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为了克隆羊传染性脓疱病毒CEV112基因并对其进行原核表达,根据GenBank中CEV112基因序列信息设计1对引物,以CEV基因组为模板,采用PCR扩增出1条大小为867bp的CEV112基因,将其连接到pMD20-T载体上,构建pMD20-T-CEV112重组质粒,转化到大肠埃希菌(E.coli)DH5α感受态细胞中,提取质粒进行酶切鉴定。鉴定正确后构建重组质粒pET28a-CEV112,转化到E.coli BL21(DE3)感受态细胞中。经IPTG诱导表达,表达产物用SDS-PAGE和Western blot进行分析。结果表明,成功构建了pET-28a-CEV112原核表达载体,并在E.coli BL21(DE3)中表达了CEV112基因,表达的融合蛋白大小约36ku,且主要以包涵体形式存在,为后续开展CEV112基因的功能研究奠定了基础。 相似文献
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施氮量对双季稻产量及氮磷钾吸收利用的影响 总被引:5,自引:2,他引:3
研究不同施氮量对双季稻产量、氮磷钾积累量及氮磷钾利用率的影响,同时探讨双季稻吸收利用氮、磷、钾素三者间的相互关系。通过田间试验研究施氮量不同、磷钾投入量相同条件下的双季稻产量、双季稻氮、磷、钾积累量、双季稻氮、磷、钾素利用效率及磷钾吸收利用与氮吸收利用的关系。结果表明:双季稻产量在一定范围内(早稻0~105 kg/hm~2,晚稻0~146 kg/hm~2)随施氮量的增加而提高,之后产量随施氮量增加而降低。本试验施氮条件下,早稻产量最高的处理为75%N(105 kg/hm~2),比CK(不施化肥)增产58.1%;晚稻产量最高的处理为100%N(146 kg/hm~2)处理,比CK增产67.6%。施氮水平对双季稻植株氮、磷、钾养分积累量有显著影响,早、晚稻稻谷氮、磷、钾积累量均以100%N处理最高。不同施氮水平对氮、磷、钾养分利用效率也有显著影响。适宜的施氮量可以增加双季稻产量,促进水稻对氮、磷、钾养分的吸收,同时提高双季稻的氮、磷、钾素利用效率。综合考虑双季稻产量效应及氮磷钾养分的有效吸收利用,双季稻施氮量为105~146 kg/hm~2较为适宜。 相似文献
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对从土壤中分离到的一株潜在根围促生菌U36进行了系统分析,通过形态学、生理生化特性及16S r RNA分析鉴定其为特基拉芽孢杆菌Bacillus tequilensis。盆栽试验发现,U36对植物生长有促进作用,而且在正常土壤中植株的生长优于无菌土。但就促生效率而言,在灭菌土中加入U36后的促生效率高于正常土中的促生效率:正常土中U36对辣椒根长、根重、茎长、茎重和叶面积的促进效率分别达到47.7%、37.5%、21.5%、69.2%和8.1%;而在灭菌土中,辣椒根长、根重、茎长、茎重和叶面积的促进效率分别为49.2%、58.8%、25.7%、58.2%和24.1%。通过研究发现U36不仅具有固氮、解磷的功能,还可产生促生长物质吲哚乙酸(IAA),且IAA的产生具有色氨酸依赖性。该菌株的优良促生特性可以作为潜在促生菌用于生物肥料研发,具有很好的应用价值。 相似文献
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测土配方施肥技术是促进农业增效、农民增收、节本增效的重要途径。勃利县县从2007年开始承担农业部测土配方施肥项目,几年来通过配方施肥项目的实施,深深体会到测土配方施肥对粮食增产、农民增收,对农业生态环境的改善。在实际工作中,各级部门统筹协调,精心组织、落实,全县测土配方施肥项目工作取得了较好效果。全县实施测土配方施肥面积达到120万亩,其中总节本化肥1000吨,同时增产、增效近40万元。 相似文献
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分析了哈尔滨市生态环境现状和面临的问题,随着经济快速发展,哈尔滨市面临的生态环境压力问题将更加突出,生态环境继续恶化,将严重影响哈尔滨市经济社会的可持续发展和生态环境安全。 相似文献
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羊源类鼻疽伯克霍尔德菌BPSL1467基因克隆、表达及其蛋白生物信息学分析 总被引:1,自引:1,他引:0
试验旨在克隆和表达羊源性类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei,B.pseudomallea)的BPSL1467基因,并对其表达的蛋白进行生物信息学分析。以羊源类鼻疽伯克霍尔德菌(BPHN1株)基因组为模板,参照GenBank中类鼻疽伯克霍尔德菌K96243标准株BPSL1467基因序列设计引物,PCR扩增获得目的基因片段,将所得片段与pET-28a(+)载体连接,构建pET-28a(+)-BPSL1467重组质粒。将鉴定正确的pET-28a(+)-BPSL1467重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,通过IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blotting鉴定表达产物。使用DNAMAN、ProtParam、SOPMA和Protscale相关生物信息学软件对BPSL1467基因编码的氨基酸序列进行分析。结果显示,本试验成功克隆了462 bp的BPSL1467基因,诱导表达重组蛋白大小约为22 ku,主要以包涵体的形式存在。BPSL1467蛋白分子式为C763H1209N203O217S6,分子质量为16 890.58 u;其不稳定系数为33.95,属于稳定蛋白;理论等电点(pI)为8.85,为碱性蛋白;总平均疏水性(GRAVY)为-0.190,为亲水性蛋白。该蛋白的二级结构中以无规则卷曲和α-螺旋为主。本试验结果为深入研究羊源类鼻疽伯克霍尔德菌的BPSL1467基因的分子作用机理提供了参考依据。 相似文献
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基于基本生活能力补偿的失地农民最低生活保障资金研究——以湖北省武汉市为例 总被引:1,自引:1,他引:0
在分析失地农民生活现状的基础上,通过实地调研获取第一手数据,并采用实地调查法、恩格尔系数法、比重法3种方法对失地农民生存保障所需要的最低金额进行了估算:实际调查法计算失地农民基本生活资金为273.44元/人,比重法计算失地农民基本生活资金为298.38元/人,恩格尔系数法计算失地农民基本生活资金为304.32元/人,综合3种方法后修正得的资金金额估算为290.38元/人。3种方法之间最高和最低的误差不超过10%,修正后的结果与3种方法所测算的标准更为接近,误差范围缩小到5%左右,说明该数据具有可行性和合理性。 相似文献