鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白FliC的原核表达及其对口蹄疫疫苗的佐剂作用

用PCR扩增鼠伤寒沙门菌基因FliC,将PCR产物克隆至pMD18-T载体中,构建了克隆质粒pMD18-FliC。克隆质粒和pET-his载体用EcoR/Nhel双酶切,将得到的纯化基因FliC亚克隆至pET-his内,构建重组质粒pET-his-FliC。酶切、测序鉴定后,分别将重组质粒转染大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达,菌体蛋白超声处理,上清液用AKTA Explorer蛋白纯化系统纯化。用SDS-PAGE分析所得蛋白,发现于约53 000处出现了与目的蛋白一致的外源蛋白带。293-mTLR5细胞活性检测表明该融合蛋白能刺激TLR-5通路,引起NF-κB的活化。用小鼠模型检验FliC对O型口蹄疫抗原的免疫增强作用,证明其对口蹄疫疫苗具有佐剂作用。     

仔猪水肿病蜂胶佐剂多价灭活苗的研制I.疫苗制备工艺

针对仔猪水肿病发病迅速 ,病死率很高且很难用抗菌药物控制的特点 ,旨在研制一种预防该病的新型高效疫苗。采用仔猪水肿病多发病型菌株O1 3 8、O1 3 9、O1 4 1 以及湖北地方病型菌株作为制苗用菌种 ,优化其培养条件 ,采用蜂胶作为制备疫苗的佐剂 ,对研制的疫苗进行检验。结果表明菌种在优化培养基上生长旺盛 ,疫苗安检小鼠及仔猪全部健活 ,效力检验免疫组保护率达到 10 0 %。结果表明该疫苗制备工艺切实可行 ,疫苗安全性好 ,保护力强 ,值得进一步研究     

鸡大肠杆菌病中草药佐剂多价灭活苗的研制Ⅱ.疫苗免疫产生期、免疫持续期及保存期试验

对鸡大肠杆菌中草药佐剂多价灭活苗进行了免疫产生期、免疫持续期、疫苗保存期试验。研究表明 :雏鸡接种该疫苗 3～ 5d后便产生免疫力 ,到 9d时抗体产生水平已经很高 ;以免疫攻毒保护率不低于 80 %为标准 ,疫苗的免疫持续期可在 7个月以上 ;以物理性状合格和免疫攻毒保护率不低于 80 %为标准 ,疫苗置 4℃时保存期为 18个月 ,2 5℃保存 6个月为宜。     

不同佐剂对卡介苗的免疫增强作用

以牛型结核分枝杆菌敏感动物豚鼠为实验动物 ,分别以猪苓多糖 (PUP)、IL-2和 IL-3真核表达质粒为免疫佐剂 ,比较研究 3种佐剂对卡介苗 (BCG)免疫效果的调节作用和免疫器官的病理变化。在首免后第 50 d和二免后第 50 d,进行间接 EL ISA和 MTT比色检测及组织病理学检测 ,结果显示 ,PUP和 IL -2真核表达质粒、IL -3真核表达质粒均能增强豚鼠体液免疫和细胞免疫应答 (P <0 .0 5或 P <0 .0 1 ) ,而 PUP的佐剂作用则更为突出     

Adjuvant effects of recombinant giant panda (Ailuropoda melanoleuca) IL-18 on the canine distemper disease vaccine in mice

Canine distemper virus (CDV) is a morbillivirus known to cause morbidity and mortality in a broad range of animals. Giant pandas (Ailuropoda melanoleuca), especially captive ones, are susceptible to natural infection with CDV. Interleukin-18 (IL-18) is a powerful adjuvant molecule that can enhance the development of antigen-specific immunity and vaccine efficacy. In this study, a giant panda IL-18 gene eukaryotic expression plasmid (pcAmIL-18) was constructed. Female BALB/c mice were muscularly inoculated with the plasmids pcAmIL-18, pcDNA3.1 and PBS, respectively. They were subsequently injected with an attenuated CDV vaccine for dogs, and the induced humoral and cellular responses were evaluated. The results showed that pcAmIL-18 remarkably improved the level of specific antibody, IFN-γ and IL-2 in mice sera, the T lymphocyte proliferation index and the percentage of CD4⁺ and CD8⁺ cells. These data indicated that pcAmIL-18 is a potential adjuvant that promotes specific immunity.     

