鸡胚胎体外操作技术的研究现状和进展

本文介绍了禽类胚胎操作技术方面的概况，对受精卵收集及体外受精、早期胚胎体外培养、人造材料蛋壳培养胚胎、代用蛋壳培养胚胎、嵌合体鸡的生产、转基因鸡生产等的进展及发展进行了综述。     

家鸡Mx基因多态性及其诱变修饰的研究

研究采用错PCR-RFLP的方法对家鸡14个品种的Mx基因变异性分布进行了探索;并利用PCR突变技术将Mx基因全长cDNA第2032位碱基由G突变为A(即631位氨基酸的改变),并将突变的Mx基因插入真核表达载体pcDNA3.0,转染COS-I细胞,进行RT-PCR与间接免疫荧光(IFA)鉴定,研究结果显示,14个品种Mx基因的2032位点存在2个等位基因(A、G),3种基因型(AA、AG、GG),其中鹿苑鸡、狼山鸡、斗鸡未发现AA型个体,茶花鸡未发现GG个体;并成功对Mx基因进行PCR诱变修饰和构建了能够表达鸡Mx基因的重组真核表达载体,为其体内外表达及生物学活性的进一步研究奠定了基础.     

部分鸡品种胸肌肌苷酸含量的比较研究

采用高效液相技术测定了仙居鸡、固始鸡、隐性白鸡胸肌中肌苷酸的含量。结果表明:①胸肌肌苷酸含量从高到低依次为:仙居鸡、隐性白鸡、固始鸡,其中仙居鸡胸肌肌苷酸含量显著高于固始鸡(p<0.05)。②仙居鸡、固始鸡胸肌肌苷酸含量性别间表现为公鸡低于母鸡,其中仙居鸡公母鸡间差异显著(p<0.05),而隐性白鸡公鸡高于母鸡。③胸肌肌苷酸含量与12周龄体重相关分析表明,仙居鸡、固始鸡胸肌肌苷酸含量与12周龄体重呈负相关,其中仙居鸡胸肌肌苷酸含量与体重相关达显著水平(p<0.05)。     

萧山鸡血浆胆固醇含量及其与屠宰性能相关性分析

本试验对萧山鸡血浆胆固醇含量进行测定。结果表明 :血浆胆固醇的含量为 114 .90± 3 6.82mg/dl,且性别间表现出差异 ,公鸡血浆胆固醇含量显著高于母鸡 (P <0 .0 5 )。此外血浆胆固醇的含量与生产性能相关分析表明 :血浆胆固醇含量与所有屠宰性能指标均呈正相关 ,其中与屠体重、半净膛重、全净膛重相关达极显著水平 (P <0 .0 1)。     

禽类转基因生产及其应用的研究现状和进展（待续）

综述了禽类转基因方面的制作方法、转基因禽类应用研究概况。分别介绍了成熟卵泡微注射法、精子载体转基因、反转录病毒载体转基因法、受精卵移植法、单细胞受精卵微注射法、胚盘嵌合体法、原始生殖细胞嵌合体法的进展及发展动态。阐明了转基因在宿主基因组中的表达特征及转基因禽类研究中出现的问题，并展望了转基因禽类产品的应用前景。     

生物工程的新领域——胚胎干细胞与家畜改良

<正> 凡需要不断产生新的分化细胞以及分化细胞本身不能分裂的组织都存在有干细胞(stem cell),比如,存在于造血系统中的干细胞能分化成红细胞、血小板、淋巴细胞;表皮的基底细胞能分化出上皮细胞;精原细胞能分化出精细胞;嗅上皮基底细胞能分化出嗅神经细胞.干细胞的职能不是去执行已分化细胞的功能,而是去产生具有分化功能的细胞.干细胞有两种类型:一种是只能形成一种分化类型的干细胞称做单能(unipotent)干细胞;一种是能够形成一种以上分化类型的干细胞叫多能(pluripotent)干细胞。干细胞有以下几个主要的生物学特性:     

鸡胚胎原始生殖细胞的体外培养

旨在对影响鸡胚胎原始生殖细胞（PGCs）体外培养、传代过程的各种影响因素进行探讨。将分离到的19期鸡胚胎生殖腺的PGCs在以鸡胚成纤维细胞（CEF）为饲养层，添加细胞因子的培养体系中进行培养、传代。经冷冻保存的PGCs在添加细胞因子的培养体系中能增殖，并具有分化能力。从细胞形态、集落形态、增殖生长能力、核型检测、碱性磷酸酶测定等方面对培养过程中的鸡胚胎PGCs进行检测。结果表明，采用传至3代的CEF为饲养层，多次离散法进行传代所获得的5代鸡胚胎PGCs不但能有效维持PGCs的未分化状态和正常二倍体核型，也具有其作为多能性胚胎干细胞的一系列特征。     

牛体外受精胚胎衍生干细胞能力影响因素的研究

以牛卵巢卵母细胞体外受精获取囊胚期胚胎，比较体外受精牛胚胎不同获取内细胞团的方法和不同培养液对体外培养胚胎干细胞能力的影响。结果表明，囊胚期胚胎不除去透明带而直接培养产生胚胎干细胞，初次克隆率为55％；胰酶法去透明带分离的内细胞团（ICM）培养产生胚胎干细胞，初次克隆率为90％。免疫外科法去透明带分离的ICM在4种不同的培养液中，初次克隆率分别为16．4％、11．5％、21．8％、18．2％，但是其分离的ICM经传代后形成的衍生细胞不易发生分化，经过4～6代的传代，仍然保持其完整的形态，说明免疫外科法是一种理想的牛ICM分离法，培养液为D20＋LIF（40ng／mL）可用于牛胚胎干细胞培养。