全文获取类型
收费全文 | 25565篇 |
免费 | 1586篇 |
国内免费 | 3931篇 |
专业分类
林业 | 559篇 |
农学 | 3134篇 |
基础科学 | 125篇 |
1396篇 | |
综合类 | 11084篇 |
农作物 | 2328篇 |
水产渔业 | 1481篇 |
畜牧兽医 | 7988篇 |
园艺 | 1387篇 |
植物保护 | 1600篇 |
出版年
2024年 | 107篇 |
2023年 | 435篇 |
2022年 | 952篇 |
2021年 | 1142篇 |
2020年 | 1200篇 |
2019年 | 1234篇 |
2018年 | 973篇 |
2017年 | 1379篇 |
2016年 | 1638篇 |
2015年 | 1489篇 |
2014年 | 1506篇 |
2013年 | 1464篇 |
2012年 | 2250篇 |
2011年 | 2249篇 |
2010年 | 1712篇 |
2009年 | 1653篇 |
2008年 | 1490篇 |
2007年 | 1710篇 |
2006年 | 1355篇 |
2005年 | 1047篇 |
2004年 | 778篇 |
2003年 | 620篇 |
2002年 | 452篇 |
2001年 | 430篇 |
2000年 | 340篇 |
1999年 | 289篇 |
1998年 | 180篇 |
1997年 | 132篇 |
1996年 | 138篇 |
1995年 | 97篇 |
1994年 | 103篇 |
1993年 | 89篇 |
1992年 | 89篇 |
1991年 | 67篇 |
1990年 | 42篇 |
1989年 | 51篇 |
1988年 | 32篇 |
1987年 | 34篇 |
1986年 | 21篇 |
1985年 | 11篇 |
1984年 | 5篇 |
1983年 | 7篇 |
1982年 | 9篇 |
1981年 | 4篇 |
1978年 | 2篇 |
1977年 | 5篇 |
1963年 | 5篇 |
1962年 | 12篇 |
1956年 | 22篇 |
1955年 | 27篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 125 毫秒
41.
鸡白介素18基因原核表达质粒构建 总被引:7,自引:0,他引:7
根据已发表的江西土鸡白介素 -1 8(Ch IL-1 8) c DNA编码基因序列设计引物 ,用PCR技术从 p MDCh IL-1 8质粒扩增出编码鸡IL-1 8成熟蛋白基因 ,重组于 p BV2 2 0表达载体上 ,将重组质粒转化大肠杆菌 JM1 0 9(DE3 ) ,转化子经温度诱导的表达产物 ,SDS-PAGE电泳鉴定约 2万 ,N端开头 1 5个氨基酸序列测定分析 ,证明获得了鸡 IL-1 8成熟蛋白 ,为今后深入研究鸡 IL -1 8的生物学特性及其临床应用打下了基础 相似文献
42.
从BL21(DE3)E.coli菌株中以PCR的方法扩增得到了与T7RNA多聚酶(T7RNApolymerase,T7pol)基因大小一致的DNA片断。将PCR产物纯化后直接克隆到pGEM—T载体中,经酶切鉴定和DNA序列分析表明克隆得到了正确的T7pol基因。将T7pol基因亚克隆入pET-28b( )中,构建得到原核表达质粒pET28T7。该质粒的BL21(DE3)pLysS转化菌在IPTG的诱导下可表达约98800的蛋白,这与T7pol的相对分子质量一致。将该质粒转化DH5α、JMl09、HBl01、BL21(DE3)和BL21(DE3)pLysS等5种不同的宿主菌,仅有转化T7pol酶活性受到抑制的宿主菌BL21(DE3)pLysS才能得到转化子,而其余4种T7T7pol酶活性不受抑制的E.coli宿主菌不能得到转化子。pET28T7原核表达质粒这种仅能在T7pol酶活性受到抑制的宿主菌中才能存活的现象说明本试验所克隆的T7pol基因能正确表达出具有RNA转录酶活性的蛋白。 相似文献
43.
用PCR方法从人的基因组DNA中扩增了人血栓调节蛋白(hTM)基因,将其克隆到带有人EF-1α启动子的pEF-neo哺乳动物表达载体上,得到表达质粒pEF-TM。在转染pEF-TM的COS-1细胞中,hTM得到了瞬时表达,并且正确地定位到细胞膜上。用pEF-TM转染猪内皮细胞(PEC),经G418筛先得到稳定转染的克隆。凝血活性测定结果显示,表达hTM的PEC凝血时间明显延长,表明其抗凝血能力增强。通过显微注射方法,得到了1只F0代hTM转基因小鼠。Southern杂交结果表明,该转基因小鼠整合了9个拷贝的pEF-TM DNA,并能将外源DNA遗传给后代。 相似文献
44.
45.
46.
采用二次微分的方法,得到了角形区域Ω1的Affine变换关于其边界值不是极值映照.并明确给出在边界同伦下唯一极值的Teichmuler映照. 相似文献
47.
48.
弓形虫P30基因及其功能 总被引:1,自引:0,他引:1
徐大刚 《中国兽医寄生虫病》2002,(3)
弓形虫 P30基因所编码的蛋白为弓形虫主要表面抗原 SAG1 ,其约占速殖子总蛋白量的 5 %,SAG1对虫体侵入宿主细胞及其毒力具重要性 ,并有高度免疫原性和免疫保护性 ,被用于弓形虫疫苗的研制和弓形虫感染的分子诊断 相似文献
49.
50.
伪狂犬病病毒上海株gE和gI基因的克隆及序列分析 总被引:2,自引:0,他引:2
参考Genebank发表的伪犬病病毒(Pseudorabies Virus,PRV)的gI和gE基因序列,自行设计并合成了两对引物,对PRV上海株(PRV-SH)进行PCR扩增,产物经琼脂糖电泳分析,均呈现一条约960bp和1740bp的条带,将其克隆入pGEM-T-easy载体中,进行了序旬测定,将PRV-SH株的gI基因与Rice株gI基因比较发现,核苷酸的同源性为94.7%,氨基酸的同源性为91.3%,证实为gI基因,将PRV-SH gE基因序列与Ea株、Ruce株gE基因序列进行比较,结果显示,该序列与PRV Ea株、Rice株gE基因的同源性分别为98.5%、97.5%;的氨基酸序列与Ea株,Rice株和I型单纯疱疹病毒(HSV-1)17株gE的同源性分别为97.2%、94.8%和15.6%。 相似文献