有效微生物群对仔猪生产性能的影响初探

对产后母猪和断奶仔猪饲喂有效微生物菌群(EM),研究其对仔猪生产性能的影响。从产前7d开始给母猪基础饲料中添加5mL/kg的EM菌液,选产仔数不少于8头的3头母猪及其仔猪连续饲喂EM菌28d,仔猪进行断奶,统计母猪的增重、仔猪初生重、断奶重,仔猪成活率等,分析添加EM菌后对母猪生产性能的影响。在这24头断奶仔猪饲料中添加EM菌的饲料,饲喂至60日龄,统计仔猪的增重、采食量、料重比、发病数等,分析EM菌断奶仔猪生产性能的影响。另外选取3头同品种、同批次生产、产仔数相同的母猪及其仔猪饲料中不添加EM菌作为对照。结果表明,母猪产后日均采食量较对照组提高12.07%,仔猪的初生重较对照组提高15.90%,产活仔数提高了12.09%,断奶重增加9.09%,断奶头数增多20.99%,断奶成活率提高8.81%。断奶后仔猪试验组的平均采食量较对照组提高10.26%,料重比降低了7.14%,发病率下降了50.03%。说明EM菌对母猪和仔猪的生产性能均有提高作用,研究结果为EM菌在生猪养殖中的应用提供了基础资料。     

腹泻仔猪肠道菌群的ERIC-PCR指纹图谱分析

【目的】分析腹泻仔猪周围环境菌群变化规律,为仔猪腹泻的诊断和治疗提供支持。【方法】采集健康对照和腹泻仔猪粪便、口腔以及产床和母猪乳头等样品,采用ERIC-PCR技术分析其菌群结构特征,并对粪便样品中的细菌进行分离和鉴定。【结果】对照组4类样品细菌ERIC-PCR指纹图谱十分相似,腹泻组各类样品之间电泳条带差异较大,出现了异常亮度的电泳条带,与对照组优势条带位置不同,其中口腔和母猪乳头部位电泳条带数显著低于对照组(P0.05),菌群多样性指数降低,优势度指数升高。从粪便样品中分离出2株可疑菌株b1和b2,细菌染色和生化试验初步证明分离株b1和b2分别符合大肠杆菌和奇异变形杆菌的特征;利用ERIC-PCR技术分析分离株b1和b2的指纹图谱,发现分离优势细菌的ERIC-PCR指纹图谱包含于粪便样品的ERIC-PCR图谱中,证明样品的ERIC-PCR指纹图谱能够反映出优势菌群的特征;测序结果显示,分离株b1与大肠杆菌基因组同源性为99%,分离株b2与奇异变形杆菌基因组同源性为98%。【结论】腹泻仔猪周围环境菌群发生明显变化,ERIC-PCR技术可以快速、准确地监测和诊断菌群结构的变化,有助于细菌性仔猪腹泻的诊断和治疗。     

细菌毒素氧化呈色法和过氧化物酶法检验病害猪肉的比较

细菌毒素氧化呈色法和过氧化物酶法都是检验病害猪肉的常规检验方法。采集病害猪肉和健康猪肉各30份,通过对健康猪肉和病死猪肉同时用过氧化物酶法和细菌内毒素呈色法进行检测,比较两种方法的准确性、精确度及适用性。结果表明,细菌毒素氧化呈色法和过氧化物酶法检验病害猪肉都有很高的检出率,达到了100%。检验市场上购买的健康猪肉时,过氧化物酶法优于细菌毒素氧化呈色法。     

整合素β1和β2亚基胞内区的原核高效表达及纯化

【目的】构建整合素(Integrin)β1和β2亚基胞内区原核表达载体,高效表达整合素β1和β2亚基胞内区蛋白,为进一步研究其在细胞迁移和信号传导中的定位及其多克隆抗体的制备奠定了基础。【方法】采用PCR技术,从cDNA中扩增出整合素β1和β2亚基胞内区基因片断,并将其克隆到pGEX-4T2原核表达载体上,构建了GST-β1和GST-β2质粒,然后将GST-β1和GST-β2质粒分别转化E.coliBL21(DE3)表达菌,用IPTG诱导,成功表达了整合素β1和β2亚基胞内区蛋白,并利用Glutathione SepharoseTM4B对表达产物进行纯化。【结果】利用PCR扩增得到了整合素β1和β2亚基胞内区基因片段,并成功构建了GST-β1和GST-β2质粒;对GST-β1和GST-β2诱导表达发现,这2种融合蛋白均为可溶性蛋白,具有良好的生物学活性。通过纯化得到了高纯度的GST-β1和GST-β2融合蛋白。【结论】整合素β1和β2亚基胞内区基因可以高效表达,并具有良好的生物学活性。     

杨凌及其周边地区猪群中猪瘟抗体水平监测

对杨凌及其周边地区猪群中猪瘟免疫情况进行了调查,并采取54份血样,利用间接ELISA检测猪瘟抗体水平.调查发现,绝大部分养殖户对猪瘟都有较为严格的防疫措施,但也有部分养殖户不够重视,没有进行疫苗免疫接种.血清检测结果表明,免疫猪的猪瘟抗体阳性率为40%;未免疫猪阳性率为30%;屠宰用猪阳性率为47.06%;所有检样总阳性率为37.03%.说明杨凌及其周边地区猪群中猪瘟抗体水平偏低,应及时进行免疫接种及加强抗体监测.     

