酵母菌生长曲线的测定及其转葡萄芪合酶基因重组菌遗传稳定性的检测

采用分光光度计比浊法测定酿酒酵母INVSc1的生长曲线,确定菌体生长规律;并以此为依据,制备酿酒酵母感受态细胞,进行葡萄芪合酶基因酿酒酵母重组质粒的转化;采用菌落PCR法快速鉴定阳性重组子,并进一步检测重组质粒在重组菌中的稳定性.结果表明,于酵母菌对数生长中期(OD600为0.8时)进行重组质粒的转化,可以得到较高的转化效率;在0～72 h发酵培养过程中重组质粒在宿主菌中的稳定性达到100%.这为后续工作开展葡萄芪合酶基因在酿酒酵母中的诱导表达研究奠定了技术基础.     

柠檬酸对蛋鸡消化道内容物pH和盲肠菌群的影响

选择20周龄宝万斯高兰褐蛋鸡810只,进行6处理3重复单因子试验,分别饲喂添加0(对照组), 0．5,1．5．2．5,3．5和5．5 g／kg柠檬酸(CA)的日粮,于试验第1,2,10和15周周末分别从对照组,0．5．2．5和5．5 g／kg CA添加组每重复选取一只鸡宰杀,测定其消化道内容物pH和盲肠菌群数,研究CA对蛋鸡H粮、消化道pH和盲肠微生物菌群的影响。结果表明,添加0．5～5．5 g／kg CA可显著(P<0．05)或极显著(P<0．01)降低日粮pH;5．5 g／kg CA在添加1周时可显著降低肌胃pH(P<0．05),其余添加组鸡肌胃、小肠、盲肠pH无显著差异(P>0．05);添加2．5,5．5 g／kg CA可有效降低盲肠大肠杆菌数,5．5 g／kg CA在添加1周时可显著提高盲肠乳酸杆菌数(P< 0．05),之后这种作用随添加时间的延长而减小。     

日粮蛋白质水平对早期断奶仔猪生产性能、粪便微生物及血液生化指标的影响

采用单因素试验设计,选用(28±3)日龄、起始体重约(8.2±0.9)kg的二元杂种猪(L×Y)90头,随机分为5个处理,3重复/处理,6头/重复,分别饲喂粗蛋白质水平为16.5%、17.6%、18.7%、19.8%、20.9%的等能(3 300 MJ/kg)等氨基酸模式(Dlys∶D-SAA∶DThr∶DTrp=100∶57∶64∶18)的日粮,进行为期28d的饲养试验,研究5种不同粗蛋白质水平日粮对早期断奶仔猪生产性能、粪便微生物及部分血液生化指标的影响。结果表明,CP水平从16.5%增加至18.7%,仔猪平均日增重、平均日采食量线性增加,而料肉比线性降低;CP从18.7%进一步增加至20.9%,仔猪平均日增重、平均日采食量线性降低,料肉比线性增加,生产性能的各项指标呈二次曲线变化,蛋白质水平为18.7%时各项生产性能指标达到最优,因此以生产性能作为评价指标早期断奶仔猪最适宜的CP水平为18.7%。仔猪腹泻率,粪便大肠杆菌的数量以CP水平20.9%最高;血清总蛋白、白蛋白含量以及白蛋白/球蛋白先增加后降低,CP19.8%组含量最高,但未与CP18.7%达显著差异;血清尿素氮先增加后降低,CP19.8%组最高,但各组差异不显著(P>0.05)。     

芪合酶基因的克隆及其酵母表达载体的构建

应用基因工程技术将从中国野生属葡萄种高抗白粉病的华东葡萄白河-35-1中分离出的芪合酶基因cDNA片段（Stilbene synthase，STS）进行PCR扩增；把回收的目的基因PCR产物定向插入克隆载体pGEM-TEasy中进行测序与序列分析；采用定向克隆的方法将芪合酶基因克隆到大肠杆菌-酵母菌穿梭型酿酒酵母表达载体pYES6／CT上，转化大肠杆菌，提取阳性重组质粒转化酿酒酵母菌（Saccharomyces cerevisiae）菌株INVScl，酵母菌落PCR电泳结果显示，在约1200bp处有一条亮带，证明芪合酶基因酵母表达载体构建成功，为后期工作的开展奠定了基础，并为开发一种含有白藜芦醇生物活性成分的酵母微生态制剂提供了重要的实验素材。     

顺反子序列bioⅠ-orf 2-orf 3在枯草芽孢杆菌染色体中的整合

将来源于枯草芽孢杆菌的顺反子序列bioⅠ-orf 2-orf 3克隆到含氯霉素基因的大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭质粒pE 3中,并在顺反子序列上游插入一个强麦芽糖启动子Pglv,构建成枯草芽孢杆菌整合载体pLHX8,电转化枯草芽孢杆菌受体菌1A747.从5μg/ml的氯霉素抗性平板上挑取两株转化子,通过基因组PCR鉴定,确定顺反子序列已经整合到枯草芽孢杆菌染色体上.     

