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干扰ACACA基因对猪原代肌卫星细胞增殖和成脂转分化过程的影响
引用本文:雷宇航,谭娅,黄志洋,赵梦颖,齐婧,甘麦邻,沈林園,朱砺.干扰ACACA基因对猪原代肌卫星细胞增殖和成脂转分化过程的影响[J].四川农业大学学报,2023(2):335-343+388.
作者姓名:雷宇航  谭娅  黄志洋  赵梦颖  齐婧  甘麦邻  沈林園  朱砺
作者单位:1. 四川农业大学畜禽遗传资源发掘与创新利用四川省重点实验室;2. 四川农业大学动物科技学院/农业农村部畜禽生物组学重点实验室;3. 贵州省农业科学院畜牧兽医研究所
基金项目:国家重点研发计划项目(2021YFD1200801);;四川省科技计划项目(2021ZDZX0008、2021YFYZ0007、2021YFYZ0030、scsztd-2022-08-09);
摘    要:【目的】探究乙酰辅酶A羧化酶α(acetyl-CoA carboxylase α,ACACA)对猪原代肌肉卫星细胞(muscle satellite cells,MSCs)增殖凋亡以及成脂转分化的影响。【方法】通过体外培养MSCs模拟猪肌内脂肪的形成过程,根据ACACA基因序列构建3条小干扰RNA,采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)筛选出干扰效率最高的siRNA进行转染。成功干扰MSCs内ACACA的表达后,分别通过q RT-PCR、CCK-8细胞增殖实验、流式细胞术、油红O染色和检测甘油三酯(TG)等方法对MSCs增殖、凋亡以及转分化时期脂滴形成效果进行评估。【结果】在增殖期干扰ACACA,MSCs内细胞周期标志基因Cyclin D1(P<0.05)、Cyclin E(P<0.000 1)以及抗凋亡基因BCL-2(P<0.05)的表达量下调,促凋亡基因BAX(P<0.05)的表达量上调;在对MSCs进行成脂转分化诱导作用下,MSCs具有向脂肪细胞转分化的能力,而干扰ACACA后,MSCs中脂滴极显著减少(P<0.000 1)。【结论】干扰ACAC...

关 键 词:乙酰辅酶A羧化酶α  猪骨骼肌  原代肌卫星细胞  siRNA  转分化
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