公猪胚胎期和成年期睾丸组织转录组差异分析

睾丸是雄性动物的生殖器官，具有产生雄激素和雄性生殖细胞的功能。因此，睾丸的发育形态对猪养殖生产具有重大影响。本实验选取DLY公猪胚胎期（妊娠105 d）和成年期（日龄200 d）睾丸为研究对象，对睾丸组织进行形态学观察和高通量转录组测序，并对差异表达基因进行功能富集分析。形态学观察结果表明：相较于雄性胎猪，成年公猪生精小管直径更大，生精上皮更厚，已有完整的生精结构，并可见各发育阶段精子细胞。转录组测序结果表明，共鉴定出6 296个差异表达基因。差异基因显著富集在精子发生、多细胞生物发育和细胞分化等生物过程，可能在代谢、细胞黏附、细胞周期和AMPK等通路发挥作用。本研究结果揭示了公猪胚胎期和成年期睾丸组织的形态学和转录组学的差异，为后期猪睾丸发育研究提供参考。     

猪肉质的评定指标及测定技术

随着生活条件的提高,人们对猪肉品质的追求也不断提高。然而,在非洲猪瘟的巨大冲击下,现代化、集约化养殖企业主要追求数量和生产速度的复工复产,而更多忽略了肉质的选育和提高,导致猪肉肉质总体呈现下降趋势。因此,了解猪肉肉质的评定指标和准确的测定方式,对肉质的客观评定和品种肉质改良速度的提高有直接影响。肉的食用品质主要包括肉的风味、质构、嫩度和多汁性等~([1]),肉质是一个综合性的复杂指标,包括肌肉肉色、pH、嫩度、大理石纹、滴水损失、熟肉率、剪切力、系水力、电导率、挥发性盐基氮和肌内脂肪含量测定等。文内就猪肉肉质的各个评定指标和相应的测定技术进行了阐述。     

转录组学技术及其在猪肉质遗传研究中的应用

转录组学作为研究基因结构和功能的重要内容,在研究细胞生理活动规律、揭示基因表达与生命现象之间的内在联系等方面发挥着重要作用。猪肉作为我国也是全球第一大消费肉类品种,存在广阔的市场需求,关于猪肉品质的研究也是当前猪遗传育种的重点内容。文章就转录组学技术及其在猪肉质研究中的应用进行综述,鉴于当前的研究热点,重点概括基于转录组测序技术的非编码RNA的研究在猪肉质遗传研究中应用现状,以期为猪肉质相关研究提供参考。     

干扰E2F7对C2C12成肌细胞增殖的影响

【目的】探究转录因子E2F7在骨骼肌细胞发育过程中的作用。【方法】以C2C12成肌细胞为研究对象,通过设计小干扰RNA干扰C2C12成肌细胞中E2F7的表达,分为干扰组和对照组,并利用RT-PCR、CCK-8和EdU等技术检测在C2C12成肌细胞中干扰E2F7后对成肌细胞增殖的影响。【结果】E2F7 mRNA表达水平在C2C12成肌细胞增殖期极显著高于分化期(P0.01);与对照组相比,干扰组的细胞活率和新生细胞比率皆极显著高于对照组(P0.01);干扰E2F7显著提升了C2C12成肌细胞中Cyclin E的表达水平(P0.05),极显著促进Cyclin D和CDK4的表达(P0.01);并且干扰E2F7可显著促进E2F2 (P0.05)和极显著促进E2F1及E2F3的表达(P0.01),同时极显著促进与成肌细胞增殖相关microRNAs (miR-7、miR-25、miR-27和miR-92a)的表达(P0.01)。【结论】干扰E2F7可促进C2C12成肌细胞的增殖,E2F7可能是通过调控经典E2Fs信号通路和成肌细胞增殖相关microRNA发挥作用。     

染料木素对高脂诱导肥胖小鼠肝脏炎症及脂联素信号通路的影响

【目的】探讨染料木素对高脂饮食导致肥胖小鼠肝脏的治疗作用及其潜在机制。【方法】30只ICR雌性肥胖小鼠随机分为对照组(ND)、高脂组(HFD)和高脂染料木素组(HFD-G),每组各10只。对照组饲以普通饲料,高脂组饲以高脂饲料,高脂染料木素组饲以高脂-染料木素预混料。干预14周后测量小鼠肝脏重量、葡萄糖耐受情况,通过甘油三酯、总胆固醇测定试剂盒检测小鼠血清中甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)含量;通过油红O染色观察肝脏的组织形态和脂滴沉积情况;qRT-PCR检测肝脏组织中炎症因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、脂联素(adiponectin,ADPN)、脂联素受体-1(adiponectin receptor 1,AdipoR1)以及脂联素受体-2(adiponectin receptor 2,AdipoR2)mRNA表达水平;ELISA法检测血清中TNF-α和IL-6的表达。【结果】饲喂14周后,高脂组体重、肝重显著高于对照组(P0.05),血清中的TG、TC含量极显著高于对照组(P0.01),ADPN、AdipoR1及AdipoR2的mRNA表达水平显著低于对照组(P0.05),炎症因子TNF-α、IL-6的mRNA表达水平以及ELISA结果显著高于对照组(P0.05),油红O染色结果显示,高脂组较对照组肝脏的脂质沉积情况显著加重(P0.05);高脂染料木素组体重、肝重显著低于高脂组(P0.05),血清中的TG、TC含量极显著低于高脂组(P0.01),ADPN、AdipoR1及AdipoR2的m RNA表达水平显著高于高脂组(P0.05),炎症因子TNF-α、IL-6的mRNA表达水平以及细胞因子分泌水平显著低于高脂组(P0.05),油红O染色结果显示,高脂染料木素组较高脂组肝脏的脂质沉积情况显著减轻(P0.05)。【结论】染料木素能够显著缓解由高脂饮食引起的肝脏病变,其机制可能是通过提高脂联素表达水平同时抑制肝脏中的炎性因子来实现的。     

