抗丝状支原体丝状亚种单克隆抗体的制备及初步应用

旨在制备抗丝状支原体丝状亚种(Mmm)的特异性单克隆抗体(MAb),为牛传染性胸膜肺炎(CBPP)病原诊断的免疫学方法提供特异性抗体。本研究利用生物信息学技术分析了Mmm国内分离株Ben-1不同传代株的全基因组序列,选取M0071蛋白作为研究对象。将原核表达的可溶性重组蛋白M0071(rM0071)作为免疫原免疫BALB/c小鼠,通过有限稀释法和间接ELISA方法筛选得到能稳定分泌抗rM0071蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株。进一步制备单抗腹水并纯化,利用Western blot方法对该单抗进行特异性鉴定,同时测定其抗体效价和抗体亚类。随后利用间接免疫荧光试验(IFA)评价该单抗对细胞感染Mmm的检测能力。结果表明成功获得1株单克隆细胞株3C4A1,将其分泌抗体命名为MAb 3C4A1。特异性结果表明,MAb 3C4A1能与Mmm的分离株和标准株发生特异性反应,而不与山羊支原体山羊肺炎亚种、丝状支原体山羊亚种、牛鼻支原体、无乳支原体、牛支原体、leachii支原体和牛A型巴氏杆菌等发生反应。抗体亚类鉴定MAb 3C4A1属于IgG1亚类、轻链为κ链。经间接ELISA测定其抗体效价为1∶256 000。IFA试验结果表明,MAb 3C4A1仅与感染EBL细胞的Mmm发生绿色荧光反应,而与牛鼻支原体、无乳支原体、牛支原体感染的细胞不发生荧光反应,特异性良好。本研究制备的MAb 3C4A1具有良好的特异性和免疫反应性,可作为CBPP病原免疫学诊断的工具,为进一步研制CBPP病原鉴别诊断试剂盒提供了基础材料。     

广东屠猪肉样品中大肠杆菌耐药性与毒力特征的分析

为分析广东地区屠猪肉中大肠杆菌(E.coli)药物敏感菌株的血清型、毒力基因和系统进化背景,本研究从屠猪肉样品中分离出112株E.coli,采用玻片凝集法鉴定血清型,琼脂稀释法测定10种抗菌药的敏感性,PCR方法检测7种毒力相关基因,多重PCR方法进行系统进化背景判定。结果显示,112株E.coli中,定型菌株95株,分别属于15种血清型,其中O65、O131、O8和O158为优势血清型。几乎所有菌株对氟苯尼考、多西环素和四环素高度耐药,而对头孢曲松高度敏感,其中多重耐药菌株多数耐5种以上药物,常见的多重耐药表型是氟苯尼考/氯霉素/多西环素/四环素/氨苄西林。PCR鉴定结果表明,含有毒力基因的菌株中38%至少具有两个毒力基因,其中EAST1+Stx2e和hlyF+Stx2e比较常见。比较常见的毒力基因为Stx2e和EAST1,STb基因仅在一株菌中检测到。多重PCR鉴定结果显示,屠猪肉样品中E.coli主要分布为共生型的A组和B1组。本研究为大肠杆菌病的控制和合理使用抗生素提供实验依据。     

萝卜生长期间出现异常的原因与防治措施

萝卜作为高产、耐贮运蔬菜,在江苏徐州地区常年种植面积约1万hm^2,目前该地区推广种植的萝卜品种有：适合春季栽培的春红优、白玉春等;适宜夏季栽培的夏红1号、中秋红等;适合秋季栽培的传统地方品种红优五号、徐州大红袍等。随着设施栽培技术的研发,     

地产胡萝卜高产优质栽培法

一、选地与整地最适合胡萝卜生长的是沙壤土,选土层深厚、平整、排水良好,孔隙度为20～30%,pH值6～8的地块。秋季深翻,春季耙平耱细,做到无残茬、细软、绵碎,成待播状态。     

蒙古绵羊β-防御素的纯化及其抗菌活性研究

采用高盐低pH缓冲液进行粗提,粗提液经阳离子交换层析-RP HPLC-Sephadex G25凝胶过滤-C18RP-HPLC纯化,得到纯化多肽。尿素-Tricine-SDS PAGE测定其分子量为3.8kDa,215nm具最大吸收。对Ecoli、S.aureus、B.proteus和B.subtilis有强的抗菌活性。     

小麦新品种山农20引种试验研究

为给山农20在皖北地区的高产栽培提供理论依据,于2009—2011年进行2年多点品比试验。结果表明:山农20与皖麦50相比,成穗数大增,穗粒数持平,千粒重增加,株高降低,抗寒性增加,抗病性提高,产量达8 583.0 kg/hm2,居参试品种第1位,增产显著,在皖北地区具有广阔的推广应用前景。     

防虫网在伏菜秧上的应用效果

伏菜秧是南京市伏缺期间的堵伏缺品种之一，也是城乡居民喜食的速生蔬菜，具有生长快，周期短的特点，然而在此期间又是高温、暴雨、虫害的频发期，对伏菜秧生产带来一定影响，为了解防虫网在伏菜秧上的应用效果，进行此试验。１材料与方法（１）供试防虫网：规格３０目，...     

红小豆新品种保876-16特征特性及栽培技术

保876-16是保定市农业科学研究所利用阶梯式杂交方法选育而成的红小豆新品种.2004年通过国家小宗粮豆品种鉴定委员会鉴定.     

二氯吡啶酸在油菜及土壤中的残留动态研究

采用高效液相色谱仪测定除草剂二氯吡啶酸在油菜及土壤中的残留消解动态和最终残留量。结果表明:在油菜和土壤上喷施质量分数75%的二氯吡啶酸可溶性粒剂(有效成分338 g/hm2),测出油菜和土壤中的原始沉积量分别为5.63~6.75 mg/kg和0.47~0.48 mg/kg,半衰期为8.49~10.11 d和3.76~4.74 d。对油菜施药1次,施药后45 d测得油菜上残留量为0.15~0.17 mg/kg。