| H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的原核表达及其ELISA检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 杨涛,刘明,张云,刘春国,杜绍范.H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的原核表达及其ELISA检测方法的建立[J].中国兽医科技,2005,35(8):585-589. |
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| 作者姓名： | 杨涛 刘明 张云 刘春国 杜绍范 |
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| 作者单位： | [1]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨150001 [2]沈阳农业大学畜牧兽医学院,辽宁沈阳110161 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划（863）项目（2003AA241110）;国家重点科技攻关计划项目（2004BA519A19） |
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| 摘 要： | 采用RT-PCR技术扩增了禽流感病毒（AIV）A／Goose／HLJ／p46／2003（H5N1）的NSl基因，将其克隆于融合蛋白表达载体pMAL-c2X上，转化DH5α大肠埃希氏菌感受态细胞，经BamHⅠ和HindⅢ双酶切鉴定及序列分析，表明筛选到了重组质粒pc2X-NS1。SDS-PAGE电泳结果显示，重组质粒转化TB1大肠埃希氏菌后，经0．3mmol／L的IPTG诱导，融合蛋白MBP-NS1得到大量表达，融合蛋白以可溶形式存在，分子质量约为67ku。Western-blotting检测结果表明，融合蛋白MBP-NS1能够与H5N1亚型AIV活病毒感染康复鸭血清发生特异性反应，而不能够与H5N1亚型AIV灭活疫苗免疫鸭血清发生反应。试验初步建立了以纯化的融合蛋白MBP-NS1为包被抗原的间接ELISA检测方法，为AIV灭活疫苗免疫家禽与AIV感染家禽的鉴别诊断奠定了基础。
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| 关 键 词： | 禽流感病毒 NS1基因 原核表达 酶联免疫吸附试验 |
| 文章编号： | 1000-6419（2005）08-0585-05 |
| 收稿时间： | 2005-04-22 |
Prokaryotic expression of NS1 gene of H5N1 avian influenza virus and development of direct ELISA |
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| Yang Tao;Liu Ming;Zhang Yun;Liu ChunGuo;Du ShaoFan.Prokaryotic expression of NS1 gene of H5N1 avian influenza virus and development of direct ELISA[J].Chinese Journal of Veterinary Science and Technology,2005,35(8):585-589. |
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| Authors: | Yang Tao;Liu Ming;Zhang Yun;Liu ChunGuo;Du ShaoFan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | influenza virus NS1 gene prokaryotic expression ELISA |
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