舍饲哈萨克羊分娩前后的行为观察

为了解舍饲哈萨克羊分娩前后的行为变化,试验利用全天候摄像头对产房母羊分娩前第5天和分娩后第5天24h内的行为进行观察和记录。结果表明,舍饲哈萨克绵羊分娩前第5天昼夜24h中:采食200.00 min,占13.89%;反刍425.60 min,占29.55%;站立413.80min,占28.74%;静卧320.00min,占22.22%;饮水3.70min,占0.26%;排尿2.70min,占0.19%;睡眠74.20min,占5.15%。分娩后第5天昼夜24h中:采食243.75min,占16.93%,差异极显著;反刍449.63min,占31.22%;站立310.38min,占21.55%,差异极显著;静卧362.13min,占25.15%,差异极显著;饮水5.50min,占0.38%,差异显著;排尿3.00min,占0.21%,差异极显著;睡眠65.63min,占4.56%。与分娩前相比分娩后舍饲哈萨克羊的采食、静卧、排尿行为耗时极显著(P0.01)提高,饮水时长也显著(P0.05)延长,站立时间则极显著(P0.01)缩短。而反刍与睡眠时长未达到显著水平。     

猪原代骨骼肌卫星细胞的快速分离、培养和诱导分化研究

骨骼肌卫星细胞是一种肌源性干细胞，在动物生后的肌肉发育和损伤修复中发挥重要作用，同时与产肉家畜的胴体性状、肉产量和肉品质密切相关。为完善猪骨骼肌卫星细胞的快速、简便分离和培养方法，本研究对比了不同酶、不同消化时间、不同日龄对猪骨骼肌卫星细胞分离和培养的影响。结果显示：不同胶原酶和胰蛋白酶消化能力不同，II型胶原酶和胰蛋白酶的消化能力较强；猪日龄越小越容易获得大量卫星细胞；II型胶原酶消化之后分离培养细胞的Pax7阳性率更高，进一步利用分离的卫星细胞进行成肌诱导分化，成功诱导肌管形成。本实验为建立快速、简便的猪骨骼肌卫星细胞分离培养方法提供了参考。     

饲粮不同粗蛋白质水平对育肥羔羊小肠氨基酸流量及吸收率的影响

本研究旨在比较饲粮不同粗蛋白质(CP)水平对育肥羔羊小肠氨基酸(AA)流量及吸收率的影响。选用体重(30.0±3.7)kg,安装有瘤胃、十二指肠近端和回肠末端瘘管的3只哈萨克羊公羔为试验动物,采用3×3拉丁方试验设计,各处理饲粮CP水平分别为11.00%、12.00%和13.00%;预试期10 d,正试期10 d。采用镱锕(Yb-Ac)、锂铬乙二胺四乙酸(Li Cr-EDTA)分别作为消化道固相和液相食糜标记物测定小肠食糜流量。结果表明:提高饲粮CP水平可增加羔羊氮进食量、表观消化率和氮沉积,13.00%CP处理显著高于11.00%CP处理(P0.05),并有增加饲粮干物质(DM)、有机物(OM)和中性洗涤纤维(NDF)表观消化率的趋势(0.05≤P0.10),但不影响酸性洗涤纤维(ADF)的表观消化率(P0.05)。提高饲粮CP水平虽然对小肠真食糜流量及氨基酸吸收率无显著性影响(P0.05),但十二指肠氮、总氨基酸(TAA)流量以及必需氨基酸(EAA)中精氨酸(Arg)、组氨酸(His)和赖氨酸(Lys)的吸收率在数值上有所增加。结果显示,提高饲粮CP水平有提高消化率、小肠食糜流量及氨基酸吸收率的潜在趋势。     

干扰ACACA基因对猪原代肌卫星细胞增殖和成脂转分化过程的影响

【目的】探究乙酰辅酶A羧化酶α(acetyl-CoA carboxylase α,ACACA)对猪原代肌肉卫星细胞（muscle satellite cells,MSCs）增殖凋亡以及成脂转分化的影响。【方法】通过体外培养MSCs模拟猪肌内脂肪的形成过程，根据ACACA基因序列构建3条小干扰RNA，采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)筛选出干扰效率最高的siRNA进行转染。成功干扰MSCs内ACACA的表达后，分别通过q RT-PCR、CCK-8细胞增殖实验、流式细胞术、油红O染色和检测甘油三酯（TG）等方法对MSCs增殖、凋亡以及转分化时期脂滴形成效果进行评估。【结果】在增殖期干扰ACACA,MSCs内细胞周期标志基因Cyclin D1(P<0.05)、Cyclin E(P<0.000 1)以及抗凋亡基因BCL-2(P<0.05)的表达量下调，促凋亡基因BAX(P<0.05)的表达量上调；在对MSCs进行成脂转分化诱导作用下，MSCs具有向脂肪细胞转分化的能力，而干扰ACACA后，MSCs中脂滴极显著减少（P<0.000 1）。【结论】干扰ACAC...