H9N2亚型禽流感病毒M1基因在大肠杆菌中的原核表达

采用RT-PCR技术扩增禽流感病毒M1基因,将M1结构基因克隆于pMD18-T载体.测序结果表明,插入的片段为M1目的基因.切下目的基因M1,重组到含有谷胱苷肽(GST)的融合蛋白原核表达载体pET-32a(+),获得的重组质粒经PCR、酶切以及序列分析鉴定表明,M1基因插入的位置、大小和读码框架均正确,证明成功构建融合表达载体pET-32a-M1.构建好的重组质粒经1 mmol/L IPTG诱导,在大肠杆菌BL21中得到大量表达,经过6h表达量达到高峰.融合蛋白M1的分子质量为29.8 ku,以包涵体形式存在.Western-Blot及ELISA分析表明,融合蛋白能够与M1单克隆抗体发生特异性反应,说明该重组蛋白具有良好的抗原性和特异性.     

陕西省猪瘟流行毒株E0和E2全基因分子特征分析

【目的】分析目前陕西省猪瘟病毒（CSFV）流行毒株的E0、E2全基因分子特征,为猪瘟防控提供参考。【方法】根据CSFV Shimen株及HCLV株全基因序列,设计并合成了4对引物,采用RT-PCR方法,从采自陕西不同地区的猪瘟病料中扩增E0、E2全基因并进行序列测定分析。【结果】从采集的病料中成功扩增了5株猪瘟流行毒株的E0、E2全基因,这5株流行毒株E0基因核苷酸同源性在94.4％～99.8％,与参考毒株ALD、Alfort187、Brescia、CAP、Glentorf、GPE、GXWZ02、HCLV、Paderborn、Rimes和Shimen的核苷酸同源性在80.4％～96.3％,氨基酸同源性在86.5％～99.3％。5株流行毒株E2基因核苷酸同源性在91.1％～98.0％,与参考毒株的核苷酸同源性在77.7％～94.6％,氨基酸同源性在85.2％～95.9％。5株流行毒株E0 Rnase活性区域氨基酸基序位点没有变异,但导致流行毒株发生免疫逃逸的E2蛋白关键位点中有3个发生了变异。【结论】测定的陕西省猪瘟流行毒株E0、E2基因序列变异明显,其中E2蛋白关键位点变异较大。     

猪瘟诊断技术研究进展

猪瘟(Classical Swine Fever,CSF)是严重危害养猪业的主要传染病之一,世界动物卫生组织(OIE)将其确定为A类传染病,也是我国农业部规定的一类传染病。     

猪圆环病毒病病原学及流行病学研究进展

猪圆环病毒（PCV）首先是由德国学者Tischer等在传代的PK—15细胞中发现，当时他观察到一种形态类似小RNA病毒的圆型小颗粒病毒，该病毒可以持续感染PK—15细胞，不会引起细胞病变。1982年，Tischer等用超速离心法提取了病毒及核酸，鉴定了病毒的核酸类型，观察了病毒形态，首次证实是一种单链环状DNA病毒，并命名为猪圆环病毒（PCV）。随后，Tischer、Allian用从PK—15细胞中分离的PCV人工感染猪，没有引起任何临床症状和病理变化，当时认为PCV只是一种可以感染猪但不引起发病的病毒，对猪不造成危害。1991年Clark报道，     

猪瘟病毒RT-nested PCR检测方法的优化和应用

为了优化猪瘟病毒的RT-nested PCR检测方法,对福建省猪瘟流行情况进行了调查。根据GenBank上发表的猪瘟病毒Shimen株基因序列设计并合成了2对引物,优化了猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)的RT-nested PCR检测方法,并对所优化的RT-nested PCR特异性进行了检验。结果表明,该方法检测CSFV cDNA含量的最低极限为1×10-7ng/mL,只有CSFV扩增出了272 bp的目的条带,从猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪流感病毒(SIV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)和猪细小病毒(PPV)阳性毒和健康猪脾、肝组织及阴性PK-15细胞均未扩增出特异性条带,说明该方法特异性强。应用此方法对福建省133份病料进行检测,结果有60份病料为阳性,阳性率为45.1%。结果提示优化的检测方法灵敏度高,特异性强;福建省猪群CSFV感染率高,需要加强CSF预防控制工作。     

一起猪流行性腹泻病毒与博卡病毒混合感染病例分析

陕西渭南某猪场发生了一起仔猪腹泻病例,通过临床症状观察、病理解剖、细菌分离以及病原RT-PCR检测,确诊为一起流行性腹泻病毒混感博卡病毒病例。针对发病原因提出了防治措施,为防控仔猪腹泻提供参考。     

萆薢提取物治疗鸡痛风的剂量筛选试验

称取萆薢粉 １２００ ｇ经甲醇提取后，按每克萆薢粉加蒸馏水 ７ ｍＬ制成水剂。用高蛋白、高钙高蛋白日粮从２３日龄起饲喂红白粉商品代鸡，定期随机抽样２０只，翅静脉采血，测定血液尿酸、钙、磷含量，观察临床症状，进行病理学检查。试验表明，高钙、高蛋白日粮能引起鸡痛风。将用高钙、高蛋白日粮复制的８３日龄红白粉商品代痛风鸡 ３０只，随机分为 ５组，每组６只，Ｅ组为对照．Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ组每日饮水中分别深加 ３９． ９，３５． ７，３１． ５，２７． ３ ｍＬ萆薢水剂，每天采血测定血液尿酸、钙、磷含量，用药后 １０ ｄ剖检观察。结果用药组血液尿酸含量显著低于对照组，差异极显著（Ｐ＜０．０１）．钙、磷含量与对照组差异不显著（Ｐ＞０．０５）。萆薢水剂的用药理想剂量为每只５．２５ ｍＬ／ｄ，相当用原药萆薢粉０．７５ ｇ／ｄ。     

纳米乳形成机理的理论

纳米乳是由水、油、表面活性剂和助表面活性剂按适当比例形成的粒径为10~100纳米的热力学稳定、各向同性、低粘度、透明或半透明的均相分散体系。纳米乳的形成至今尚没有一种理论能完整地解释,目前有负界面张力理论、混合膜理论、几何排列理论、增溶理论和R比理论等理论,其中较为成熟的是负界面张力理论。     

禽流感的病原流行与预防

通过流行病学调查发现，禽可能为此次疫情的传染源，导致全社会对禽产品的消费量大幅下降，禽产品价格降低，会对养禽业造成较大给养禽户造成较大的经济损失打击。     

紫苏子油的应用研究进展

紫苏子油是紫苏的干燥成熟果实压榨而得的脂肪油，富含仅一亚麻酸，具有显著的保健功能和医药功效，作为保健油，人们对其研究越来越深入，本文就其应用做以下介绍。 1 在工业上的应用 紫苏子油具有“三高”性质，即高碘值、高干性及高不饱和性。其油膜加热时不易熔化，是理想的工业原料油。可用来制造清漆、色漆、阿力夫油、油墨、涂料、人造革、高级润滑油等。