均值在37%左右,最高可达49.04%(杜马斯燃烧法)。杜马斯燃烧法与凯氏定氮法在测定大部分大豆样品粗蛋白时无显著性差异(P>0.05),变异系数(CV)<1%,结果的相关系数为0.9789;燃烧法的变异系数更小(CV<0.04%),测定结果更加稳定。因此,在本试验中所选定的样品范围内,作为测定饲料原料粗蛋白含量的方法,两种方法可以相互替代,其中杜马斯燃烧法的稳定性优于凯式定氮法;至于2种方法的准确性比较需要进一步的研究。     

饲料中过碳酰胺的测定

1 前言 过碳酰胺(Percarbamide)是过氧化氢和尿素的一种晶体加合物,又名尿素过氧化氢(UreaHydrogen Peroxide).它是精细化工产品的一种新品种,在化妆品工业及医药工业上有比较广泛的用途.     

液相色谱-电喷雾质谱检测猪尿液中的蓖麻碱

试验建立了猪尿液中蓖麻碱的液相色谱-电喷雾质谱检测方法。尿液样本经聚合物填料固相萃取小柱(反相保留机制)净化,消除了基质的离子抑制效应,达到使用外标法定量蓖麻碱的目的。蓖麻碱的检测使用阳离子方式,以m/z165为定量离子,m/z138、84和82为佐证离子,做选择离子检测。在考察的浓度范围内(0.005～1.00μg/ml),方法有良好的线性(R2>0.99),检出限为6pg,定量限为15pg,添加回收率96.4%～101%,相对标准偏差3.74%～5.29%。动物试验显示,猪每千克体重饲喂0.2g的蓖麻粕后,在监测的5～20h内,其尿液中蓖麻碱保持相对较高的浓度。     

高效液相色谱质谱联用法测定饲料中喹乙醇

本实验建立了饲料中喹乙醇的固相萃取和高效液相色谱法定量检测及质谱确证的方法。饲料经5%甲醇溶液提取,离心,过滤,移取2mL滤液注入已活化的3mLHLB固相萃取小柱,分别用3mL0.02mol/L的盐酸溶液和5%甲醇溶液淋洗,用2mL40%甲醇溶液洗脱,洗脱液经微孔滤膜过滤后上机定量检测,同时滤液进行质谱确证。试验结果表明,喹乙醇浓度为0～100μg/mL时具有良好的线性关系;喹乙醇回收率为86%～100%。