助剂S240对水分散性粒剂及乳油药液雾化的影响

为探究药液性质对喷头雾化的影响,该文应用粒子图像分析系统、高速摄影仪及粒径分析仪对ST110-03喷头与IDK120-03喷头进行试验研究,分析了水分散性粒剂Don-q、乳油Score及2种药剂条件下助剂Breakthru S240浓度对雾化区及雾滴谱的影响。未添加助剂时,农药剂型不同,2类喷头的雾化区及雾滴体积中径(volume medium diameter,VMD)均发生显著变化,水分散性粒剂溶液与自来水的雾化区结构、液膜长度和VMD相差不大;乳油溶液可以使2类喷头的雾化区结构发生显著变化,液膜长度分别减小35.2%和40.5%,VMD分别增大13.5%和28.9%;不同剂型农药条件下,随助剂浓度增大,2类喷头液膜区及破碎区结构均发生不同程度的变化,液膜长度均先减小后增大,VMD先增加后减小,即液膜长度变化与VMD变化呈现负相关性。结合药液理化性质研究发现表面张力是影响雾化的重要因素之一。该研究可为田间助剂浓度的添加范围及喷头雾化特性的模拟与模型建立提供参考。     

公雏免疫去势的研究

采用成熟公鸡的睾丸为抗原或加上弗氏完全佐剂制成抗原制剂,对10～15日龄的公雏进行免疫去势。试验成功地抑制了睾丸的生长,试验各组的睾丸平均重量分别为4.0g、4.55g、4.97g、1.52g、1.34g,其中最小的为0.2g,而对照组的睾丸均重为10.68g。降低了血液中性激素睾丸酮的含量,试验组平均为6.24ng/d1和24.88ng/d1,其中最低为0.1ng/d1,而对照组为29.9ng/d1。同时免疫去势后的公雏增重快,平均比对照组多增重120g至160g,比人工手术去势多增重220g左右。免疫去势组肌肉的蛋白质全氨基酸含量均超过了对照组。     

3类功能助剂对酥梨的安全性及其对 重要害虫防效的影响

为明确3类不同功能助剂在酥梨园的安全使用技术及其对梨园重要害虫防效的影响, 在田间梨树不同发育期, 调查3类?共6种功能助剂对果实和叶片的药害率; 调查3种安全助剂与4种农药混配后对梨小食心虫和梨木虱的防效?结果表明, 6种功能助剂对梨果药害率从高到低依次为15 d幼果?45 d小果和75 d膨大期果实; 6种助剂对叶片均安全?在较低温度下施药可显著降低功能助剂对梨果的药害率?6种助剂对果实药害率从高到低依次为NF100?Silwet 408?GY-Tmax?GY-T1602? GY-T12和迈道?迈道?GY-T12显著提高22.4%螺虫乙酯悬浮剂?20%呋虫胺可溶粒剂和5%阿维菌素微乳剂对梨木虱的防效, GY-T1602显著提高了22.4%螺虫乙酯悬浮剂和20%呋虫胺可溶粒剂的对梨木虱的防效; 迈道?GY-T12和GY-T1602显著提高了5%阿维菌素微乳剂?20%呋虫胺可溶粒剂和4.5%高效氯氰菊酯微乳剂对梨小食心虫的防效?该结果为功能助剂在酥梨园的安全使用提供了科学依据?     

喷头类型对植保无人机低容量喷雾雾滴在稻田冠层沉积分布及防治效果的影响

为减少植保无人机施药过程中的雾滴飘移,提高农药有效沉积率,选用多旋翼植保无人机探讨喷头类型和添加迈飞助剂对10%溴氰虫酰胺可分散油悬浮剂喷雾雾滴的沉积分布及其防治水稻二化螟Chilo suppressalis效果的影响。结果表明：IDK120-01型喷头+1.0%迈飞助剂处理在水稻冠层、中层、底层的雾滴体积中径D_V50均显著高于其他处理,在冠层的单位面积沉积量和农药有效沉积率分别为1.57 μg/cm²和63.89%,也均显著高于其他处理,且单位面积沉积量以冠层最高,中层次之,底层最低;喷头与助剂互作对防飘移率的影响显著,IDK120-01型喷头+1.0%迈飞助剂处理的防飘移率为76.08%,显著高于其他处理,该条件下喷施10%溴氰虫酰胺可分散油悬浮剂对二化螟的防治效果可达74.58%,水稻理论产量为8 905.80 kg/hm²,均显著高于其他处理。表明在溴氰虫酰胺药液中添加1.0%迈飞助剂,采用IDK120-01型喷头进行植保无人机喷洒作业防治水稻二化螟时,能有效减少雾滴飘移,增加单位面积沉积量及农药有效沉积率,提升对二化螟的防治效果。