不同抗生素组合对哺乳仔猪生产性能及肠道菌群的影响

选择20窝仔猪,随机分为5组,每组4窝,研究饲料中添加不同抗生素组合对哺乳仔猪生产性能和肠道菌群的影响,形成5个处理,即:土霉素 阿美拉霉素组、金霉素 黄霉素组、土霉素 黄霉素组、喹乙醇 黄霉素组、磺胺嘧啶 三甲氧苄胺嘧啶组。分别在21、35日龄取粪样进行大肠杆菌、乳酸杆菌测定。结果表明:在哺乳前期,各不同抗生素组合对仔猪日增重影响不显著(P>0.05),在哺乳后期,50 mg/kg土霉素 20 mg/kg黄霉素组对日增重影响显著(P<0.05),试验全期100 mg/kg喹乙醇 20 mg/kg黄霉素组抗腹泻效果显著(P<0.05);21、35 d,磺胺嘧啶 三甲氧苄胺嘧啶能显著(P<0.05)抑制大肠杆菌,喹乙醇 黄霉素组乳酸杆菌高于其他组。     

柠檬酸在改善日粮磷利用率中的应用

猪、禽对日粮中以植酸磷形式存在的磷利用率限低,但为了满足动物生长和生产对磷的需要,必须在饲料中添加昂贵的无机磷,而粪便中排出的大量有机磷对土壤和水源又造成了严重污染。因此,如何提高植酸磷的利用率、减少无机磷的添加、降     

应用酵母培养物调控瘤胃微生物区系研究进展

通过调控瘤胃微生物区系来加强反刍动物对粗饲料的利用近年来成为研究的热点。目前存在许多方法用以调控瘤胃微生物区系，如应用离子载体和抗生素。但对于饲料工业中应用抗生素所引起的问题和寻求安全饲料的广泛关注，促使研究者致力于发展一种新型非抗生素或“天然”的饲料添加剂。微生物饲料添加剂，即直接饲喂微生物（DFM），完全满足发展需求，因而被推到了历史前台。DFM包括细菌、酵母（真菌）等，许多研究证明DFM使用效果良好，尤其是酵母培养物（YeastCulture，YC）。YC是经严格控制条件的液体、固体二级发酵或直接在固体培养…     

全收粪法与Cr2O3指示剂法测定家禽表观代谢能方法比较

通过全收粪法和Cr2O3指示剂法,对20种不同来源玉米-豆粕型日粮的肉鸡的表观代谢能(AME)进行测定.结果表明全收粪法测定玉米AME在绝干基础上是14.92～16.10 MJ/kg,平均15.60 MJ/kg,RSD为2.15%;指示剂法所测玉米AME在绝干基础上是15.05～16.16 MJ/kg,平均15.65 MJ/kg,RSD为2.11%;两种方法所测代谢能值相关分析,相关方程式AME(全)=1.00142×AME(指)-0.06918(R2=0.9708),二者高度相关;配对T检验,指示剂法比全收粪法值高,但差异不显著(P＞0.05).可见,Cr2O3指示剂法与全收粪法在测定肉禽AME时具有高度相关性,指示剂法可作为一种快速准确的评定家禽表观代谢能的方法在试验研究和生产实践中推广.     

氢氧化钙与食盐结合处理稻草效果更好

我们于2000年6～10月在中国农业科学院畜牧所进行了试验,分别用0%(A)、4%氢氧化钙(B)、4%氢氧化钙加1%食盐(C)、4%氢氧化钙加2%食盐(D)处理稻草,水分调至45%,填紧压实,密封保存于贮罐内1个月,然后用瘤胃尼龙袋法测定稻草有效降解率,分析相关营养指标。试验结果表明,复合处理效果优于单独用氢氧化钙处理稻草的效果,有效降解率随着食盐添加量的提高而提高,表明食盐对提高稻草营养价值有重要作用。4%的氢氧化钙是处理秸秆比较理想的浓度,所以本试验未设碱化处理梯度。提高干物质有效降解率36.80%,提高中性洗涤纤维降解率7.54%。氢氧化钙与食…