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对鳞翅目害虫有活性的cry1C基因的克隆和表达
引用本文:宋福平,张杰,韩岚岚,高继国,黄大昉.对鳞翅目害虫有活性的cry1C基因的克隆和表达[J].植物保护学报,2003,30(2):161-165.
作者姓名:宋福平  张杰  韩岚岚  高继国  黄大昉
作者单位:1. 中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京,100094
2. 东北农业大学生命科学院,哈尔滨,150030
3. 中国农业科学院生物技术研究所,北京,100081
基金项目:863计划项目(2001AA214011)
摘    要:在鉴定苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)Btc001菌株cry基因型的基础上,构建了Btc001菌株质粒DNA HindⅢ片段的文库,并利用聚合酶链式反应-限制性酶切片段多态性(PCIR-RFIP)方法筛选出含有crylC6全长基因的13.5kb大片段,酶切分析得到该片段的物理图谱,BamHI和EcoRI切完成了6.5kb含全长基因的亚克隆,并对这条6.5kb片段亚克隆、测序,序列在国际核酸序列数据库(GenBank)登记(AY007686),并由Bt杀虫晶体蛋白基因国际命名委员会命名为cry1Cb2基因。根据序列设计了一对用于扩增全长基因的引物S581CB和S381CB,扩增产物插入表达载体pET-21b中,诱导后在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达。表达产物对小菜蛾(Plutella xylostella)表现出较高活性,LC50达到7.9μg/ml。

关 键 词:苏云金芽孢杆菌  小菜蛾  crylC基因  鳞翅目  PCIR-RFIP  克隆  表达
收稿时间:2002/4/16 0:00:00
修稿时间:2002年4月16日

Cloning and expression of cry1C gene from Bt strain active to Lepidoptera pests
Song Fuping,Zhang Jie,Han Lanlan,Gao Jiguo and Huang Dafang.Cloning and expression of cry1C gene from Bt strain active to Lepidoptera pests[J].Acta Phytophylacica Sinica,2003,30(2):161-165.
Authors:Song Fuping  Zhang Jie  Han Lanlan  Gao Jiguo and Huang Dafang
Institution:State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of Plant Protection, CAAS, Beijing 100094, China,State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of Plant Protection, CAAS, Beijing 100094, China,State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of Plant Protection, CAAS, Beijing 100094, China,Department of life Sciences, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China and Institute of Biotechnology Research, CAAS, Beijing 100081, China
Abstract:
Keywords:PCR-RFLP  crylCb gene  Bacillus thuringiensis  Plutella xylostella  
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