朱砂七提取物体外抑菌和抗病毒活性部位筛选

为筛选朱砂七提取物体外抑制9株临床分离致病菌和抑制新城疫病毒(NDV)的活性部位,采用琼脂扩散和试管稀释法进行体外抑菌试验,MTT法和鸡胚法测定了朱砂七提取物对NDV在鸡胚成纤维细胞(CEF)和鸡胚内增殖的影响.结果显示,朱砂七乙酸乙酯部位(PCE)对9株临床分离菌的MBC均小于100 g/L;朱砂七氯仿部位(PCC)有一定的抑菌作用;大黄素对沙门菌(鸡)、链球菌(猪)、无乳链球菌(奶牛)、表皮葡萄球菌(奶牛)和金黄色葡萄球菌(奶牛)的MBC分别为5,2.5,2.5,2.5,1.25 g/L;PCE进一步分离部位PCEA对沙门菌(鸡)、链球菌(猪)、无乳链球菌(奶牛)、表皮葡萄球菌(奶牛)和金黄色葡萄球菌的MBC分别为24,24,12,6,6 g/L.PCC和大黄素对NDV在CEF上增殖的抑制作用不明显;PCE对NDV在CEF上的抑制率为39.12%(P＜0.01),PCEA对NDV在CEF上的抑制率为72.33%(P＜0.01);PCEA对NDV在鸡胚中增殖具有抑制作用,其预防组和药毒混合组与病毒对照组的血凝效价差异显著(P＜0.05),而治疗组与病毒对照组差异不显著.由此可知,朱砂七提取物具有抑制细菌作用,PCE和PCEA对NDV的增殖具有一定的抑制作用.     

猪瘟病毒感染细胞中分子伴侣Jiv基因的表达检测与分析

Jiv蛋白是与猪瘟病毒(CSFV)细胞内复制密切相关的伴侣分子,为探究Jiv在CSFV感染细胞内的表达规律,应用实时荧光定量RT-PCR分别对3个猪源细胞株(SUVEC、PK-15、ST)在感染CSFV后不同时间Jiv和CSFV基因表达进行检测,分析两者的相关性。结果显示,3种猪源细胞株的Jiv和CSFV的基因在0~72h的表达逐步上调,72h~96h出现下降,二者变化趋势基本一致;此外,Jiv基因在0~48h上调幅度较其他时间段更为显著,ST细胞在不同时间段的Jiv表达均高于同时段的其他两种细胞,与ST细胞中CSFV复制趋势一致。结果表明,在CSFV感染细胞中Jiv基因的表达与CSFV复制呈正相关,即CSFV复制水平越高,Jiv基因表达水平也越高。本研究初步探明细胞Jiv蛋白在CSFV复制中的调节作用,为进一步明确Jiv蛋白参与CSFV复制的机制提供了新的资料。     

鸡肾型IBV分离株M基因的克隆与特性分析

依据NCBI所登录的鸡传染性支气管炎病毒的M基因序列设计了一对引物,应用TRIzol试剂盒对8个肾型鸡传染性支气管炎病毒陕西地方分离株进行总RNA的提取,以所得到的RNA为模板,用RT-PCR对M基因进行扩增;其目的条带回收提纯后,与PMD18-T克隆载体进行连接,转化到DH5α宿主菌,并经药物抗性筛选、PCR及酶切鉴定,将所筛选鉴定出的阳性质粒进行测序,最后对测序结果进行分析。结果表明：陕西地方8个毒株（BJ2、FF2、YL2、B01、G5、YX、WH、WG）M基因长约为650 bp,其中YX、WH株本身无BamH 1酶切位点。WH与其它分离株的核苷酸同源性为91.8%～92.6%,而其它的分离株间的同源性为98.8%～99.8%。8个毒株与参考株的核苷酸同源性为74.9%～99.8%。其N端90 aa肽段与对照株相比,不同之处表现为高亲水性氨基酸取代低亲水性氨基酸,这会使其具有更好的抗原性。     

动物肌肉发育相关印记基因研究进展

就印记基因的发展过程、主要特点及作用机制进行了简要概述,并主要介绍了与肌肉的生长发育密切相关的部分印记基因(DLK1、SNRPN、IGF2和H19),印记基因的作用原理以及对肌肉发育的影响。