H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的原核表达及其ELISA检测方法的建立

采用RT-PCR技术扩增了禽流感病毒（AIV）A／Goose／HLJ／p46／2003（H5N1）的NSl基因，将其克隆于融合蛋白表达载体pMAL-c2X上，转化DH5α大肠埃希氏菌感受态细胞，经BamHⅠ和HindⅢ双酶切鉴定及序列分析，表明筛选到了重组质粒pc2X-NS1。SDS-PAGE电泳结果显示，重组质粒转化TB1大肠埃希氏菌后，经0．3mmol／L的IPTG诱导，融合蛋白MBP-NS1得到大量表达，融合蛋白以可溶形式存在，分子质量约为67ku。Western-blotting检测结果表明，融合蛋白MBP-NS1能够与H5N1亚型AIV活病毒感染康复鸭血清发生特异性反应，而不能够与H5N1亚型AIV灭活疫苗免疫鸭血清发生反应。试验初步建立了以纯化的融合蛋白MBP-NS1为包被抗原的间接ELISA检测方法，为AIV灭活疫苗免疫家禽与AIV感染家禽的鉴别诊断奠定了基础。     

猪生殖与呼吸综合征病毒M基因和N基因的表达

将猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的M基因和N基因从重组质粒pMD18-T—M—N中亚克隆至pBV220原核表达栽体上，成功构建了重组表达质粒pBVM—N。将pBVM—N转化大肠埃希氏菌DH5α感受态细胞．重组菌经温度敏感诱导表达，其细菌裂解物经SDS—PAGE可检测到分子质量约为19ku的目的蛋白，与M基因表达产物一致；经蛋白质分析软件Bandscan分析，其表达量可达19．1％；Western-blotting分析表明，该重组蛋白可被兔抗PRRSV血清所识别，与预期的M基因表达产物相一致，而N基因未获表达。     

鸡传染性腔上囊病病毒VP2基因在昆虫细胞中的表达

为了深入研究鸡传染性腔上囊病病毒（IBDV）VP2基因的结构和功能,利用Bac-to-Bac系统研制出含有VP2基因的重组杆状病毒rBac-VP2,将rBac-VP2感染Sf9细胞,并用抗IBDV VP2特异性单克隆抗体经间接免疫荧光试验检测,证实感染重组病毒Sf9细胞能高效表达IBDV VP2基因产物;Western-blotting分析结果表明,VP2基因表达产物的分子质量约为40 ku.     

我国奶业应保持稳健发展势态

近几年山东乃至全国的奶牛业发展迅猛，2004年底山东省奶牛存栏70万头，牛奶产量达到180万吨，人均占有牛奶达到20公斤，仅次于北京、上海。但是自2004年以来奶业出现了一些新的情况，最大的问题是奶牛价格下滑，奶价不稳定，养牛效益萎缩甚至亏本，不少地方出现了倒牛奶、卖奶牛、杀奶牛的现象，再加上一些宣传上的片面误导，导致部分企业和养殖户对奶牛业产生了悲观失望的心理，甚至认为奶牛产业今后没法再发展了。带着疑问，记者采访了山东省畜牧办公室副主任张洪本。     

关于扶持家禽业发展的若干政策

新华网北京11月16日电 国务院总理温家宝16日主持召开国务院常务会议会议听取了发展改革委关于扶持家禽业发展若干意见的汇报。会议认为，今年入秋以来我国局部地区发生的高致病性禽流感疫情，已对全国家禽业的稳定发展带来明显冲击。为加强疫情防控工作，减少养殖企业和农户损失，帮助其尽快恢复正常生产，会议决定。按照企业和农户生产自救与国家适当扶持相结合、制定应急扶持措施与建立稳定发展长效机制相结合的原则。采取以下九个方面的扶持措施：     

构建和谐畜牧业

畜牧业作为一个古老而又不断进步、具有巨大活力的产业，一直是国民经济中的重要产业部分。没有畜牧业的发展，农业难以实现现代化；没有畜牧业的发展，人民生活质量难以得到提高；没有畜牧业的发展，农牧民的增收缺少重要来源；没有畜牧业的发展，少数民族地区也难以社会稳定。因此畜牧业既是一个学术精深广博的重要学科，也是对农业乃至国家经济与社会发展影响深刻的重要领域，事关和谐社会的构建，事关小康社会的建设。因此，我们要以科学发展观为指导，加快推进我国畜牧业由传统生产方式向现代生产方式转变，进一步提高畜牧业科技含量，促进畜牧业持续、快速、协调、健康发展。这是建设现代畜牧业的必然要求，是维护公共卫生安全的重要保障，是提高畜产品竞争力的关键因素，是增加农民收入的途径，也是维持我国国民生产总值的生产需要。     

对鳞翅目害虫有活性的cry1C基因的克隆和表达

在鉴定苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis，简称Bt)Btc001菌株cry基因型的基础上，构建了Btc001菌株质粒DNA HindⅢ片段的文库，并利用聚合酶链式反应-限制性酶切片段多态性(PCIR-RFIP)方法筛选出含有crylC6全长基因的13．5kb大片段，酶切分析得到该片段的物理图谱，BamHI和EcoRI切完成了6．5kb含全长基因的亚克隆，并对这条6．5kb片段亚克隆、测序，序列在国际核酸序列数据库(GenBank)登记(AY007686)，并由Bt杀虫晶体蛋白基因国际命名委员会命名为cry1Cb2基因。根据序列设计了一对用于扩增全长基因的引物S581CB和S381CB，扩增产物插入表达载体pET-21b中，诱导后在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达。表达产物对小菜蛾(Plutella xylostella)表现出较高活性，LC50达到7．9μg/ml。     

菜豆普通花叶病毒长豇豆分离物外壳蛋白基因的序列分析及原核表达

 根据普通生物学和血清学特性,长豇豆病毒病的病原被鉴定为黑眼豇豆花叶病毒(Blackeye cowpea mosaic virus,Bl CMV)、豇豆蚜传花叶病毒(Cowpea aphidborne mosaic virus,CABMV)和黄瓜花叶病毒(Cucumbermosaic virus,CMV)。     

加快青海省海北州畜牧业科技推广刍议

畜牧业是青海省海北州的经济支柱。十一届三中全会以来，随着党的富民政策的贯彻落实，以及科技实用技术的推广应用和畜牧业基础设施建设的加强，海北州畜牧业连续20年夺得丰收，进入全面稳定发展阶段：鉴于此，笔者就新形势下如何进一步加快该州畜牧业科技推广应用，从而促进该州畜牧业科技快速发展谈点个人看法：     

秀丽纤杆线虫在寄生性线虫抗原研究中的应用

秀丽纤杆线虫 (Caenorhabditis elegans)是一种模式线虫 ,目前广泛应用于寄生性线虫基因的功能研究 ,并且还被用于捻转血矛线虫等寄生性线虫疫苗侯选抗原基因的表达和耐药性产生机制方面的研究