鸡胚胎体外操作技术的研究现状和进展（续）

5嵌合体鸡的生产　　嵌合体制作最早主要用于发育生物学、细胞遗传学等学科的理论研究。目前，禽类嵌合体的制作中作供体细胞用的囊胚层细胞(BC)和原生殖细胞(PGCs)可以代替受精卵和早期胚胎用于体外遗传操作，已成为禽类转基因研究的一个热点。同时，BC和PGCs还可以在体外进行培养和冷冻保存。基本原理是经过遗传操作的BC细胞或PGCs细胞作供体，嵌合到受体胚胎中。如果是嵌合在生殖细胞，则该嵌合体性成熟后可产生一定比例经过遗传操作的配子。　　有关鸡嵌合体方面的报道及鸡嵌合体制作方法、嵌合体的嵌合程度的判断以及怎样提高嵌…     

禽类转基因生产及其应用的研究现状和进展

1.7 精子载体转基因法（Sperm mediated gene transfer) 1.7.1 辐射精子作载体法 Pandoy和Patchell用致死剂量辐射带有选择标记的鸡精液进行授精（制造假妊娠），然后再用同种精液进行正常受精，以此来进行品种标记基因的转导。该试验以羽色和蛋壳色基因为标记，用此法在后代中获得3.5%的后代可表达外源基因。这种方法可以准确地使DNA进入核内，同时解决分离、提供插入所需基因的困难，但是无特异性，遗传频率不能预知，而且会导入不需要的基因。Bumstead［6］从对马立克氏病敏感和淋巴白血病抗性的母鸡得到转基因鸡，发现这种转基因鸡蛋对两种疾病都表现敏感而不表现抗性。这一实验直接证实了辐射精子发生非特异性整合的事实。 1.7.2 精子载体法 在禽类中精子载体转基因法能够在子代中获得1/300的携带外源基因个体。1990年法国国立发育生物学研究所的以色列研究者用此法导入外源基因，用Southern杂交法检测出阳性个体。但是至今未能获得F1代。Gruenbaum等以LacZ和CAT作为标记基因，用吸附该基因的鸡精子进行人工授精，对获得的胚胎及雏鸡进行Southern杂交和PCR分析，结果在所检测样本中30%～60%整合有外源DNA，在部分组织中检测到外源基因表达产物，在传代试验中，证明外源DNA能遗传给后代。Squries等根据精细膜的特性和相似相溶原理，用脂质体包装外源DNA与精子共同孵育，然后进行人工授精，在鸡上获得成功，阳性率为15%～25%。     

山羊胚胎性别鉴定取样技术的研究

在进行山羊胚胎性别鉴定研究的同时，对山羊胚胎切割取样技术和切割胚胎的最佳阶段进行了研究，以确定最佳切割时间与取样细胞数。徒手胚胎切割方法取样，经１４０枚切割表明，以６～８日龄胚为好。囊胚和孵出囊胚切割取样成功率最高（９０％），经２２枚取样后的胚胎移植受体，妊娠成功率达３６．４％。     

山羊胚胎性别鉴定取样技术的研究

在进行山羊胚胎性别鉴定研究的同时，对山羊胚胎切割取样技术和切割胚胎的最佳阶段进行了研究，以确定最佳切割时间与取样细胞数，徒手有台切割方法取样，经１４０枚切割表明，以６￣８日龄胚为好，囊胚和孵出囊胚切割取样成功率最高（９０％），经２２枚取样后的胚胎移植受体，妊娠成功率达３６．４％。     

胚胎干细胞的生物学特性及其应用研究

胚胎干细胞（ES细胞）是一类具有多向分化潜能的，在适合的条件下能在体外抑制分化培养，并能复制增殖的细胞。综述了胚胎干细胞的主要生物学特性及其在基因诱捕、转基因动物、疾病治疗等研究中的新进展和应用前景。     

海门山羊超数排卵,卵巢反应和胚胎发育观察

用促性腺激素 FSH(280IU 和340IU)、PMSG(1000IU)对海门山羊进行超数排卵处理,并比较它们的超排效果.试验结果表明:用280IU 的 FSH 超排,排卵数平均为7.5±4.6;用340IU 的 FSH 超排,排卵数平均为8.6±6.2;用 PMSG 超排,排卵数平均为5.5.FSH 处理超排效果比 PMSG 处理效果好。FSH 组的两种剂量间的效果差异不显著(P>0.05);卵巢对激素的反应比较明显,卵泡多,卵巢体积增大.经观察,胚胎发育在发情配种后的第3天,以单细胞受精卵到2细胞阶段的胚胎趋多;第4天,以4—8细胞阶段的胚胎趋多;第5天,以16—32细胞阶段趋多;第6天,发育到桑椹胚;第7—8天,以囊胚趋多。这一结果,为海门山羊今后进行胚胎工程提供了参考价值。     

鸡胚胎原始生殖细胞对不同冷冻体系适合性的研究

目的:研究鸡胚胎原始生殖细胞(EPGCs)对不同冷冻体系的适合性。方法:对发育至第19期和第28期胚胎性腺PGCs,采用二甲基亚砜(DMSO)、乙二醇、聚乙二醇为冷冻保护液,在不同组合、不同浓度、不同的冷冻程序     

家鸡染色体研究进展

概述了家鸡的染色体技术的发展现状和染色体分带的研究进展,对家鸡染色体核型进行了分析,提出了染色体技术在家鸡遗传育种中的应用,即:家鸡起源进化和亲缘的关系;远缘杂交不育机理;种鸡的细胞遗传学检查;染色体水平的遗传标记;家鸡的基因定位;性别决定机制与性别控制。     

二花脸猪早期胚胎发育的初步研究

太湖猪是我国优良地方猪种之一,以产仔数多而驰名中外。迄今为止,已有许多国内外专家对太湖猪的生殖生理、繁殖性能等方面进行了研究,但太湖猪早期胚胎发育未见报道。本试验旨在观察太湖猪胚胎发育能力,为猪的胚胎工程和进一步挖掘太湖猪的高产潜力提供科学依据。