水貂阿留申病毒地方强毒株ADV-LN的分离鉴定

本研究采用对流免疫电泳方法(CIEP)检测辽宁水貂养殖场疑似水貂阿留申病毒(aleutian mink disease virus,ADV)水貂血清抗体,采集抗体阳性水貂的肝脏、脾脏、肾脏和肠系膜淋巴结组织,电镜观察存在细小病毒样颗粒。组织液研磨无菌处理后,接种CRFK细胞,盲传6代,取病毒细胞分离液用PCR方法检测,呈ADV阳性。将病毒分离液纯化后接种健康水貂,隔离观察,接种后3 d即出现食欲减退,贫血,被毛无光泽,后期出现拒食、狂饮、死亡,个别水貂出现神经症状,表现抽搐、痉挛、步态蹒跚、共济失调,证明分离获得的病毒为ADV强毒株,命名为ADV-LN株。     

水泡性口炎病毒N蛋白原核表达及免疫原性分析

本研究旨在克隆和表达水泡性口炎病毒（vesicular stomatitis virus,VSV）特异性抗原N蛋白,进而纯化并分析其免疫原性。根据GenBank中已发表的VSV基因组N基因序列,分别合成VSV两种不同血清型的N基因,经序列对比分析后,设计合成1对特异性引物,PCR扩增获得约1 300 bp的N基因片段,将目的片段亚克隆至pCold Ⅰ原核表达载体中,经IPTG诱导表达后,采用Ni-NTA树脂亲和层析法纯化重组N蛋白。SDS-PAGE分析表明,N基因在大肠杆菌中得到表达,蛋白大小约为50 ku;Western blotting检测结果表明,该重组蛋白与VSV多克隆抗体发生特异性反应。本试验成功构建了VSV-IND和VSV-NJ的原核表达载体,实现了N蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达,纯化后的重组蛋白具有良好的免疫原性。     

进境原木上截获的白云杉齿小蠹及其风险分析

本文描述了从美国阿拉斯加进口原木中截获白云杉齿小蠹(Ips perturbattts Eichhoff)的形态特征、地理分布、寄主植物、生物学特性及危害等,并对其检疫重要性进行了分析.     

几种鱼细胞的培养及其在进境检疫中的应用

鱼类细胞培养技术是研究鱼类病毒学和细胞生物学的重要基础。自Clem等(1961)建立的GF—1细胞株问世以来,据Wolf和Mam(1980)统计,来自冷水性和温水性真骨鱼类组织的细胞系已有61种。80年代以来,我国又有许多新的鱼细胞系相继建立起来。     

动物福利壁垒对中国动物及其产品与相关服务国际贸易的影响与对策建议

作者剖析了动物福利贸易壁垒成因、特征和对国际贸易的影响,指出了中国动物福利存在的问题及与发达国家的差距,评估了动物福利政策对中国动物、动物产品及相关服务出口贸易的影响。提出了构建既适合中国国情又与国际接轨的出入境动物福利保障体系的框架建议：①应积极推动中国动物福利法立法进程;②要切实提高中国动物福利保障水平;③应先行强化出入境动物福利立法;④应在进出口动物福利立法中引入企业推动模式;⑤要充分利用WTO机制应对国外动物福利壁垒;⑥要建立健全动物福利贸易壁垒预警机制;⑦要应用危害分析与关键控制点原理管理动物福利;⑧要逐步建立农场动物福利认证制度。     

进境原木溴甲烷熏蒸处理中气体起始浓度预测模型的建立

本文根据12个船次进境原木溴甲烷熏蒸除害处理数据,对气温、原木材种、原木新鲜度、原木直径、堆垛效果等因素进行数量化,建立起始浓度与投药剂量及各因素之间的回归模型.研究结果表明,以溴甲烷熏蒸剂起始浓度为基准变量,气温、材种、原木直径、原木新鲜度、堆垛效果为说明变量,采用数量化回归途径建立溴甲烷熏蒸气体起始浓度预测模型是可行的.     

H9亚型禽流感病毒间接免疫荧光检测方法的建立与比较

将禽流感病毒(AIV)接种犬肾上皮细胞(MDCK),24h后以鸡抗禽流感抗体和兔抗鸡荧光抗体进行间接免疫荧光试验(IFA),结果于细胞核、细胞质内观察到特异性的荧光。利用96孔细胞板培养MDCK细胞,以间接免疫荧光作为判定指标对禽流感病毒进行毒力测定,并与禽流感病毒通用荧光反转录-聚合酶链反应(荧光RT-PCR)检测方法进行比较。结果表明间接IFA、荧光RT-PCR对同一样品检测的最高稀释度分别为10-5.25TCID50和10-6,Ct<30,两种方法对禽流感病毒的检测敏感性均很高。但由于荧光RT-PCR仅对抽提的RNA进行检测,而间接IFA是对禽流感活病毒进行检测,因此在临床样品检测和动物产品检疫中间接IFA更具准确性和实用性。     

猪传染性胃肠炎病毒SYBR Green I模式实时定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

登录GenBank下载猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的N基因序列,依据保守区设计一对特异性引物,采用SYBR Green I随机结合渗入法,建立检测猪传染性胃肠炎病毒的实时定量RT-PCR检测方法,成功构建了检测TGEV的标准DNA模板,循环阈值(Ct)与标准DNA模板在1.0×10-1.0×107拷贝/μ1浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.9985.该方法用于检测TGEV具有很高的特异性,其敏感性与常规PCR相比可以提高100倍,可以用于猪传染性胃肠炎病毒的快速检测.用建立的检测方法对82份临床样品进行了检测,和普通PCR检测结果100%相符.